C 33 备案号：8597-2001 人人 中华人民共和国医药行业标准 YY/T0127.8-2001 neqIS010993-6:1994 口腔材料生物学评价 第2单元：口腔材料生物试验方法 皮下植入试验 Biological evaluation ofdental materials- Part 2:Biological evaluation test method of dental materials -Subcutaneousimplanttest 2001-03-12发布 2001-08-01实施 国家药品监督管理局发布 YY/T0127.8—2001 前 言 本标准非等效采用ISO10993-6：1994《医疗器械生物学评价———第6部分：植人后局部反应》，并根 据口腔材料的特点对动物选择、试验周期及结果评价作了具体规定，并在编辑上作了软大修改。 本标准为YY0268一1995《口腔材料生物学评价第1单元：口腔材料生物性能评价导则》提供了 具体的方法。 本标准由国家药品监督管理局提出。 本标准由全国口腔材料和器械设备标准化技术委员会归口。 本标准由国家药品监督管理局北医医疗器械质量监督检验中心负责起草。 本标准主要起草人：林红、刘文一。 YY/T0127.8-2001 ISO前言 ISO(国际标准化组织）是由各国标准化团体(ISO成员团体)组成的世界性的联合会。国际标准的 制定工作通常由ISO的技术委员会完成，各成员团体若对某技术委员会确立的标准项目感兴趣，均有 权参加该委员会的工作。与ISO保持联系的官方或非官方的国际组织也可参加有关工作。ISO与国际 电工委员会（IEC)在电工技术标准化方面保持密切的合作关系。 由技术委员会通过的国际标准草案提交各成员团体表决。国际标准草案需取得至少75%以上参加 表决的成员团体的同意才能作为国际标准发表。 国际标准ISO10993-6是由ISO/TC194医疗器械生物学评价技术委员会制定的。 ISO10993的总标题是医疗器械生物学评价，由下列部分组成： 第1部分：试验选择指南； 第2部分：动物保护要求； 第3部分：遗传毒性、致瘤性和生殖毒性试验； 第4部分：与血液相互作用试验选择； 第5部分：细胞毒性试验：体外法； 第6部分：植入后局部反应试验； 第7部分：环氧乙烷灭菌残留量； 第9部分：与生物试验有关的材料的降解（技术报告）； 第10部分：刺激与致敏试验； 第11部分：全身毒性试验； 第12部分：样本制备与标准样品； 第13部分：聚合物降解产物的定性与定量； 第14部分：陶瓷降解产物的定性与定量； 第·15部分：涂层及未涂层金属及合金的降解产物的定性与定量； 第16部分：医疗器械降解产物及可沥滤物毒性动力学研究设计基本准则； 第17部分：工业化灭菌的医疗器械戊二醛和甲醛残留量。 本标准的附录A、附录B和附录C仅供参考。 中华人民共和国医药行业标准 口腔材料生物学评价 第2单元：口腔材料生物试验方法 YY/T0127.8-2001 neqISO10993-6:1994 皮下植入试验 Biological evaluation of dental materials Part 2.Biological evaluation test method of dental materials -Subcutaneousimplanttest 1范围 本标准规定了口腔材料的皮下组织植人试验方法。 本标准适用于评价长期与口腔组织接触的口腔材料对皮下组织的反应。 2引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均 为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 GB/T16886.6—1997医疗器械生物学评价第6部分：植人后局部反应 (idtISO10993-6:1994) 3试样制备 3.1非固体材料 非固体材料包括液体材料、软育和粉末。可在使用前调和并在不同时间内植入。 可将材料装人内直径约1.5mm、长约5mm的管中进行试验。常用的管材有聚乙烯（PE)、聚丙烯 (PP)或聚四氟乙烯(PTFE）。 试验前将管子用70%乙醇（V/V)及蒸馏水清洗，高压蒸汽灭菌或其他与临床应用相同的消毒方法 灭茵。 按产品说明制备试验材料。将材料装入管中，管端部充填平整，端部材料表面及管端部均应光滑。应 避免管外表面被材料污染及管内存有气泡。 3.2固体材料 3.2.1片状材料制成直径10~12mm，厚0.3~1mm的试样。 3.2.2块状材料制成直径1.5mm、长5mm的柱状（两端锐边修饨）的试样。 3.3对照材料 对照材料应选择临床应用中已确定对机体无毒、无刺激且与试验材料预期临床使用相似的材料。对 照材料尺寸、形状、特别是表面条件、消毒方法，应尽量与试样一致。 3.3.1若材料装人管内，则对照样品应为与管子同样材料的柱状体，直径约1.5mm、长约5mm。 3.3.2金属材料可选用外科植入用不锈钢、钻铬合金、钛和钛合金为对照材料。 3.3.3非金属材料可选用外科植人用超高分子量聚乙烯、高纯度陶瓷为对照材料。 国家药品监督管理局2001-03-12批准 2001-08-01实施 YY/T0127.82001 3.4试样的清洗及消毒 按厂家使用说明书推荐的方法，对制备好的材料及对照材料进行清洗及严格的消萨。 3.5样本数量 每种材料，每个观察期至少12个试样、12个对照材料。 4试验动物 试验动物应符合国家实验动物管理条例要求。 可选用成年大白鼠、豚鼠或免中的一种。长期试验还可选择狗、羊、猪。 每种材料每个植入期至少采用3只动物。 5试验周期 4周与12周。 注：若材料长期植人人体软组织内，则试验周期应延长，参见GB/T16886.6-1SO10993-6。 6试验方法和步骤 6.1动物的麻醇 采用适当的麻醇方法，将动物麻醇。 6.2植人方法 可选择6.2.1,6.2.2方法中的一种。试验与对照材料应于相同条件入到相同年龄、性别、种属的 动物的同一部位。 注：皮下至肌肉间（浅筋膜肌层）的部位。 6.2.1背部植人法 麻醇，去除背部植入区的毛发，消术区，防止毛发与植入体接触。皮肤切口应尽量小，以能将植人 体植人皮囊为准。用钝器在皮下制备一个到数个皮囊，囊的末端距切口10mm以上。大白鼠最多制备两 个皮囊。每个裂内植人一个样本，植人体之间不能接触，相互间距至少10mm以上。为防止样品滑向一 侧，可以在两样本之间将皮肤与肌肉缝合一针固定。试验结束后缝合切口。 6.2.2颈部植入法 采用大鼠试验时，在骶骨上方做一10mm的切口，用钝器向颈部做一隧道将植入物推入颈部，可分 别将试样和对照材料植入颈部两侧。用缝合的方法使之固定。 以上两种方法也可采用套针将植入体送到植入部位。 7术后观察 术后定期观察动物，记录异常表现，包括局部、全身及异常行为。若理植部位感染或损伤而影响结 果，则应重新试验。若动物因试验影响以外的其他因素引起死亡时，应补做试验。 8无痛处死 试验周期结束时，应采用超剂量麻醇或其他无痛苦方法处死动物。 9生物反应评价 包括肉眼观察和组织病理学评价。评价时，对同部位的对照植入体进行比较，以将组织和植入体间 运动摩擦产生的反应降至最低限度。 柱状样品的评价部位为柱的中部。装入管内的材料的评价部位为管的末端部。 9.1肉眼观察评价 2 YY/T0127.8-2001 切取包含植入体及其周围组织的组织块。用低倍放大镜检查切下的植入部位组织，记录组织反应特 性和强度。 9.2组织学标本制备 将包含植人体及其周围组织的组织块，固定于福尔马林液中。常规系列乙醇脱水，石蜡包埋。平行 于植人体长轴方向进行连续切片，H-E染色。可在包埋前或包埋后取出植人体。 采用常规技术处理组织样本时，组织包膜在放入固定液之前或之后可能会破裂，应记录植人体表面 的组织床的状态，因为采用常规处理技术处理样本，靠近植人体的组织层通常会被破坏。 9.3组织学观察 组织反应程度根据对植入体/组织界面至正常组织和血管物性未受影响区域距离的测量来确定，记 录与植人体尺寸有关的切片定位、植入体定位、切片数量和组织块的几何形状。 应记录如下反应指标： a）纤维化/纤维囊腔和炎症程度； b）组织形貌变化、变性； c）材料/组织界面处炎性细胞类型（如中性细胞、淋巴细胞、浆细胞、嗜酸性白细胞、巨噬细胞及 多核细胞）、数量和分布； d）组织坏死，如细胞核出现碎片及/或血管壁破裂； e）材料碎屑、脂肪没润、肉芽肿等； f）对于多孔植人材料，定性、定量测定长人材料内的组织。 9.4组织反应分级 9.4.1无反应或轻度组织反应 4周时，组织结构良好，对照与材料引起的组织反应无明显差异，无明显炎症。 12周时，组织结构良好，对照与材料引起的组织反应无明显差异，无明显炎症反应。 9.4.2中度组织反应 4周时，组织保持其结构，但可见一些炎症细胞，组织内含白细胞（但无明显聚集），淋巴细胞、浆细 胞、巨噬细胞、偶有异物细胞，与对照接触的组织内无或仅有少量炎症细胞。 12周时，组织有一些慢性炎症细胞没润，如淋巴细胞、浆细胞、巨噬细胞、偶有异物细胞。而与对照 接触的组织为纤维组织。 9.4.3重度组织反应 4周时，组织反应严重，组织丧失其原有结构并有中性白细胞及淋巴细胞聚集。 12周时，组织反应严重，可见大量淋巴细胞、巨细胞、巨噬细胞等慢性炎症细胞聚集，偶有异物细胞 聚集。组织可能已恢复部分结构。 10结果评价 10.14周及12周均为无反应或轻度组织反应，则认为该材料无组织反应或轻度组织反应。 10.24周时为