ICS 11.060.10 YY c 33 中华人民共和国医药行业标准 YY/T0127.14—2009 口腔医疗器械生物学评价 第2单元：试验方法 急性经口全身毒性试验 Biological evaluation of medical devices used in dentistry- Part 2:Test methodAcute oral toxicity test 2010-12-01实施 2009-06-16发布 国家食品药品监督管理局 发布 YY/T0127.14—2009 前言 《口腔医疗器械生物学评价》系列标准中的第1单元，YY/T0268一2008《牙科学口腔医疗器械生 物学评价第1单元：评价与试验》是口腔医疗器械生物学评价与试验项目的选择，为指南性标准。 YY/T0127《口腔材料生物学评价第2单元：试验方法》分为以下几部分： YY/T0127.1—1993口腔材料生物试验方法溶血试验； YY/T0127.2一2009口腔医疗器械生物学评价第2单元：试验方法急性全身毒性试验 静脉途径； YY/T0127.3—1998 口腔材料生物学评价 第2单元：口腔材料生物试验方法根管内应 用试验； -YY/T0127.4—1998 口腔材料生物学评价 第2单元：口腔材料生物试验方法 骨埋植 试验； YY/T0127.5—1999 口腔材料生物学评价 第2单元：口腔材料生物试验方法 吸入毒性 试验； YY/T0127.6—1998 口腔材料生物学评价 广第2单元：口腔材料生物试验方法 显性致死 试验； -YY/T0127.7—2001 口腔材料生物学评价 第2单元：口腔材料生物试验方法 牙髓牙本 质应用试验； YY/T0127.8—2001 口腔材料生物学评价第2单元：口腔材料生物试验方法 皮下植入 试验； YY/T0127.9—2001 口腔材料生物学评价第2单元：口腔材料生物试验方法 细胞毒性 试验（琼脂覆盖法及分子滤过法）； YY/T0127.10—2009 口腔医疗器械生物学评价第2单元：试验方法鼠伤寒沙门氏杆菌 回复突变试验（Ames试验）； 腔材料生物试验方法盖髓试验； YY/T0127.12--2008 牙科学口腔医疗器械生物学评价第2单元：试验方法微核 试验； YY/T0127.13—2009 口腔医疗器械生物学评价第2单元：试验方法 口腔黏膜刺激 试验； YY/T0127.14—2009 口腔医疗器械生物学评价第2单元：试验方法急性经口全身毒性 试验； YY/T0244一1996口腔材料生物试验方法短期全身毒性试验：经口途径。 本部分为YY/T0127的第14部分。 本部分由国家食品药品监督管理局提出。 本部分由全国口腔材料和器械设备标准化技术委员会归口。 本部分由国家食品药品监督管理局北大医疗器械质量监督检验中心负责起草。 本部分主要起草人：林红、郝鹏、李盛林、葛兮源、付嘉。 YY/T0127.14—2009 口腔医疗器械生物学评价 第2单元：试验方法 急性经口全身毒性试验 1范围 YY/T0127的本部分规定了口腔医疗器械急性经口全身毒性试验方法。 本部分适用于评价口腔医疗器械经口途径的急性全身毒性。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过YY/T0127本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件， 其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本 部分。 GB/T16886.12医疗器械生物学评价第12部分样品制备与参照样品（GB/T16886.12一 2005,ISO10993.122002,IDT) GB/T15193.32003急性毒性试验 3总则 急性经口毒性试验是评估材料毒性特性的一种方式，通过短时间经口染毒可提供对健康危害的信 息。试验结果可作为材料毒性分级和标签标识的依据。急性经口毒性试验是亚慢性试验和其他试验确 定剂量接触方式的初试步骤，并且可提供材料毒性作用模式方面的信息， 4术语和定义 下列术语和定义适用于YY/T0127的本部分。 4. 1 急性经口毒性acuteoral toxicity 一次或在24h内多次经口给予试验动物受试物后，动物在短期内出现的健康损害效应。 4. 2 剂量dose 是接受受试物的数量。以受试物的重量（g，mg）或动物单位体重接受受试物的重量（mg/kg或 g/kg）来表示。 4.3 经口LD50半数致死量1 mediumlethaldose 经口一次给予受试物后，引起试验动物总体中半数死亡的毒物的统计学剂量。以动物单位体重接 受受试物的重量（mg/kg或g/kg）来表示。 5试验原则 灌胃法经口给予各试验组动物不同剂量的受试物，每组用一个剂量，剂量的选择可通过预试验确 定。染毒后观察动物的毒性反应和死亡情况。试验期间死亡的动物要进行尸检，试验结束时仍存活的 1 YY/T0127.14—2009 动物要处死并进行户检。对出现明显不适和痛苦的动物应立即实施安乐死，已知可导致显著疼痛或不 适的腐蚀性或刺激性的材料宜报告，无需再进行试验。 6试验方法 6.1试样制备 6.1.1受试物应溶解或悬浮于适宜的介质中，建议首选水，其次是植物油（如玉米油），或考虑使用其他 介质。对非水溶性介质，应了解其毒理特性，否则应在试验前先确定其毒性。每次所给液体的最大容量 为50mL/kg。通过调整受试物溶液浓度使各剂量组经口染毒的容量接近一致。 材料浸提液的制备按照GB/T16886.12的规定进行。 6.1.2分散介质 根据所用材料，选择如下分散介质之一，使配成的材料呈溶液、乳浊液或悬浮液。 6.1.2.1蒸馏水。 6.1.2.22%淀粉溶液将4g淀粉溶于200mL馏水中，煮沸后冷却至室温，备用。或将2%淀粉液置 于4℃冰箱中，于24h之内使用，用前恢复温度至室温。 6.1.2.3食用级芝麻油或橄榄油。 6.1.2.4其他合适的分散介质（如：1%～3%羧甲基纤维素溶液，桃胶溶液，吐温80）。 6.1.2.50.154mol/L氯化钠溶液。 6.1.3试验材料预备 6.1.3.1固体材料 将材料冷研成或切削成粒度小于200μm的颗粒。制备过程中使用的器具均应不被油、灰尘污染。 若需消毒，则于121℃下消毒30min。若材料不能用蒸汽灭菌法消毒，则用相应其他方法消毒。 6.1.3.2糊状或橡皮样材料 将一定量的材料放于分散介质中达到指定的浓度。用高速搅拌器搅拌混合30s，如需过滤，则应计 算滤液中材料的浓度。 6.1.4试样制备 水溶性材料，用6.1.2.1中的介质制备成20%的水溶液。油溶性材料，用6.1.2.3中的介质制备 成20%油溶液。水油均难溶者可用6.12.2中的介质配成20%混悬液。若材料不能制备成溶液、悬浮 液或乳浊液，或材料难以制成粒度小于200μm的颗粒，则制备材料浸提液。 6.2试验动物 选用健康、初成年大鼠或小鼠。实验动物体重之间相差不得超过平均体重的20%。 如使用雌性动物，宜未育并无孕。在试验前至少3d～5d使动物适应实验室环境。 试验动物及动物饲养应符合国家相应规定。选用常规饲料，饮水不限制。 6.3试验条件 在试验前先对材料潜在毒性进行评价，根据材料特性选择如下试验方法。 对于已知毒性较低的材料，首先进行限量试验，若动物无毒性体征或有毒性体征但无死亡，试验结 束。若动物出现死亡，可考虑进行固定剂量试验或“上-下”法试验。 对于已知有潜在毒性的材料进行固定剂量试验或“上-下”法试验。 6.3.1限量试验：动物经口给服材料的剂量为2000mg/kg，经口给服浸提液的量为50mL/kg，观察动 物的毒性反应。 6.3.2固定剂量试验：选取5mg/kg、50mg/kg、300mg/kg、2000mg/kg的剂量水平（浸提液剂量 0.025mL/kg、0.25mL/kg、1.5mL/kg、10mL/kg），从中间剂量开始试验。观察动物出现毒性反应的 剂量水平。 6.3.3“上-下”法试验：选取1.75mg/kg、5.5mg/kg、17.5mg/kg、55mg/kg、175mg/kg、550mg/kg、 2 YY/T0127.14—2009 2 000mg/kg或5 000 mg/kg的剂量水平(浸提液剂量0. 008 75 mL/kg、0. 027 5mL/kg、0. 087 5mL/kg、 0.275mL/kg、0.875mL/kg、2.75mL/kg、10mL/kg或25mL/kg），从中间剂量开始试验。观察动物 出现死亡的剂量水平。 6.4观察期 观察周期14d，必要时可延长，视动物中毒反应的严重程度、症状出现快慢和恢复期长短而定。若 有迟发性死亡现象，可延长观察时间。 6.5给服方法 用连有灌胃针头的注射器或其他灌胃法给服试样。给服材料前需禁食4h～18h，不禁水。 正式试验时，称量动物体重，对动物用灌胃法一次给予受试物，若不能一次给药，也可在24h内分 多次小剂量给药。给药后继续禁食3h～4h。若采用分批多次给药，根据给药间隔长短，必要时可给动 物一定量的食物和水。随后对动物进行定期的观察记录。 6.6观察 给药后，对每只动物都应有单独全面的记录，要定时观察实验动物的中毒表现和死亡情况，至少每 天进行一次仔细的检查。详细记录被毛和皮肤、眼睛和粘膜，呼吸、循环、自主神经和中枢神经系统、肢 体活动和行为等改变。特别注意是否出现震颤、抽搐、流涎、腹泻、嗜睡和昏迷等症状。应记录中毒体征 出现和消失的时间和死亡时间。具体观察指标见表1。