中华人民共和国出人境检验检疫行业标准 SN/T 0926--2000 进出口茶叶中硒的检验方法 荧光光度法 Method for the determination of selenium in tea for import and export---Fluorimetry 2000- 06-22 发布 2000-11-01实施 中华人民共和国国家出人境检验检疫局‧发布 SN/T 0926—2000 興 本标准是按照GB/T1.1一1993《标准化工作导则第1单元：标准的起草与表述规则第1部分： 标准编写的基本规定》的要求，对原专业标准ZBX55001-1987《出口茶叶中硒的荧光光度测定方法》 进行修订的。 限”。 本标准从实施之日起，同时代替ZBX55001一1987。 本标准由中华人民共和国国家出入境检验检疫局提出并归口。 本标准由中华人民共和国浙江出入境检验检疫局负责起草。 本标准主要起草人：郑自强。 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准 进出口茶叶中硒的检验方法 SN/T0926-2000 荧光光度法 代替ZBX55001—1987 Method for the determination of selenium in tea for import and export -Fluorimetry 1 范围 本标准规定了进出口茶叶中硒的荧光光度检验方法。 本标准适用于进出口茶叶中硒含量的检验。 2引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均 为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 SN0497--1995出口茶叶中多种有机氯农药残留量检验方法 3抽样和制样 3.1抽样 按SN0497规定执行。 3.2制样 参照SN0497规定执行。样品粉碎后过40目筛，混匀，均分成两份，装入清洁容器内，作为试样。密 封，并标明标识。 3.3样品保存 试样于一5℃以下避光保存。 注：在抽样和制样的操作过程中必须防止样品受到污染和发生残留物含量的变化。 4检验方法 4.1方法原理 在弱酸性条件下，亚硒酸与2，3-二氨基萘作用，生成具有强荧光的4，5-苯并苯硒脑络合物，用环已 烷萃取后，测其荧光强度并定量。 4.2试剂和材料 除另有规定外，试剂均为分析纯，水为去离子水。 4.2.1硫酸：优级纯。 4.2.2混合酸：硝酸-硫酸-高氯酸（14十2+2)。 4.2.3乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)溶液：0.1%。 4.2.4盐酸羟胺溶液：10%。 4.2.5氮水溶液（1+1)。 4.2.6盐酸溶液（1+1)。 2000-11-01实施 中华人民共和国国家出人境检验检疫局2000-06-22批准 1 SN/T 0926-2000 4.2.7盐酸溶液：0.1mol/L。 4.2.8环已烷：经测定无荧光杂质，有必要时重蒸馏后使用。 4.2.9甲酚红指示剂：称取0.1g甲酚红，加1滴50%氢氧化钠和10mL水溶解，并稀释到50mL。 4.2.102,3-二氨基萘(DAN)溶液：在暗室中配制。称取0.1gDAN，加0.1mol/L盐酸溶液100mL， 振摇使其溶解。将溶液转入250mL分液漏斗中，加20mL环已烷，剧烈振摇5min，静置分层后，弃去环 已烷相。再加入20mL环已烷，重复萃取三次，收集水相于100mL棕色容量瓶，用水定容并覆盖一层环 已烷，储存于冰箱中，每次临用前再用20mL环已烷萃取一次。 4.2.11硒标准溶液：准确称取0.1000g硒（纯度≥99.9%），加5mL硝酸，温热使其溶解；加水稀释 到100mL，此溶液每毫升相当于100μg硒。 4.2.12硒标准工作液：吸取10.0mL硒标准溶液置于100mL容量瓶，以0.1mol/L盐酸溶液稀释至 刻度，混匀，依次稀释到每毫升相当于0.1g硒。 4.3仪器和设备 4.3.1荧光分光光度计。 4.3.2凯氏烧瓶：250mL。 4.3.3分液漏斗：125mL，250mL。 4.3.4电热恒温水浴锅。 4.3.5控温电炉。 4.3.6具塞三角烧瓶：100mL。 4.3.7具塞刻度试管：5mL。 4.4分析步骤 4.4.1样品前处理 称取1.00g样品置于250mL凯氏烧瓶中，用少量水润湿样品，加入18mL混合酸，在控温电炉上 加热消化。应逐渐升高温度，消化至冒高氯酸白烟，保持1min，此时溶液呈无色或浅黄色，即为消化终 点（在消化过程中如出现炭化现象，需重新取样消化）。取下冷却，加20mL水，继续加热至冒高氮酸白 烟；取下稍冷，加10mL水，待冷却到室温，用20mL～30mL水将样液转入100mL具塞三角烧瓶中， 加0.1%EDTA-2Na溶液2mL。 按样品操作步骤，同时做试剂空白及相应含量的硒标准。 4.4.24,5-苯并苯硒脑络合物的形成 在上述消化液中加入2滴甲酚红指示剂，以氨水溶液(1+1)和盐酸溶液(1+1)调节至溶液呈微橙 红色。然后，加10%盐酸羟胺溶液1mL，放置2min，以下步骤需在暗室内进行。各加入DAN溶液 2mL，摇匀，置沸水浴中加热5min，取出，冷却到室温。全部溶液转入125mL分液漏斗中，加入5mL 环己烷，振摇萃取2min，静置分层，放出下层水相，弃去。将环己烷层从分液漏斗上部倒入5mL具塞试 管中，并用环己烷定容至刻度。 4.4.3测定 荧光分光光度计测定条件如下：激发波长380nm，发射波长523nm，狭缝10nm，1cm测量池。分 别测定样液、试剂空白液和硒标准液中4，5-苯并苯硒脑络合物的荧光强度，与标准对照定量。 4.5结果计算 按式(1)计算试样中硒的含量： E, - E. 1000 X = (1) E, - E. 1000 m 式中：X-试样中硒的含量，mg/kg E。—-试剂空白液的荧光读数； E,—硒标准溶液的荧光读数； 2 SN/T 0926—2000 E2——样液的荧光读数； 一标准溶液中硒的质量，ug; mi- m2样品质量，g。 5方法检出限 本方法检出限为0.01mg/kg。 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 进出口茶叶中硒的检验方法 荧光光度法 SN/T0926—2000 * 中国标准出版社出版 北京复兴门外三里河北街16号 邮政编码：100045 电 话：68522112 中国标准出版社秦皇岛印刷广印刷 版权专有不得翻印 * 开本880×12301/16 印张1/2 字数6干字 2000年9月第一版 2000年9月第一次印刷 印数1-2000 * 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 进出口茶叶中硒的检验方法 荧光光度法 SN/T0926—2000 * 中国标准出版社出版 北京复兴门外三里河北街16号 邮政编码：100045 电 话：68522112 中国标准出版社秦皇岛印刷广印刷 版权专有不得翻印 * 开本880×12301/16 印张1/2 字数6干字 2000年9月第一版 2000年9月第一次印刷 印数1-2000 *