NS 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准 SN/T 0915—2000 进出口茶叶咖啡碱测定方法 Method for the determination of caffeine in tea for import and export 2000-06-22 发布 2000-11-01实施 中华人民共和国国家出人境检验检疫局发 布 SN/T 0915—2000 前 言 本标准是对原专业标准ZBX50010—1986《出口茶叶咖啡碱测定方法》的修订。 本标准与前版无技术路线的改变，仅在标准格式上按照GB/T1.1-1993《标准化工作导则 第1 单元：标准的起草与表述规则第1部分：标准编写的基本规定》的要求进行修订。 本标准从实施之日起，同时代替ZBX50010—1986。 本标准由中华人民共和国国家出入境检验检疫局提出并归口。 本标准由中华人民共和国上海出入境检验检疫局负责起草。 本标准主要起草人：汪玲平、毕立新。 中华人民共和国出人境检验检疫行业标准 SN/T0915-2000 进出口茶叶咖啡碱测定方法 代替ZBX50010--1986 Method for the determination of caffeine in tea for import and export 1范围 本标准规定了进出口茶叶咖啡碱测定的方法。 本标准适用于进出口茶叶咖啡碱的测定。 2引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均 为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 SN/T0918-2000进出口茶叶抽样方法 3抽样 按SN/T0918抽取试样。 4检验方法 4.1原理 将茶叶与沸蒸馏水和氧化镁共热，游离出咖啡碱，经酸化后，用三氯甲烷抽提，抽提液浓缩后，以凯 氏定氮法测得其含氮量，换算为咖啡碱含量。 4.2试剂 4.2.1重质氧化镁：含量在98%以上，氧化镁经900℃灼烧30min，即成重质氧化镁。 4.2.2三氯甲烷：分析纯。 4.2.3硫酸：分析纯，密度1.84kg/L，不含亚硝酸等含氮物。 4.2.4氢氧化钾和氢氧化钠：分析纯。 4.2.5硫酸铜和无水硫酸钾：分析纯，不含铵盐。 4.2.6甲基红次甲基蓝混合指示剂 取0.1g甲基红及0.01g次甲基蓝，溶解于100mL的48%乙醇内，振荡数次，静置（12~15）h后， 过滤，取滤液备用。 4.2.70.1%甲基橙指示剂。 4.2.81%酚酸指示剂。 4.2.90.1mol/L氢氧化钠标准溶液 取氢氧化钠4.5g，溶于1L刚煮沸冷却后的蒸馏水中。用下法标定其浓度： 精确称取邻苯二甲酸氢钾（基准试剂)0.7g置于300mL锥形瓶中，加蒸馅水50mL，溶解后，煮沸 数分钟。冷后加入酚酸指示剂3滴，随即用氢氧化钠标准溶液滴定至粉红色为止。按式(1)计算： 中华人民共和国国家出人境检验检疫局2000-06-22批准 2000-11-01实施 1 SN/T0915—2000 G 氢氧化钠标准溶液的摩尔浓度一 1） VX0.2042 式中：G——邻苯二甲酸氢钾质量，g; V——滴定时消耗氢氧化钠标准溶液体积，mL； 0.2042-与0.1mo1/L氢氧化钠标准溶液相当的邻苯二中酸氢钾的毫摩尔数。 4.2.100.1mol/L硫酸标准溶液 用蒸馏水稀释2.7mL硫酸至1L，混合均匀，其浓度以甲基橙为指示剂，用上述氢氧化钠标准溶液 标定。 . 4.2.1140%氢氧化钠溶液 取200g不含硝酸盐的工业用氢氧化钠，溶于蒸馏水，稀释至500mL。 4.2.121%氢氧化钾溶液。 4.3仪器 4.3.1分析天平：感量0.0001g。 4.3.2锥形瓶：1000mL，500mL，300mL。 4.3.3分液漏斗：500mL，125mL。 4.3.4凯氏烧瓶：500mL。 4.3.5凯氏定氮装置。 4.3.6标准筛：630μm。 4.4分析步骤 称取磨碎、通过630μm筛的5g茶样（精确至0.0002g），置于已知质量的1L锥形瓶中，加入蒸馏 水约500mL，旋转摇匀，加热至沸腾。加入10g重质氧化镁，在小火上轻微煮沸，时时摇动，并加入少量 蒸馅水，以阻止泡沫发生和将粘附在瓶上茶叶冲洗下去。经2h，停火冷却，加蒸馏水至液体和样品总质 量达510g，过滤，收集澄清的滤液200mL（相当于样品质量的40%）于500mL分液漏斗中，加入 20mL硫酸（1十9)溶液，用三氯甲烷抽取6次，用量依次为25、20、15、10、10、10mL，合并抽提液于 125mL分液漏斗中，加入5mL1%氢氧化钾溶液，振摇，静置，分层后排尽三氯甲烷层至凯氏烧瓶中，用 每份10mL三氯甲烷的洗涤分液漏斗中的碱液2次，合并三氯甲烷洗液于上述凯氏烧瓶中，蒸发或蒸馏 至三氯甲烷的体积小于25mL。依次加入10g无水硫酸钾、0.5g硫酸铜和25mL硫酸，先在酸的沸点 下加热，然后逐渐提高温度至泡沫消失，并继续煮解，至溶液变为淡色而透明，再煮解0.5h。放冷，加 200mL蒸馏水，混匀。加入锌粒或浮石数粒，再沿瓶壁徐徐加入40%氢氧化钠溶液，使溶液呈强碱性，迅 即用安全球紧密连接定氮瓶和冷凝器。冷凝器的出口应预先接好球管。直伸至500mL锥形瓶中 50mL0.1mol/L硫酸标准溶液和2~3滴甲基红次甲基蓝混合指示剂的液面以下。将定氮瓶中内容物 摇匀后，加热蒸馏至其中液体减少至约150mL时，断开定氮瓶与安全球，停止蒸馏。用蒸馏水洗涤安全 球及冷凝器，收集洗液于受器内，然后，以0.1mo1/L氢氧化钠标准溶液滴定受器中剩余的酸，直至呈浅 绿色为止，记下读数。 另在同样条件下做试剂的空白试验。 4.5结果计算 茶中咖啡碱的干态百分率(X)按式(2)计算： (V。--V)X 4.85 X(%) = （2） 式中：V。空白测定所用0.1mol/L氢氧化钠标准溶液体积，mL； V一试样滴出所用0.1mol/L氢氧化钠标准溶液体积，mL； G试样质量，g; M—试样干物质含量百分率，%； 2 SN/T 0915—2000 4.85- 与0.1mol/L氢氧化钠标准溶液相当于无水咖啡碱的毫克数。 4.6允许误差 测定应作双试验。由同一分析者、同时或相继进行的二次测定结果之差，不得超过0.2%。 0915—2000 SN/T 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 进出口茶叶咖啡碱测定方法 SN/T0915—2000 中国标准出版社出版 北京复兴门外三里河北街16号 邮政编码：100045 电 话：68522112 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 版权专有不得翻印 开本880×12301/16印张1/2 字数4千字 2000年9月第一版2000年9月第一次印刷 印数1-2000 0915—2000 SN/T 中华人民共和国出入境检验检疫 行业标准 进出口茶叶咖啡碱测定方法 SN/T0915—2000 中国标准出版社出版 北京复兴门外三里河北街16号 邮政编码：100045 电 话：68522112 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 版权专有不得翻印 开本880×12301/16印张1/2 字数4千字 2000年9月第一版2000年9月第一次印刷 印数1-2000