B 52 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC 1031—2001 斑点叉尾 Channel catfish 2001-09-27发布 2001-11-01实施 中华人民共和国农业部发布 SC 10312001 前言 斑点叉尾是北美的一种重要养殖鱼类，1984年引进我国。为鉴别斑点叉尾鲷与鲈科和其它科 鱼类，保护和保存其优良的性状及种质，避免在苗种生产过程中种质混杂或退化，开展有效的种质监测， 特制定本标准。 本标准主要以引进以来，开展的消化、吸收研究的科研成果为基础，收集国外有关斑点叉尾的技 术资料，并且充分吸收了国内有关科研单位的应用成果。 本标准的附录A、附录B都是标准的附录。 本标准由农业部渔业局提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口。 本标准起草单位：湖北省水产科学研究所。 本标准主要起草人：蔡焰值、黄。 中华人民共和国水产行业标准 SC10312001 斑点叉尾 Channel catfish 1范围 本标准给出了斑点叉尾鲫（IctaluruspunctatusRafinesque）主要生物学性状、生化指标、遗传学特 性，以及测定方法。 本标准适用于斑点叉尾的种质鉴定。 2名称与分类 2.1学名 斑点叉尾(IctaluruspunctatusRefinesque)。 2.2分类位置 属形目（Siluriformes），科（Ictaluridac），鲫亚科（Ictaluiae），斑点属（Ictalurus）。 3主要生物学性状 3.1外部特征 3.1.1形态特征 体型粗而较长，背鳍起点处隆起，后背部斜平，腹部平直稍浑圆。头部较小，吻唇稍尖，亚端位，横裂。 体表无鳞，粘液丰富，侧线完全，侧线孔较明显。上下颌均有锐利向内稍弯的齿。有一肥厚脂鳍，末端游 离。尾鳍分叉较深。触须4对，其中颌须一对，末端超过胸鳍基部，颐须2对，鼻须1对。背部灰褐色，腹 部乳白色。体侧有不规则的灰黑色斑点。斑点叉尾的外形见图1。 图1斑点叉尾外形 3.1.2可数性状 3.1.2.1各鳍的鳍条数见表1。 中华人民共和国农业部2001-09-27批准 2001-11-01实施 1 SC 1031—2001 表 1 各鳍的鳍条数 背鳍条数 胸鳍条数 腹鳍条数 臀鳍条数 尾鳍条数 1,6~8 1,8~9 8~9 26~29 29~30 3.1.2.2第一鳃弓外侧鳃耙数21～23。 3.1.3可量性状 可量性状的变动值随体长增长相对增大（见表2)。 表2可量性状比例值 体长/头长 2.3~4.6 头长/吻长 2.5~3.1 体长/体高 3.5~5.9 头长/眼径 8.9~12.4 体长/尾柄高 8.9~11.4 头长/尾柄高 2.5~2.9 体长/尾柄长 5.0~7.3 尾柄高/尾柄长 0.5~0.7 3.2内部特征 3.2.1 缥分二室，前室粗短，后室稍小于前室而长，缥内有“T”型结缔组织，将后室隔为左右二室。 3.2.2肋骨 肋骨10对。 3.2.3上下领齿 上下颌上有尖刺而向内稍弯的细齿，中央密而两边渐稀。 3.2.4脊椎骨 脊椎骨总数（颅后椎骨十腹椎骨+尾椎骨）为93，即（3十44十46）。 3.2.5腹膜 黑色。 3.2.6肠 肠长/体长为2.0~2.3：1。 3.2.7胃 食道末端与肠道前端之间“V”型胃。 3.3生长与繁殖 3.3.1生长 不同年龄组的鱼体长和体重的理论值见表3。 表3不同年龄组的鱼体长和体重的理论值 年龄，龄 1 3 4 体长，cm 26.1~28.9 32.6~35.2 42.1~45.8 51.9~57.3 体重,g 490.37±103.21 1439.55±145.37 2 470.25±172.11 3734.21±188.33 注：主要根据脊椎骨切片上的年轮数确定年龄。 3.3.2繁殖 3.3.2.1性成熟年龄：雌鱼为4+，雄鱼为3+。 3.3.2.2性成熟个体，性腺一年成熟一次，一次产卵。 3.3.2.3繁殖水温20℃28℃，最适水温24℃～26℃。 3.3.2.41 怀卵量：绝对怀卵量3913~15016粒。 相对怀卵量30 粒/g。 2 SC 1031—2001 4生化指标 乳酸脱氢酶同工酶 斑点叉尾的肝组织中的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶电泳酶谱见图2，肝脏的LDH图谱的Ⅲ区有3 条酶带。肝脏LDH同工酶酶带扫描图见图3。 图2肝脏LDH同工酶电泳图谱 图3肝脏LDH同工酶酶带扫描图 5遗传学特性 5.1体细胞染色体2倍数 2n=58。 5.2核型 全部染色体可配成29对同源染色体，中部和亚中部着丝粒染色体（m组和sm组)7对，亚端部和端 部着丝粒染色体(st组和t组）22对，总臂数（NF)为72（见图4) + X Kx Xx xx xX Xx xx AA A人 AA D 图4斑点叉尾鲍染色体组型 6检测方法 6.1生化分析 SC 1031--2001 6.1.1样品制备 取斑点叉尾若干尾，切断尾部，同时去鳃，放血。随后解剖，迅速摘取肝脏组织。组织块用4℃生理 盐水洗净，然后转人玻璃匀浆器，按1：5（重量/体积)的比例加入pH7.4的冰冻磷酸缓冲液[磷酸缓冲 液的配制见附录A（标准的附录)]，在冰浴中匀浆。匀浆液置于4℃冰箱中放置1h～2h后，于4℃离心 30min（3000r/min）。离心后吸取上清液置于一50℃低温冰箱中保存，供同工酶电泳分析用。 6.1.2电泳方法 采用不连续聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳。分析LDH同工酶所用的分离胶浓度为5.6%，电极缓 冲液用三羟甲基氨基甲烷(Tris)-甘氨酸系统[配制方法见附录A（标准的附录)]。电泳在4℃冰箱中进 行，开始电泳电压为240V，电泳30min50min后，将电压调至360V，电泳时间为4.5h6h。 6.1.3染色和酶谱分析 LDH同工酶染色液[配方见附录B(标准的附录)]置于37℃恒温生物培养箱内进行分析。染色时间 为60min，染色完毕后用去离子水漂洗2～3次，将胶带用7%醋酸溶液固定，于20%的甘油中保存。同 工酶胶带采用双波长扫描仪扫描，以确定酶带数目和酶谱模式图（见图2）。 6.2染色体检测 6.2.1标本制备 对活鱼胸鳍下注射以生理盐水配制的植物血球凝聚素（PHA)溶液，剂量为每克鱼体10μg～ 20μg，12h后腹腔注射秋水仙碱，每克鱼体注射10ug～25ug。2h～4h后切断尾及鳃动脉放血5min ～10min，取出头、肾部分，于少许生理盐水中快速撕制成细胞悬液，经0.0375mol氯化钾（KCl)低渗处 理30min，用甲醇：冰乙酸（3：1）固定，空气干燥制片，吉姆萨（Giemsa）染色30min[吉姆萨染色液的 配制见附录B（标准的附录）。 6.2.2计数和形态分类 每尾鱼的染色体标本镜检100个中期分裂相，确定它们的染色体数目。同时各选取5个清晰可靠的 中期分裂相显微摄影放大，测量染色体臂长，并计算臂比，着丝粒指数及相对长度进行配对。染色体的分 组按以下规定划分：即臂比1.0～1.7为中部着丝粒染色体（m组）；1.71～3.0为亚中部着丝粒染色体 (sm组）；3.1～7.0为亚端部着丝粒染色体（st组）；7.1～o为端部着丝粒染色体（t组）。 SC 1031-2001 附录A （标准的附录） 缓冲液的配制 A1 磷酸缓冲液的配制 0.01mol磷酸氢二钠溶液81.0mL 0.01mol磷酸二氢钠溶液19.0mL 加水至1000mL pH7.4 A2 电极缓冲液的配制 A2.1A液 三羟甲基氨基甲烷 6.0 g 28.8 g 甘氨酸 加水至1000mL pH 8.3 使用时不稀释或稀释10倍。 A2.2B液 0.223mol三羟甲基氨基甲烷(Tris27.01g/L) 0.086mol柠檬酸（18.07g/L） 用氢氧化钠(NaOH)调节至pH7.0。 附录B (标准的附录） 染色液的配制 B1LDH同工酶氨基黑-10B染色液配制 7%乙酸中0.5%~1%氨基黑。 B2吉姆萨(Giemsa）染色液的配制 B2.1.2/15mol磷酸缓冲液(pH6.8)。 B2.2吉姆萨原液 吉姆萨饱和液。 B2.3吉姆萨工作液 使用时首先将2/15磷酸缓冲液稀释10倍，然后在稀释的磷酸缓冲液中加人吉姆萨原液为2%～ 3%的比例。一般在使用时配制，超过1h以上不能使用。 5