ICS 11.100 C 44 YY 中华人民共和国医药行业标准 YY/T1169——2009 麦康凯琼脂培养基 (MacConkey agarmedium) 2009-12-30发布 2011-06-01实施 国家食品药品监督管理局 发布 YY/T1169—2009 前 言 本标准全部技术条款为推荐性。 本标准是在参考《中华人民共和国药典》（2005年版)基础上，结合中国国情及实际情况和要求而 制定。 本标准的附录A为规范性附录。 本标准由国家食品药品监督管理局提出。 本标准由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会归口。 本标准主要起草单位：中国药品生物制品检定所。 本标准主要起草人：曲守方、刘艳、孙彬裕、高尚先。 I 建筑321—标准查询下载网 www.jz321.net YY/T1169—2009 麦康凯琼脂培养基 1范围 本标准规定了麦康凯琼脂培养基的质量要求、检验方法、使用说明、标志、标签以及包装、运输、 贮存。 本标准适用于麦康凯琼脂培养基。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T191包装储运图示标志 中华人民共和国药典 JJF.1070—2000定量包装商品净含量计量检验规则 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 培养基culturemedium 培养基是指由人工方法配合而成的，专供微生物培养、分离、鉴别、研究和保存使用的混合营养物 制品。 3. 2 质控菌株qualitycontrolstrain 质控菌株通常指用于培养基质量控制和性能测定的微生物。 3. 3 菌落形成单位 colonyformingunit,cfu 菌落形成单位是指在活菌培养计数时，由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁 殖所形成的集落，以其表达活菌的数量。 4培养基配方 单位：g/L 蛋白陈 20.0 乳糖 10. 0 胆盐 5.0 氯化钠 5.0 中性红 0. 03 琼脂 12.0~14.0 可根据凝胶强度适当调节琼脂的含量。 1 YY/T1169—2009 5质量要求 5.1理化要求 5.1.1外观 应为均一的粉红色粉末。 5.1.2装量 应不低于标示量。 5.1.3pH值 灭菌后，20℃～25℃时，该培养基pH值应为7.2士0.2。 5.1.4干燥失重 应不超过6.0%。 5.2生长试验 该培养基接种质控菌株，生长情况应符合表1要求。 表1生长试验观察结果 质控菌种 观察结果 大肠埃希菌 生长，粉色菌落 奇异变形杆菌 生长，无色菌落，抑制蔓延 鼠伤寒沙门菌 生长，无色菌落 粪肠球菌 抑制或部分抑制 6检验方法 6.1理化检验 6.1.1外观 采用目测法，在自然光线明亮处目视，应符合5.1.1的规定。 6.1.2装量 按JF1070—2000，使用通用量具，测定装量，应符合5.1.2的规定。 6.1.3pH值 按使用说明配制培养基，灭菌后，按《中华人民共和国药典》pH值测定法或其他适宜固体培养基检 测的pH计测定，pH值应符合5.1.3的规定。 6.1.4干燥失重 按《中华人民共和国药典》干燥失重测定法测定，应符合5.1.4的规定。 6.2生长试验 按附录A试验方法进行，结果应符合5.2的规定。 7 使用说明书 使用说明至少应当具有下列内容： 建筑321—标准查询下载网 www.jz321.net YY/T1169—2009 a) 产品名称、规格； b) 配方； c) 用途； d) 使用方法； e) 注意事项； f) 贮存条件与失效期； g) 生产单位名称、联系方式。 8 标志与标签 标志与标签至少应当具有下列内容： a) 执行标准号； b) 产品注册证号； c) 产品名称、规格、数量、批号； d) 制造厂名称、商标和厂址； e) 贮存条件和失效期。 9 包装、运输、贮存 9.1包装 .包装储运图示标志应符合GB/T191的规定。包装容器应保证密封性良好，不易破碎。 9.2运输 培养基在运输过程中，应防潮，应防止重物堆压，避免阳光直射和雨雪浸淋，防止与酸碱物质接触， 防止内外包装破损。 9.3贮存 产品应置阴凉干燥处贮存。 YY/T1169—2009 附录A (规范性附录) 麦康凯琼脂培养基生长试验方法 A.1质控菌株 大肠埃希菌（Escherichiacoli)ATCC25922;[CMCC(B）44113] 奇异变形杆菌（Proteusmirabilis）ATCC12453 鼠伤寒沙门菌（Salmonellatyphimurium）ATCC14028；[CMCC(B）50020] 粪肠球菌（Enterococcusfaecalis）.ATCC29212;[CMCC(B)32219] 培养基生长试验可采用上述菌株或其他等同的标准菌株，所用的菌株传代次数不得超过5代（从菌 种保存中心获得的冷冻干燥菌种为第0代），并采用适宜的菌种保藏技术，以保证试验菌株的生物学 特性。 不应同时操作2个以上菌株。 A.2方法 A.2.1无菌操作要求 培养基生长试验应严格遵守无菌操作，防止微生物污染。 稀释液、培养基、实验器具等灭菌时，应按照《中华人民共和国药典》中灭菌法的要求，采用验证合格 的灭菌程序灭菌。 A.2.2.菌种复苏 分别启开大肠埃希菌、奇异变形杆菌、鼠伤寒沙门菌和粪肠球菌菌种，用0.9%无菌氯化钠溶液 0.3mL制成菌悬液，加至7mL营养肉汤培养基中，36℃土1℃培养18h～24h。 A.2.3菌种传代 取1mL上述复苏后的大肠埃希菌、奇异变形杆菌、鼠伤寒沙门菌和粪肠球菌新鲜培养物，加至7mL 营养肉汤培养基中，36℃土1℃培养18h24h。 A.2.4菌种增菌培养 分别接种上述传代后的大肠埃希菌、奇异变形杆菌、鼠伤寒沙门菌和粪肠球菌的新鲜培养物至营养 肉汤或营养琼脂培养基中，36℃士1℃培养18h～24h。 A.2.5菌悬液制备 将上述增菌培养后的大肠埃希菌、奇异变形杆菌、鼠伤寒沙门菌和粪肠球菌的新鲜培养物分别用 0.9%无菌氯化钠溶液稀释，经比浊后制成每1mL含菌数约相当于100~1000cfu的菌悬液。 A.2.6培养基接种 用蒸馏水或去离子水按说明上的浓度配制待检麦康凯琼脂培养基，121℃高压灭菌15min，稍冷后 在每个平皿（直径为90mm）中加入约15mL～20mL，待冷却至室温凝固后进行检测。 检测时，每只平血加人0.1mL上述菌悬液。每种质控菌株接种2只平血，并用1个未接种的培养 基平血做空白对照，置36℃士1℃培养24h～36h，观察菌落生长情况，并记录结果。结果应符合5.2的 要求。 建筑321———标准查询下载网www.jz321.net YY/T1169—2009 献 [1] GB9969.1.-1998工业产品使用说明书总则 [2] 陈天寿.微生物培养基的制造与应用.北京：中国农业出版社，1995