ICS 11.060.10 C 33 YY 中华人民共和国医药行业标准 YY/T0127.4—2009 代替YY0127.4—1998 口腔医疗器械生物学评价 第2单元：试验方法 骨埋植试验 Biological evaluation of medical devices used in dentistry Part 2: Test method Bone implant test 2009-12-30发布 2011-06-01实施 国家食品药品监督管理局 发布 YY/T0127.4—2009 前言 本标准是口腔医疗器械生物学评价系列标准中的一项标准。 口腔医疗器械生物学评价系列标准中的第一单元，YY/T0268：2008《牙科学口腔医疗器械生物学 评价第1单元：评价与试验》是口腔医疗器械生物学评价与试验项目的选择，为指南性标准。 该系列标准的第二单元是口腔医疗器具体生物试验方法。共分为如下几部分： 1.YY/T0127.1-93口腔材料生物试验方法溶血试验 2.YY/T0127.2一2009口腔医疗器械生物学评价第2单元：试验方法急性全身毒性试验：静 脉途径 3.YY/T0127.3一1998口腔材料生物学评价第2单元：口腔材料生物试验方法根管内应用 试验 4.YY/T0127.4一2009口腔医疗器械生物学评价第2单元：试验方法骨埋植试验 5.YY/T0127.5-1999 口腔材料生物学评价第2单元：口腔材料生物试验方法吸人毒性 试验 6.YY/T0127.6-1998 口腔材料生物学评价 第2单元：口腔材料生物试验方法 显性致死 试验 7.YY/T0127.7—2001 口腔材料生物学评价第2单元：口腔材料生物试验方法牙髓牙本质 应用试验 8.YY/T0127.8-2001 口腔材料生物学评价第2单元：口腔材料生物试验方法皮下植人 试验 9.YY/T0127.9—2009 口腔医疗器械生物学评价第2单元：试验方法细胞毒性试验：琼脂扩 散法及滤膜扩散法 10.YY/T0127.10－2009口腔医疗器械生物学评价第2单元：试验方法鼠伤寒沙门氏杆菌 回复突变试验（Ames试验） 11.YY/T0127.11一2001牙科学用于口腔的医疗器械生物相容性临床前评价第2单元：口 腔材料生物试验方法盖髓试验 12.YY/T0127.12一2008牙科学口腔医疗器械生物学评价第2单元：试验方法微核试验 13.YY/T0127.13一2009口腔医疗器械生物学评价第2单元：试验方法口腔黏膜刺激试验 14.YY/T0244-1996口腔材料生物试验方法短期全身毒性试验：经口途径 15.YY/T0127.14一2009口腔医疗器械生物学评价第2单元：试验方法急性经口全身毒性 试验 16.YY/T0127.15一2009口腔医疗器械生物学评价第2单元：试验方法亚急性和亚慢性全 身毒性试验：经口途径 本标准为YY/T0127系列标准的第4部分。 本标准是对YY/T0217.4一1998《口腔材料生物学评价第2单元：口腔材料生物试验方法骨 埋植试验》的修订。起草过程中参考了ISO10993.6-2007《医疗器械生物学评价第6部分：植人后局 部反应试验》。ISO10993.6-2007的试验原则适用于本标准。 本标准与YY/T0217.4一1998相比，主要变化如下： -标准名称改为：“口腔医疗器械生物学评价第2单元：试验方法骨埋植试验”。 I YY/T0127.4—2009 -3.1试样制备增加了不同种类材料的试样。每个试验周期样品数量改为至少10个。 -3.2、4、5、6增加了多种选择。 一7手术过程中“25g/L的碘酒及75%乙醇"改为“5g/L的碘伏”。 -10生物学评价进行了修改。 增加了附录A。 本标准的附录A为资料性附录。 第2单元：口 腔材料生物试验方法骨埋植试验》 本标准由国家食品药品监督管理局提出。 本标准由全国口腔材料和器械设备标准化技术委员会（SAC/TC99)归口。 本标准由北京大学口腔医学院口腔医疗器械检验中心负责起草。 本标准主要起草人：林红、李盛林、郝鹏。 本标准于1998年首次发布，于2009年第一次修订。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： YY/T0127.4—1998 I YY/T0127.4—2009 口腔医疗器械生物学评价第2单元：试验方法 骨埋植试验 1范围 本标准规定了口腔医疗器械的骨埋植试验方法。 本标准用于评价骨组织对拟长期与口腔骨组织接触的口腔医疗器械的生物学反应。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T13810外科植人物用钛及钛合金加工材 GB/T16886.6医疗器械生物学评价第6部分：植人后局部反应试验（GB/T16886.6一1997， ISO10993-6:1994,IDT) GB/T16886.12医疗器械生物学评价第12部分：样品制备与参照样品（GB/T16886.12一 2005,ISO10993-12:2005,IDT) 3试样制备 3.1按与最终产品相同的方法对植人材料进行制备、加工、清洁、消毒。每个试验周期至少10个试样。 3.1.1固体试样：试样制成直径2mm，高6mm的圆柱形，表面光滑。 适用时也可选择直径2mm～4.5mm的带螺纹的植人体；或根据用途选择其他形状的植入体。 3.1.2固化类的材料：使用前需调和各组分，并在植人前使之固化。 对于设计为需在应用部位固化或聚合的材料，应在材料未固化前植人骨内。 3.1.3非固体材料（包括粉）：按厂家说明书准备材料。 3.2·对照材料 按GB/T16886.12的规定选择合适的对照材料，或已知具有良好生物相容性和临床可接受的 材料。 金属试样的对照材料也可选用化学成分符合GB/T13810规定的纯钛和钛合金。 按3.1加工成植入体。 4试验周期 根据器械的特性和用途按GB/T16886.6选择合适的试验周期。试验应包括短期试验和长期试 验。一般短期试验1周～4周，长期试验不少于26周。 5实验动物 体重大于2.5kg的健康免八只，每个试验周期各四只。 注：也可选用其他合适的动物，参见GB/T16886.6。 YY/T0127.4-—2009 6试验部位 股骨外侧或胫骨内侧。在左右肢体的同一位置一侧放置试样，另一侧放置对照样本。 注：也可根据器械的实际用途选择其他合适的植入部位。 7手术过程 用合适麻醉剂将动物施行全身麻醉。于股骨外侧或胫骨内侧剃毛。用浓度为5g/L的碘伏或其他 合适的消毒方式对术区消毒。逐层切开并分离皮肤、皮下组织、肌肉、骨膜。用低速钻断续地在骨皮质 上钻孔，同时用生理盐水冷却。每侧肢体骨最多制备3个孔。孔间距应大于8mm。孔直径为2mm(孔 直径与植入体直径匹配)穿透一侧骨皮质达骨髓腔。将试样或对照试样分别插人孔内。螺纹状植入体 旋人孔内。逐层缝合肌肉、肌筋膜及皮肤。 8·术后评价 在试验期内观察动物，并记录任何异常发现，包括局部反应及异常行为。 若埋植部位感染或损伤而影响结果则应重新试验。若动物在处死前已经死亡，应确定死亡原因。 若死亡与试验材料无关，则应补做试验。 9处死 观察期结束时用过量麻醉剂处死动物。 10生物学反应评价 通过对不同时间内的肉眼观察和组织病理学反应分级评价生物学反应，并比较试验材料和对照材 料的生物学反应。 对相同部位相对应的每一对照植入物与试验植入物进行比较，以保证组织和植入物之间相对运动 产生的影响最小。 柱状样品的观测部位应是柱的中部；带槽的柱状植入物，其槽间的中央部位及平顶端面处适合于 评价。 10.1肉眼观察评价 用低倍放大镜观察切下的植人部位组织，应包括对局部引流淋巴结的评价。记录观察到的组织反 应的特性和程度，包括血肿，水肿，纤维包裹和（或)任何大体发现。记录植人物的状态、形态、位置，包括 可降解材料的可能残余物。观察结果应照相存档。 另外在观察植人部位时，如果动物表现出病态或对植入物的反应，如必要则应进行大体户检。 10.2取样和组织标本制备 为了评价局部生物学反应，切取的组织标本应包括植入物及其周围足够多的未受到影响的组织。 如果植人物在观察部位不明显时（可降解材料/可吸收材料），应扩大取材部位至包括周围数毫米正常组 织的范围。对于非可降解材料，应包括大体病理结果显示异常的引流淋巴结。对于可降解材料，如可行 应包括引流淋巴结，因为引流淋巴结对于评价可降解材料的降解过程很重要。 对切取的试验和对照植入物组织块进行处理，包括固定、切取、包埋、切片、染色，以便进行组织病理 学和其他有关研究。如适用，记录植人物的方位、切片数量和切取物组织的几何形态。 采用常规技术处理组织标本时，组织包膜在放人固定液之前或之后可能会被弄破，应报告植入物表 2 YY/T0127.4—2009 面和组织床的状态，应注意尽量不要破坏植人物/组织界面。 对植入物/组织界面处进行研究时，推荐使用硬塑料将在原位的植人物连同其周围的完整的组织包 绕物一起包埋，采用适当的切片或磨片技术制备组织学切片。事实表明，使用塑料包埋技术对界面组织 不会造成明显改变。 推荐操作步骤如下： 切取包含植入体及其周围骨组织的组织块，固定于甲醛液中。用合适脱钙剂（如5%硝酸）脱钙，常 规系列乙醇脱水，石蜡包埋。平行植人体长轴进行切片，间隔取片，H一E染色。 10.3微观（显微镜观察)评价 用量化