ICS 67.060 LS X 11 中华人民共和国粮食行业标准 LS/T61242017 粮油检验 小麦粉多酚氧化酶活力的测定 分光光度法 Inspection of grain and oils-Determination of polyphenol oxidase activity inwheatflourSpectro-photometricmethod 2017-10-27发布 2017-12-20 实施 国家粮食局 发布 LS/T 6124—2017 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家粮食局提出。 本标准由全国粮油标准化技术委员会（SAC/TC270)归口。 本标准起草单位：河南工业大学、国家粮食局标准质量中心、河南省粮油饲料产品质量监督检验站、 安徽省粮油产品质量监督检测站、陕西省粮油产品质量监督检验所、湖北省粮油食品质量监测站、山西 粮食质量监测中心、广东产品质量监督检验研究院、广东国家粮食质量监测中心。 本标准主要起草人：陈洁、下科、吕莹果、朱之光、李雪琴、王远辉、王力清、尹成华、季一顺、党献民、 吴存荣、李志建、任正东、毛红霞、吴莉莉、周红梅、宋泽伟、王亚军。 I LS/T 6124—2017 粮油检验 小麦粉多酚氧化酶活力的测定 分光光度法 1范围 本标准规定了分光光度法测定小麦粉多酚氧化酶活力的原理、试剂、仪器与设备、分析步骤、结果计 算和精密度。 本标准适用于小麦粉多酚氧化酶活力的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 多酚氧化酶polyphenoloxidase 3.2 多酚氧化酶的活力单位polyphenoloxidaseactivityunit 在本标准规定的测定条件下，每克样品每分钟吸光度值变化0.001为1个多酚氧化酶活力单位，以 U表示。 4原理 样品中多酚氧化酶与邻苯二酚氧化反应生成醒，用分光光度计测定410nm波长处吸收强度，以此 表示多酚氧化酶的活力。 5试剂 除非另有规定，本方法中所用试剂均为分析纯，试验用水应符合GB/T6682中二级水的规格。 5.1邻苯二酚溶液：准确称取1.300g邻苯二酚，用水溶解后，至100mL棕色容量瓶定容，现配现用。 5.20.2mol/LpH6.0的磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液：称取31.2g二水磷酸二氢钠，溶于适量蒸馏 水中，稀释至1000mL；称取71.6g十二水磷酸氢二钠，溶于适量蒸馏水中，稀释至1000mL；将87.7mL 冲液。 1 LS/T6124—2017 6仪器与设备 6.1分析天平：感量为0.001g。 6.2恒温振荡器。 6.3冷冻离心机。 6.4分光光度计。 7分析步骤 用分析天平（6.1)称取1.5g（精确到0.001g）样品，放入50mL锥形瓶中，用10.00mL磷酸二氢 化反应15min，迅速放入0℃冰水中，静置3min终止反应，样液倒入50mL离心管中，冷冻离心机 （6.3）（4℃、10000r/min）离心10min，用定性滤纸过滤，滤液倒人1cm比色血，用分光光度计（6.4)在 410nm下测定其吸光度，以空白溶液调零。 8结果计算 样品中多酚氧化酶活力按式（1)计算。 A X = ......(1) 0.001XmXt 式中： X 一样品中多酚氧化酶活力，单位为U； A 一吸光度； 0.001——活力单位换算系数； —样品质量，单位为克（g）； m 一反应时间，单位为分（min）。 测定结果为平行测定的平均值，保留小数点后2位。 9精密度 9.1 重复性 在重复条件下测定结果的绝对差值不应超过其算术平均值的5%。 9.2 2再现性 在再现条件下测定结果的绝对差值不应超过其算术平均值的10%。 2