SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1392--2015 代替SN/T1392-—2004 出口肉及肉制品中2甲4氯和 2甲4氯丁酸残留量检测方法 液相色谱/串联质谱法 Determination of MCPA and MCPB residues in meat and meat products forexport--HPLC-MS/MSmethod 2015-09-02发布 2016-04-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 刮涂层适真们 中华人民共和国出人境检验检疫 行业标准 出口肉及肉制品中2甲4氯和 2甲4氯丁酸残留量检测方法 液相色谱/串联质谱法 SN/T13922015 * 中国标准出版社出版 北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029) 北京市西城区三里河北街16号（100045） 总编室：(010)68533533 网址www.spc.net.cn 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 * 开本880×12301/16 印张1.25字数34千字 2018年1月第一版2018年1月第一次印刷 印数1-500 * 书号：155066·2-30645 定价21.00元 SN/T1392—2015 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草 本标准代替SN/T1392—2004《进出口肉及肉制品中2甲4氯及2甲4氯丁酸残留量检验方法》。 本标准与SN/T1392一2004相比，主要技术变化如下： 测定方法为液相色谱-串联质谱方法； 前处理采用液液分配法，简化了前处理步骤； 一 一标准适用范围由牛肉扩展到牛肉、猪肉、鱼肉、鸡肉和牛肉罐头； 略去了抽样步骤。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出。 本标准由全国进出口食品检测标准化技术委员会（SAC/TC445）归口。 本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：李淑静、陈其勇、宓捷波、王飞、林安清、许泓。 1 SN/T1392-2015 出口肉及肉制品中2甲4氯和 2甲4氯丁酸残留量检测方法 液相色谱/串联质谱法 1范围 本标准规定了出口肉及肉制品中2甲4氧和2甲4氯酸残留量检测的液相色谱/串联质谱测定 方法。 本标准适用于出口冻分割牛肉、鱼肉、猪肉、鸡肉、牛肉罐头中2甲4氯和2甲4氯丁酸残留量的 检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682-2008，ISO3696：1987，MOD） 3方法提要 在酸性条件下，用二氯甲烷提取试样中残留的2甲4氯2甲4氯丁酸，提取液经溶剂置换后采用 液相色谱-质谱-质谱检测，外标法定量。 4试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1 二氯甲烷：色谱纯。 4.2 甲醇：色谱纯。 4.3 甲酸：色谱纯。 4.4 浓硫酸：优级纯。 4.5 氯化钠：优级纯。 硫酸-水（1十9）：用优级纯浓硫酸（4.4)配制。 4.7 0.1%甲酸水溶液。 4.82甲4氯标准品：纯度大于等于99%，CAS：94-74-6。 4.92甲4氯丁酸标准品：纯度大于等于99%，CAS：94-82-6。 4.10 0.1mg/mL标准品储备液：准确称取适量的2甲4氟、2甲4氯丁酸标准品，用甲醇配制成浓度 为0.1mg/mL标准品储备溶液。 4.11混合标准工作液：使用相应基质溶液配制成适用浓度的标准工作溶液。 5仪器和设备 5.1超高压液相色谱-串联质谱仪，配有电喷雾离子源（ESI)。 1 SN/T1392—2015 5.2 高速均质器：不低于12000r/min。 5.3 离心机：不低于4000r/min。 5.4 分析天平：感量0.1mg和0.01g。 5.5 氮吹仪。 5.6 涡旋混合器。 6 试样制备与保存 6.1 试样制备 取有代表性样品500g，采用粉碎机粉碎后，再将其研磨成细粉状，装人洁净的玻璃盛样容器内，密 封并标明标记。 6.2 试样保存 将试样于一18℃冷冻保存。 测定步骤 7.1 提取与净化 称取试样4g（精确到0.01g）于50mL离心管中，加3mL甲醇、1mL硫酸-水（4.6）、2g氯化钠 （4.5)和20mL二氯甲烷（4.1）。在高速均质器上均质提取5min，离心，取上清液于另一离心管中，静 置，取下层二氯甲烷层10mL。重复提取一次，合并两次提取液，于40℃下氮吹近干，用甲醇定容至 2mL，涡旋，过膜，供超高压液相色谱串联质谱测定。 7.2 测定 7.2.1 液相色谱条件 液相色谱条件如下： 色谱柱：C18，1.8μm，2.1mm×50mm或相当者； a) b) 0.1%甲酸水溶液十甲醇，梯度洗脱见表1； c) 流速：0.5mL/min； d) 进样量：5μL； e) 柱温：室温。 表1 液相色谱梯度洗脱程序 时间/min 0.1%甲酸水溶液/% 甲醇/% 0.0 80 20 0.5 80 20 1.0 40 60 1.5 20 80 3.0 20 80 5.0 80 20 2 SN/T13922015 7.2.2质谱条件 质谱条件如下： a）离子源：电喷雾离子源； b）扫描方式：负离子模式； c）检测方式：多反应监测MRM； d) 分别率：单位质量分辨率； e）其他参考质谱条件参见表A.1。 7.2.3 3液相色谱条件 按照确定的液相色谱-串联质谱条件测定样品和空白基质加标准工作溶液，响应值均应在仪器检测 的线性范围内，以色谱峰面积外标法定量，负离子模式扫描。在上述色谱条件下，2甲4氯和2甲4氯 B.1。MS2碎片质谱图参见图B.2。 如果样液与标准工作溶液的选择性离子流色谱图中在相同保留时间有色谱峰出现，可根据产生的 两组离子对之间的丰度比，对其进行确证。 在相同实验条件下，试样中待测物质的保留时间与标准工作溶液中对应的保留时间偏差在土2.5% 之内；且试样谱图中各组分定性离子的相对丰度与标准工作溶液中定性离子的相对丰度其允许偏差不 超过表2规定的范围时，则可确定为样品中存在这种待测物。 表2使用定性液相色谱-质谱/质谱时相对离子丰度最大允许偏差 相对离子丰度/% >50 20~50 10~20 ≤10 允许的相对偏差/% ±20 ±25 ±30 ±50 7.3 空白试验 除不加试样外，均按上述测定条件和步骤进行。 7.4结果计算和表述 用色谱数据处理系统或按式(1)计算试样中毒虫畏残留含量，计算结果需扣除空白值。 A,Xc,×V X; = ...(1) AXm 式中： 试样中2甲4氯或2甲4氟丁酸含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； A; 样液中2甲4氯或2甲4氯丁酸的峰面积； 标准工作溶液中2甲4氯或2甲4氯丁酸浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； c; V 样液最终定容体积，单位为毫升（mL）； As 标准溶液中2甲4氯或2甲4氯丁酸的峰面积； 最终样液所代表的试样量，g。 m 8 测定低限与回收率 8.1测定低限 本方法测定低限为：0.01mg/kg。 3