中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 5 208— 2021 短体线虫（非中国种）检疫鉴定方法 Detection and Identification of Pratylenchus spp. (non-Chinese species) Filipjev, 1936 ICS 65.020 CCS B 1 6 2021-11- 22 发布 2022 -06-01实施 中华人民共和国海关总署 发 布I SN / T 5 208—2021 前 言 本Îļþ 按照 GB / T1.1— 2020给出的规则起草。 本Îļþ 由ÖлªÈËÃñ¹²ºÍ¹úº£¹Ø×ÜÊð 提出并归口。 本Îļþ 起草单位：中国检验检疫科学研究院、 ÖлªÈËÃñ¹²ºÍ¹ú 北京海关、 ÖлªÈËÃñ¹²ºÍ¹ú 天 津海关、 ÖлªÈËÃñ¹²ºÍ¹ú 宁波海关、 ÖлªÈËÃñ¹²ºÍ¹ú 广州海关。 本Îļþ 主要起草人：葛建军、王旭、熊玉芬、边勇、王金成、顾建锋、赵立荣。1 SN / T 5 208—2021 短体线虫（非中国种）检疫鉴定方法 1 范围 本标准规定了短体线虫 ( 非中国种 ) 检疫鉴定方法。 本标准适用于进出境植物苗木及携带土壤、植物栽培介质中的短体线虫（非中国种）检疫鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 SN / T 2122 ¡ª2008 进出境植物及植物产品检疫抽样 GB / T 24831 ¡ª2009 香蕉穿孔线虫检疫鉴定方法 3 短体线虫基本信息 中文名：短体线虫属 学名： Pratylenchus Filipjev, 1936 英文名：Root-lension nematodes 分类地位：线虫门 Nematoda、侧尾腺纲 Secementea、垫刃目 Tylenchida、垫刃亚目 Tylechina、垫 刃总科 Tylenchoidea、短体科 Pratylenchidae、短体亚科 Pratylenchinae。 传播途径：短体线虫主要依靠带根苗木、土壤等寄主材料的调运做远距离的传播；农事操作中 农机具和人员等的黏带以及灌溉和风雨运动可造成近距离扩散。 短体线虫属目前共有 78 个有效种，其中咖啡短体线虫 P . coffeae 、穿刺短体线虫 P . penetrans 、伤 残短体线虫 P . vulnus 、玉米短体线虫 P . zeae 、艾蒿短体线虫 P . artemisiae 、山药短体线虫 P . dioscoreae 和异玉米短体线虫 P . parazeae 为中国已有发生的种类，其余为非中国种。其寄主范围和地理分布等 相关信息参见附录 A。 4 方法原理 短体线虫主要在根部皮层取食，造成伤痕，引起根部组织坏死腐烂。在植物根上最明显的表现就 是在所取食的细根上存在明显的病斑。病斑呈淡黄色至褐色，病斑伸长方向和根的纵轴平行。病害严 重时根全部病成黄褐色。植株的根受害后可能会表现出根丛生或比正常植株的根少。从寄主植物根系 及根围土壤或介质中分离获得线虫后，用显微镜观察。根据线虫成虫的形态特征，结合寄主范围、地 理分布和传播途径对线虫进行属种的判定。 5 仪器设备和主要试剂 5.1 仪器设备 显微镜（100 倍以上） 、体视显微镜 (10 倍以上 , 具透射光源 )、加热板、水浴锅、离心机。2 SN / T 5 208—2021 5.2 器具 自封袋、钟面皿或培养皿、载玻片、盖玻片、网筛（20 目、100 目、500 目） 、烧杯 (500 mL、 1000 mL)、漏斗、漏斗架、乳胶管或硅胶管、止水夹、小镊子、剪刀、挑针、浅盘、线虫滤纸或卫生 纸、酒精灯、干燥器、试管。 5.3 主要试剂 4% 甲醛、指甲油、甘油、无水乙醇、石蜡、蔗糖。 6 现场检疫 将其主要寄主植物作为现场检疫最重要的对象。注意观察植株的生长状况，重点对植物种苗的根 系进行检查，注意检查是否有变褐和坏死等症状；以及寄主植物及其产品是否带土壤或栽培介质。重 点选择上述可疑植物材料及土壤或栽培介质取样。如无可疑症状则按 SN / T 2122-2008 5.5 抽样。 7 实验室鉴定 7.1 线虫分离 按照 GB / T 24831-2009 附录 A中的方法分离线虫。 7.2 体视显微镜观察 分离获得的线虫样品在生物体视显微镜下观察。雌虫和雄虫均为长蠕虫形，挑取线虫制成临时玻 片或永久玻片在生物显微镜下观察线虫形态。 具体玻片标本制作方法参见 GB / T 24831-2009 附录 B。 7.3 生物显微镜观察和测量 在生物显微镜下观察线虫的形态结构，对照短体线虫的主要鉴定特征进行重点观察、拍摄、测 计。在线虫样品数量充足时，应观察雌、雄虫各 20条以上。 8 形态鉴定特征 8.1 短体线虫属形态鉴定特征 8.1.1 短体线虫属形态特征描述 虫体短胖的圆柱形，长度小于 1mm。头部较宽阔，尾部钝圆。除了六沟纹短体线虫 （ Pratylenchus hexincisus ）有 6 条刻线以外，其侧区只有 4 条刻线，其它一些种类中有极少的个体存在差异。侧尾 腺口位于肛门后尾长的 1/3 处，或更后一些。头骨架骨化，有折光性。口针粗，长 14µm ～19µm， 具强壮的基部球。中食道球椭圆形，大于颈部 1/2 体宽。食道基部球向后伸展覆盖肠端，通常在腹侧 面与肠相交。 贲门、排泄孔均明显。 阴门横裂，阴道向内并略向前斜伸。 前卵巢伸展，后阴子宫囊退化。 通常较少发现雄虫。交合伞包裹尾部，具侧尾腺孔，位于交合伞基部附近。交合刺略成弓形。 8.1.2 短体线虫属与近似属的鉴定特征比较 短体线虫属与其近似属的鉴定特征比较参见附录 B ºÍ¸½Â¼ C。3 SN / T 5 208—2021 8.2 短体线虫属非中国种形态特征描述 8.2.1 草地短体线虫（ 附 录D图 D.1 ） 学名 Ptatylenchus pratensis （De Man，1880）Filipjev，1936 雌虫 温热杀死后体略弯。侧区 4 条侧线，外部侧线锯齿状，侧带光滑无横纹，体中部侧区占体 宽的 1/4。唇区较高，前端略平，近圆形，唇环 3 条，第一条唇环窄于后两条唇环。头骨架发达，向 体后延伸至第一条体环的后缘。头小体位于第三条体环处。口针强壮，口针基球较大，呈杯状。背食 道腺开口距口针基部球末端 2.5µm。中食道球卵圆形，占该处体直径的 1/2。排泄孔和食道与肠连接 处几乎处于同一水平线上，半月体在排泄孔的前方，有半月小体。食道腺从腹面和侧面覆盖肠前端， 长度约 25µm。 单卵巢前伸，卵母细胞单行排列。 受精囊长方形或卵圆形，内有精子。 后阴子宫囊较短， 长为阴门处体直径的 1.6 ～2.7 倍，未见细胞分化。阴道短、直。尾亚圆柱形或锥形，末端钝尖或圆。 尾端具环纹，侧尾腺孔位于尾的中后部，腹面尾环 27 条。 雄虫 虫体比雌虫略短，体前部与雌虫相似。交合伞中等宽度，长约 35µm ；交合刺发达，长 20µm ；引带长 3.3µm。侧尾腺孔位于尾的中后部。 8.2.2 锐尾短体线虫（ 附 录D图D. 2） 学名 P . acuticaudatus Braasch & Decker,1989 雌虫 温热杀死后虫体略弯，阴门后到尾端逐渐变细。体中部体环宽 1.0µm，肛门处体环宽于 体中部体环宽。唇区较低，前端平，不缢缩；2 条唇环；高 2µm× 宽 7µm ～8µm。头骨架发达。 口针短而强壮，口针基球前端较平。背食道腺开口距口针基部球 2µm ～3µm。侧区 4 条侧线，体 中部侧区宽 4µm ～5µm，阴门后部侧区减小到 2.5µm ～3µm。侧区中部的侧线在阴门后到近尾 端处合为一条侧线，侧尾腺模糊。中食道球卵圆形，食道腺长 42（32 ～50）µm，腹面覆盖肠。神 经环环绕于食道峡部，排泄孔位于中食道球后一个体宽，食道腺与肠连接处距头前端 85（75 ～95） µm。半月体位于排泄孔前部。单卵巢前伸，卵母细胞单行排列。受精囊模糊，无功能。后阴子宫囊 长 23（17 ～30）µm，无细胞分化，占肛阴距 30（23 ～38）%。尾稍尖，尾环 20（17 ～26）条， 透明区长 2.5µm。尾端圆锥形，光滑；个别的弯曲，有凹痕。 雄虫 未见。 8.2.3 艾伦短体线虫（ 附 录D图D. 3） 学名 P . alleni Ferris ，1961 雌虫 温热杀死后虫体呈直形。 体中部体环宽 1.6 µm。 侧区侧线 4 条，侧线直。 侧带光滑无横纹。 唇区低，稍缢缩，唇环 2 条，第一唇环明显窄于第二唇环。头骨架中等发达，向体后延伸至第一体环 的后缘。口针基球圆形，背食道腺开口距口针基球约 2.5 µm。中食道球较大，直径约占该处体宽的 2 /3。 食道腺从腹面覆盖肠，覆盖长约 25 µm。 排泄孔在食道和肠交界处的后面。 半月体约占 2 个体环， 在排泄孔的前方。受精囊与阴门之间的距离大约为阴门处体直径的 3 倍。阴道弯曲，长约占阴门处体 宽的 1/2。尾锥形。侧尾腺口位于尾的中前部。 雄虫 体前部与雌虫相似，相对虫体较短。交合刺长 15 µm，引带长 3.8 µm。交合伞较宽，侧 尾腺口位于尾的中部 。 8.2.4 安第斯短体线虫（ 附 录D图D. 4） 学名 P . andinus Lordello, Zamith et Boock,