书书书犐 犆 犛６ ７．２ ５ ０犆５ ３ 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛 犖／犜５ １ ５ ５—２ ０ １ ９ 食品接触材料检测方法 　高分子材料食品模拟物中巴豆酸含量的测定高效液相色谱法 犜 犲 狊 狋犿 犲 狋 犺 狅 犱 狊犳 狅 狉犳 狅 狅 犱犮 狅 狀 狋 犪 犮 狋犿 犪 狋 犲 狉 犻 犪 犾 狊 —犘 狅 犾狔犿 犲 狉—犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犮 狉 狅 狋 狅 狀 犻 犮犪 犮 犻 犱犻 狀犳 狅 狅 犱狊 犻 犿 狌 犾 犪 狀 狋 狊 —犎 犻犵犺狆犲 狉 犳 狅 狉 犿 犪 狀 犮 犲 犾 犻 狇狌 犻 犱犮 犺 狉 狅 犿 犪 狋 狅 犵狉 犪狆犺狔 ２ ０ １ ９１ ０２ ５发布 ２ ０ ２ ００ ５０ １实施 中华人民共和国海关总署 发 布书书书前　　言 　　本标准按照 Ｇ Ｂ／Ｔ１． １—２ ０ ０ ９给出的规则起草 。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口 。本标准起草单位 ：中华人民共和国天津海关 、中华人民共和国宁波海关 。本标准主要起草人 ：李宁涛、胡新功、韩伟、陈丹超、于艳军、熊中强、杜宇、张颖、何成、张媛媛、赵臣。 Ⅰ犛 犖／犜５ １ ５ ５—２ ０ １ ９食品接触材料检测方法 　高分子材料食品模拟物中巴豆酸含量的测定高效液相色谱法 １　范围 本标准规定了食品模拟物中巴豆酸的高效液相色谱测定方法 。本标准适用于 ３％（质量浓度 ）乙酸、４％（体积分数 ）乙酸、１ ０％（体积分数 ）乙醇溶液 、２ ０％（体积分数）乙醇溶液 、５ ０％（体积分数 ）乙醇溶液和橄榄油 ６种食品模拟物中巴豆酸含量的测定 。 ２　规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注明日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件 ，其最新版本 （包括所有的修改单 ）适用于本文件 。 Ｇ Ｂ／Ｔ６ ６ ８ ２　分析实验室用水规格和试验方法 Ｇ Ｂ／Ｔ２ ３ ２ ９ ６． １ 　食品接触材料 　塑料中受限物质 　塑料中物质向食品及食品模拟物特定迁移试验和含量测定方法以及食品模拟物暴露条件选择的指南 Ｇ Ｂ３ １ ６ ０ ４． １ 　食品安全国家标准 　食品接触材料及制品迁移试验通则 ３　方法提要 样品经食品模拟物浸泡后 ，取一定量食品模拟物试液 （其中橄榄油试液需进行超声辅助液液萃取 ） ，通过高效液相色谱仪测定巴豆酸的含量 ，外标法定量 。 ４　试剂和材料 除非另有说明 ，所用试剂均为分析纯 ，水为Ｇ Ｂ／Ｔ６ ６ ８ ２规定的二级水 。 ４．１　冰乙酸。 ４．２　无水乙醇 。 ４．３　甲醇：色谱纯。 ４．４　甲酸：色谱纯。 ４．５　３％（质量体积浓度 ）乙酸溶液 ：称取３ ０． ０ｇ（精确到０． １　ｇ）冰乙酸（４． １） ，用水稀释并转移到 １Ｌ容量瓶中 ，水定容至刻度 。 ４．６　４％（体积分数 ）乙酸溶液 ：量取４ ０ｍＬ冰乙酸（４． １）于１Ｌ容量瓶中 ，水定容至刻度 。 ４．７　１ ０％（体积分数 ）乙醇溶液 ：量取１ ０ ０ｍＬ 无水乙醇 （４． ２）于１Ｌ容量瓶中 ，水定容至刻度 。 ４．８　２ ０％（体积分数 ）乙醇溶液 ：量取２ ０ ０ｍＬ 无水乙醇 （４． ２）于１Ｌ容量瓶中 ，水定容至刻度 。 ４．９　５ ０％（体积分数 ）乙醇溶液 ：量取５ ０ ０ｍＬ 无水乙醇 （４． ２）于１Ｌ容量瓶中 ，水定容至刻度 。 ４．１ ０　市售橄榄油 。 ４．１ １　巴豆酸（Ｃ ｒ ｏ ｔ ｏ ｎ ｉ ｃａ ｃ ｉ ｄ ）标准品，ＣＡ ＳＮ ｏ． ： ［３ ７ ２ ４  ６ ５  ０ ］ ，纯度≥９ ９． ５％。 １犛 犖／犜５ １ ５ ５—２ ０ １ ９４．１ ２　巴豆酸标准储备液 ：准确称取巴豆酸 （４． １ １）０． ０ ５ｇ（精确至０． １ｍｇ） ，使用甲醇溶解并转移至 ５ ０ ０ｍＬ 棕色容量瓶中后用甲醇 （４． ３）定容至刻度 ，充分混匀 ，得到浓度为 １ ０ ０ｍｇ／Ｌ的标准储备液 ，４℃下保存，备用。保存期１个月。 ４．１ ３　微孔滤膜 ：水相和有机相 ，孔径０． ２μｍ。 ５　仪器和设备 ５．１　高效液相色谱仪 （ＨＰ Ｌ Ｃ） ：配有紫外检测器 。 ５．２　超声波萃取仪 。 ５．３　具塞试管 ：１ ０ｍＬ。 ５．４　注射器：２ｍＬ。 ５．５　微量移液器 ：１ ０μＬ，１ ０ ０μＬ，１０ ０ ０μＬ。 ５．６　分析天平 ：感量０． １ｍｇ和０． ０ １ｇ。 ６　试液的制备 ６．１　标准工作溶液的制备 ６．１．１　水基食品模拟物标准工作溶液 用微量移液器 （５． ５）分别准确量取 ５ ０μＬ、８ ０μＬ、１ ０ ０μＬ、３ ０ ０μＬ、５ ０ ０μＬ、８ ０ ０μＬ、１０ ０ ０μＬ的巴豆酸标准储备液 （４． １ ２）于７个１ ０ｍＬ容量瓶中 ，分别用迁移试验中选用的水基食品模拟物定容 ，摇匀后室温下静置 ２ ４ｈ，得到相应介质中巴豆酸的浓度分别为 ０． ５ｍｇ／Ｌ、０． ８ｍｇ／Ｌ、１． ０ｍｇ／Ｌ、３． ０ｍｇ／Ｌ、 ５． ０ｍｇ／Ｌ、８． ０ｍｇ／Ｌ和１ ０ｍｇ／Ｌ的标准工作溶液 。 ６．１．２　橄榄油标准工作溶液 用注射器 （５． ４）分别准确称取 ２ｇ（精确至０． ０ １ｇ）橄榄油至 ６个具塞试管 （５． ３）中，用微量移液器 （５． ５）分别移取 ２ ０μＬ、４ ０μＬ、１ ０ ０μＬ、１ ６ ０μＬ、２ ０ ０μＬ、４ ０ ０μＬ的巴豆酸标准储备液 （４． １ ２）于具塞试管 （５． ３）中，得到浓度分别为 １ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、１ ０ｍｇ／ｋｇ、２ ０ｍｇ／ｋｇ的标准工作溶液。分别在每个试管中加入 ４ｍＬ甲醇（４． ３） ，６ ０℃下超声提取 ６ ０ｍ ｉ ｎ 后，静置分层 ，用注射器 （５． ４）吸取甲醇溶液 ，得到不同浓度的巴豆酸标准工作溶液 ，经０． ２μｍ滤膜（４． １ ３）过滤后，供液相色谱测定 。 ６．２　食品模拟物试液的制备 ６．２．１　试样预处理 清洁剂洗净试样 ，用自来水冲洗干净 ，再用超纯水冲洗三遍后晾干 ，备用。 ６．２．２　迁移实验 按照Ｇ Ｂ３ １ ６ ０ ４． １ 或Ｇ Ｂ／Ｔ２ ３ ２ ９ ６． １ 进行迁移试验 。 ６．２．３　食品模拟物试液的处理 对于水基食品模拟物试液 ，取适量模拟液经 ０． ２μｍ滤膜（４． １ ３）过滤后，供液相色谱仪检测 。对于橄榄油试液 ，称取２． ０ｇ（精确至０． ０ １ｇ）橄榄油试液于 １ ０ｍＬ具塞试管 （５． ３）中，加入４ｍＬ甲醇（４． ４） ，在６ ０℃下超声提取 ６ ０ｍ ｉ ｎ 后，静置分层 ，用注射器 （５． ４）吸取甲醇溶液 ，经０． ２μｍ滤膜（４． １ ３）过滤后，供液相色谱仪测定 。 ２犛 犖／犜５ １ ５ ５—２ ０ １ ９６．３　空白试液的制备 按照６． ２的操作处理未与食品接触材料接触的食品模拟物 。 ７　定量测定 ７．１　仪器参考条件 由于测试结果取决于所使用仪器 ，因此不可能给出色谱分析的通用参数 。设定的参数应保证色谱测定时被测组分与其他组分能够得到有效的分离 ，下列给出的参数证明是可行的 。 ７．１．１　色谱柱：Ｃ１ ８柱，柱长１ ５ ０ｍｍ ，内径２． １ｍｍ ，填料粒径 ５． ０μｍ或相当者 。 ７．１．２　流动相：水（０． １ ７％甲酸溶液 ）∶甲醇（９ ０∶１ ０，体积比） 。 ７．１．３　流速：１． ０ｍＬ／ｍ ｉ ｎ。 ７．１．４　柱温：３ ０℃。 ７．１．５　进样量：１ ０μＬ。 ７．１．６　检测波长 ：２ １ ０ｎ ｍ。 ７．２　绘制标准工作曲线 按照７． １所列测定条件 ，对标准工作溶液 （６． １）进行检测 。以食品模拟物标准工作液中巴豆酸浓度为横坐标 ，单位以毫克每千克或毫克每升 （ｍｇ／ｋｇ或者ｍｇ／Ｌ）表示，以对应的峰面积平均值为纵坐标 ，绘制标准工作曲线 。巴豆酸的标准溶液色谱图参见附录 Ａ图Ａ． １。 ７．３　试液测定 对空白试液 （６． ３）和食品模拟物试液 （６． ２）按照６． ２～７． ３的步骤等体积进样进行测定 。 ８　结果计算 ８．１　水基食品模拟物中巴豆酸浓度的计算 ：水基食品模拟物中巴豆酸的含量可由计算机工作站直接计算 ，也可由式 （１）计算： 犡＝（犃－犃０）×犮犃ｓ…………………………（ １） 　　式中： 犡— — —食品模拟物中巴豆酸的浓度 ，单位为毫克每升食品模拟物 （ｍｇ／Ｌ） ； 犃— — —试液中巴豆酸的峰面积 ； 犃０— — —空白液中巴豆酸的峰面积 ； 犃ｓ— — —标准工作溶液中巴豆酸的峰面积 ； 犮— — —标准工作溶液中巴豆酸的浓度 ，单位为毫克每升 （ｍｇ／Ｌ） 。 ８．２　橄榄油食品模拟物中巴豆酸浓度的计算 橄榄食品模拟物中巴豆酸的含量可由计算机工作站直接计算 ，也可由式 （２）计算： 犡＝（犃－犃０）×犮×犿２犃ｓ×犿１…………………………（ ２） 　　式中： 犡— — —食品模拟物中巴豆酸的浓度 ，单位为毫克每千克食品模拟物 （ｍｇ／ｋｇ） ； ３犛 犖／犜５ １ ５ ５—２ ０ １ ９犃— — —试液中巴豆酸的峰面积 ； 犃０— — —空白液中巴豆酸的峰面积 ； 犃ｓ— — —标准工作溶液中巴豆酸的峰面积 ； 犮— — —标准工作溶液中巴豆酸的浓度 ，单位为毫克每千克 （ｍｇ／ｋｇ） ； 犿１— — —称取待验样品橄榄油食品模拟物的质量 ，单位为克 （ｇ） ； 犿２— — —配制橄榄油标准工作溶液时称取橄榄油食品模拟物的质量 ，单位为克 （ｇ） 。计算结果以平行测定值的算术平均值表示 ，