书书书犐 犆 犛６ ７．０ ５ ０犅０ ０／０ ９ 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 犛 犖／犜５ １ １ ２—２ ０ １ ９ 进出口食用动物 、饲料丙二醇含量测定气相色谱法和气相色谱 质谱法 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狆狉 狅狆 狔犾 犲 狀 犲犵犾狔犮 狅 犾 犻 狀犲 犱 犻 犫 犲犪 狀 犻 犿 犪 犾 狊犪 狀 犱犳 犲 犲 犱 狊犳 狅 狉 犻 犿 狆狅 狉 狋犪 狀 犱犲 狓狆狅 狉 狋—犌 犆犕 犲 狋 犺 狅 犱犪 狀 犱犌 犆  犕 犛犿 犲 狋 犺 狅 犱 ２ ０ １ ９０ ９０ ３发布 ２ ０ ２ ００ ３０ １实施 中华人民共和国海关总署 发 布 rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.书书书前　　言 　　本标准按照 Ｇ Ｂ１． １—２ ０ ０ ９给出的规则起草 。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口 。本标准起草单位 ：中华人民共和国拱北海关 、中华人民共和国兰州海关 。本标准主要起草人 ：薄清如、钱振杰、陈敬、罗宝正、张雅珩、刘陆、梁宁、曾俊洁、潘亮、薛良辰、丁琦、曾莹。 Ⅰ犛 犖／犜５ １ １ ２—２ ０ １ ９ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.进出口食用动物 、饲料丙二醇含量测定气相色谱法和气相色谱 质谱法 １　范围 本标准规定了食用动物 、饲料中１，２ 丙二醇和 １，３ 丙二醇的测定方法 。本标准适用于食用动物的血清 、尿液、乳汁以及饲料中 １，２ 丙二醇和 １，３ 丙二醇的测定 。 ２　规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件 ，其最新版本 （包括所有的修改单 ）适用于本文件 。 Ｇ Ｂ／Ｔ６ ６ ８ ２　分析实验室用水规格和试验方法 第一法　气相色谱法 ３　方法提要 试样中丙二醇经乙腈提取 、前处理净化后 ，用气相色谱法测定 ，以保留时间定性 ，峰面积外标法定量。 ４　试剂和材料 除另有说明外 ，所有试剂均为分析纯 ，水为Ｇ Ｂ／Ｔ６ ６ ８ ２规定的一级水 。 ４．１　乙腈（ＣＨ３ＣＮ） ，色谱纯。 ４．２　乙醇（Ｃ２Ｈ５ＯＨ） ，色谱纯。 ４．３　１，２ 丙二醇（ＣＨ２ＯＨＣＨＯＨＣＨ ３） ：标准品，ＣＡ ＳＮ ｏ． ：５ ７  ５ ５  ６，纯度为９ ９． ９％。 ４．４　１，３ 丙二醇（ＣＨ２ＯＨＣＨ ２ＣＨ２ＯＨ） ：标准品，ＣＡ ＳＮ ｏ． ：５ ０ ４  ６ ３  ２ ，纯度≥９ ８． ０％。 ４．５　１，２ 丙二醇标准储备液 （１ ０． ０ｍｇ／ｍＬ） ：准确称取 ２ ５ ０ｍｇ（精确至０． １ｍｇ）的１，２ 丙二醇标准品至 ２ ５ｍＬ容量瓶中 ，加入乙醇溶解并稀释至刻度线 ，摇匀。 ４．６　１，３ 丙二醇标准储备液 （１ ０． ０ｍｇ／ｍＬ） ：准确称取 ２ ５ ０ｍｇ（精确至０． １ｍｇ）的１，３ 丙二醇标准品至 ２ ５ｍＬ容量瓶中 ，加入乙醇溶解并稀释至刻度线 ，摇匀。 ４．７　１，２ 丙二醇和 １，３ 丙二醇标准使用液 （１． ０ ０ｍｇ／ｍＬ） ：分别准确移取的 １，２ 丙二醇和 １，３ 丙二醇标准储备液 ５． ０ ０ｍＬ 至５ ０ｍＬ容量瓶中 ，以乙醇定容 ，摇匀。 ４．８　１，２ 丙二醇和 １，３ 丙二醇标准工作溶液 ：用乙醇逐级稀释 １． ０ ０ｍｇ／ｍＬ的混合标准溶液 ，得到 １，２ 丙二醇和 １，３ 丙二醇的浓度分别为 １． ０ ０μｇ／ｍＬ、２． ０ ０μｇ／ｍＬ、５． ０ ０μｇ／ｍＬ、１ ０． ０μｇ／ｍＬ、 ２ ０． ０μｇ／ｍＬ、５ ０． ０μｇ／ｍＬ、１ ０ ０μｇ／ｍＬ的标准工作溶液系列 。 ４．９　无水硫酸镁 。 ４．１ ０　净化管：２ｍＬ具塞离心管 ，内装５ ０ｍｇＰ Ｓ Ａ粉，１ ０ ０ｍｇＣ１ ８粉和１ ０ ０ｍｇｍｇＳ Ｏ４粉末。 １犛 犖／犜５ １ １ ２—２ ０ １ ９ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.４．１ １　微孔滤膜 ：０． ４ ５μｍ，有机相。 ４．１ ２　载气：高纯氮气 （９ ９． ９ ９ ９％ ） 。 ４．１ ３　辅助气：氢气（９ ９． ９ ９ ９％ ） 、干燥空气 （９ ９． ９ ９％ ） 。 ５　仪器和设备 ５．１　气相色谱仪 （Ｇ Ｃ） ：配氢火焰离子化检测器 （Ｆ Ｉ Ｄ） 。 ５．２　分析天平 ：感量分别为 ０． ０ ０ １ｇ和０． ０ ０ ０１ ｇ。 ５．３　样品粉碎机 ５．４　氮吹浓缩工作站 。 ５．５　涡旋混匀器 。 ５．６　超声波水浴 。 ５．７　高速离心机 ：转速≥１ ００ ０ ０ｒ ／ｍ ｉ ｎ。 ５．８　刻度试管 ：５ｍＬ。 ５．９　具塞比色管 ：１ ０ｍＬ。 ５．１ ０　具塞离心管 ：１ ５ｍＬ。 ６　测定步骤 ６．１　试样处理 ６．１．１　血清基质 称取２ｇ（精确至０． ０ ０ １ｇ）样品至１ ０ｍＬ比色管中 ，涡旋下缓慢加入乙腈至近刻度 ，加盖超声提取 ５ｍ ｉ ｎ，取出放至室温 ，用乙腈定容 ，混匀。将此提取液转移至 １ ５ｍＬ具塞离心管中 ，在１ ００ ０ ０ｒ ／ｍ ｉ ｎ下离心３ｍ ｉ ｎ。准确移取 ５． ０ｍＬ 上清液至 ５ｍＬ刻度试管中 ，在氮吹仪中 ５ ０℃下浓缩至 ０． ５ｍＬ 左右，再用乙醇复溶并定容 ，混匀，过０． ４ ５μｍ有机相滤膜 ，装瓶待上机 。 ６．１．２　尿液基质 称取２ｇ（精确至０． ０ ０ １ｇ）样品至１ ０ｍＬ比色管中 ，涡旋下缓慢加入乙腈至近刻度 ，加盖超声提取 ５ｍ ｉ ｎ，取出放至室温 ，用乙腈定容 ，混匀。再加入约 １． ５ｇ无水硫酸镁至比色管中 ，加盖涡旋均匀 ，将此提取液转移至 １ ５ｍＬ具塞离心管中 ，在１ ００ ０ ０ｒ ／ｍ ｉ ｎ下离心３ｍ ｉ ｎ，取上清液过 ０． ４ ５μｍ有机相滤膜 ，装瓶待上机 。 ６．１．３　乳汁基质 称取２ｇ（精确至０． ０ ０ １ｇ）样品至１ ０ｍＬ比色管中 ，涡旋下缓慢加入乙腈至近刻度 ，加盖超声提取 ５ｍ ｉ ｎ，取出放至室温 ，用乙腈定容 ，混匀。移取１． ０ｍＬ 上清液至净化管 （４． ９）中，加盖涡旋均匀 ，在 １ ００ ０ ０ｒ ／ｍ ｉ ｎ下离心３ｍ ｉ ｎ，取上清液过 ０． ４ ５μｍ有机相滤膜 ，装瓶待上机 。 ６．１．４　饲料基质 试样用粉碎机粉碎 ，称取１ｇ（精确至０． ０ ０ １ｇ）饲料至１ ５ｍＬ具塞离心管中 ，准确加入 １ ０． ０ｍＬ 乙腈，加盖振荡混匀 ，超声提取 １ ５ｍ ｉ ｎ，取出放至室温 ，在１ ００ ０ ０ｒ ／ｍ ｉ ｎ下离心３ｍ ｉ ｎ。吸取上清液 １． ０ ０ｍＬ 至１ ０ｍＬ比色管中 ，用乙醇定容 ，混匀，取该稀释液过 ０． ４ ５μｍ有机相滤膜 ，装瓶待上机 。 ２犛 犖／犜５ １ １ ２—２ ０ １ ９ rHgCb@g · ykbûR60
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SÑU.６．２　试样测定 ６．２．１　仪器参考条件 ６．２．１．１　色谱柱：键合／交联聚乙二醇固定相石英毛细管色谱柱 ，３ ０ｍ×０． ２ ５ｍｍ×０． ２ ５ μｍ，或相当者 。 ６．２．１．２　载气：高纯氮；恒流模式 ，流速：１． ０ｍＬ／ｍ ｉ ｎ。 ６．２．１．３　升温程序 ：柱起始温度 ５ ０℃，保持１ｍ ｉ ｎ；以１ ５℃／ｍ ｉ ｎ速率升温至 １ ７ ０℃，保持３ｍ ｉ ｎ，再以 ２ ０℃／ｍ ｉ ｎ速率升温至 ２ ３ ０℃，保持３ｍ ｉ ｎ。 ６．２．１．４　进样口温度 ２ ３ ０℃。 ６．２．１．５　检测器温度 ：２ ４ ０℃。 ６．２．１．６　尾吹气流量为 ３ ０ｍＬ／ｍ ｉ ｎ。 ６．２．１．７　氢气流量为 ３ ０ｍＬ／ｍ ｉ ｎ。 ６．２．１．８　空气流量为 ３ ０ ０ｍＬ／ｍ ｉ ｎ。 ６．２．１．９　进样量：１． ０μＬ。 ６．２．１．１ ０　进样方式 ：分流进样 ，分流比５∶１。 ６．２．２　标准曲线的制作 将标准系列工作液分别注入气相色谱仪中 ，测定相应的丙二醇的色谱峰面积 ，以标准工作液的质量浓度为横坐标 ，以色谱峰的峰面积为纵坐标 ，绘制标准曲线 。 ６．２．３　试样溶液的测定 将试样溶液注入气相色谱仪中 ，得到相应的 １，２ 丙二醇的色谱峰面积 ，根据标准曲线得到待测液中１，２ 丙二醇和 １，３ 丙二醇的质量浓度 。丙二醇的标准气相色谱图参见附图 Ａ． １。 ７　结果计算和表述 样品中１，２ 丙二醇和 １，３ 丙二醇含量的计算见公式 （１） 犡＝犮×犞犿×１０ ０ ０×犳 …………………………（ １） 　　式中： 犡— — —样品中１，２ 丙二醇和 １，３ 丙二醇的含量 ，单位为克每千克 （ｇ／ｋｇ） ； 犮— — —从标准曲线中查出的试样溶液中 １，２ 丙二醇和 １，３ 丙二醇的浓度 ，单位为微克每毫升（μｇ／ｍＬ） ； 犞— — —试样定容体积 ，单位为毫升 （ｍＬ） ； 犿— — —样品质量 ，单位为克 （ｇ） ； 犳— — —稀释倍数 ，检测血清 、尿液和乳汁样品时 ，犳取值为１，检测饲料样品时 ，犳取值为１ ０。计算结果保留三位有效数字 。 ８　测定低限 、回收率 ８．１　测定低限 本方法对食用动物的血清 、尿液、乳汁中１，２ 丙二醇和 １，３ 丙二醇的测定低限均为 ０． ０ １ｇ／ｋｇ。本方法对饲料中 １，２ 丙二醇和 １，３ 丙二醇的测定低限均为 ０． ２ ０ｇ／ｋｇ。 ３犛 犖／犜５ １ １ ２—２ ０ １ ９