SN-T 4822-2017 牛尿苷酸合酶缺乏症荧光定量PCR检测方法

书书书　 /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G28 /G29 /G2A /G2B /G2C /G2B /G2D /G2E /G2F /G30 /G31 犛犖／犜４８２２—２０１７ /G32 /G33 /G34 /G35 /G36 /G37 /G38 /G39 /G3A /G3B /G3C /G3D /G3E 犘犆犚 /G2B /G3F /G40 /G41 犇犲狋犲犮狋犻狅狀犿犲狋犺狅犱狅犳犱犲犳犻犮犻犲狀犮狔狅犳狌狉犻犱犻狀犲犿狅狀狅狆犺狅狊狆犺犪狋犲狊狔狀狋犺犪狊犲犫狔犚犜  犘犆犚２０１７０７２１ /G42 /G43 ２０１８０３０１ /G44 /G45 /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A /G2B /G2C /G2D /G2E /G2D /G2F /G30 /G31/G42 /G43 rHgCb@g · ykbûR60u5[PO 0SÑU.书书书/G21　　 /G22 　　 /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 ＧＢ／Ｔ１．１—２００９ /G26 /G27 /G28 /G29 /G2A /G2B /G2C 。 /G21 /G22 /G23 /G2D /G2E /G2F /G30 /G31 /G30 /G32 /G33 /G34 /G35 /G36 /G37 /G38 /G39 /G3A /G27 /G3B /G3C /G3D 。 /G21 /G22 /G23 /G2B /G2C /G3E /G3F ： /G40 /G41 /G42 /G43 /G44 /G45 /G2E /G46 /G47 /G27 /G48 /G49 /G4A /G4B /G4A /G4C /G4D 。 /G21 /G22 /G23 /G4E /G4F /G2B /G2C /G42 ： /G50 /G51 /G52、 /G53 /G54 /G55、 /G56 /G57、 /G58 /G40 /G59、 /G5A /G5B /G5C、 /G5D /G5E /G5F、 /G50 /G2F /G60、 /G61 /G46 /G62、 /G63 /G64 /G65、 /G63 /G66 /G40、 /G67 /G68 /G41、 /G58 /G69 /G6A、 /G6B /G69 /G6C、 /G6D /G6E /G6F。 Ⅰ犛犖／犜４８２２—２０１７ rHgCb@g · ykbûR60u5[PO 0SÑU./G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G28 /G29 /G2A /G2B /G2C /G2D /G2E /G2F 犘犆犚 /G30 /G31 /G32 /G33 １　 /G34 /G35 /G21 /G22 /G23 /G29 /G70 /G71 /G72 /G73 /G74 /G75 /G76 /G77 /G78 /G79 /G7A /G7B /G7C /G70 /G7D ＰＣＲ /G4A /G7E /G28 /G7F /G80 /G81 /G82 。 /G21 /G22 /G23 /G83 /G84 /G85 /G72 /G73 /G74 /G75 /G76 /G77 /G78 /G79 /G7A （ /G86 /G87 /G88 /G89 Ａ） /G28 /G33 /G7E、 /G8A /G8B /G45 /G8C /G70 。２　 /G36 /G34 /G37 /G38 /G39 /G3A /G3B /G8D /G8E /G8F /G90 /G91 /G85 /G21 /G8F /G90 /G28 /G92 /G84 /G93 /G94 /G95 /G32 /G96 /G28 。 /G97 /G93 /G98 /G99 /G9A /G28 /G9B /G84 /G8F /G90 ， /G9C /G98 /G99 /G9A /G28 /G9D /G21 /G83 /G84 /G85 /G21 /G8F /G90。 /G97 /G93 /G95 /G98 /G99 /G9A /G28 /G9B /G84 /G8F /G90 ， /G9E /G9F /GA0 /G9D /G21 （ /GA1 /GA2 /GA3 /GA4 /G28 /GA5 /GA6 /G3E ） /G83 /G84 /G85 /G21 /G8F /G90 。ＧＢ／Ｔ６６８２　 /GA7 /GA8 /GA9 /G4B /GAA /G84 /GAB /G29 /GAC /G45 /GAD /G4B /G81 /G82 ３　 /G3C /G3D /G3E /G8D /G8E /GAE /GAF /GB0 /G83 /G84 /G85 /G21 /G8F /G90 。Ｃｔ /GB1　　　 /GB2 /GB3 /GB4 /G92 /G35 /GB5 /G28 /G7B /G7C /GB6 /GB7 /GB8 /GB9 /GBA /G70 /G28 /GBB /GB1 /GBC /GA3 /GBD /GBE /G28 /GBF /GC0 /GC1 （ｃｙｃｌｅｔｈｒｅｓｈｏｌｄ）ＤＵＭＰＳ　 /G73 /G74 /G75 /G76 /G77 /G78 /G79 /G7A （ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｏｆｕｒｉｄｉｎｅｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅ）ＲＴ  ＰＣＲ　 /GA9 /GBC /G7B /G7C /G70 /G7D ＰＣＲ（ｒｅａｌｔｉｍｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＰＣＲ）ＳＮＰ　 /G3E /GC2 /G74 /G75 /GC3 /GC4 /GC5 （ｓｉｎｇｌｅｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ）４　 /G3F /G40 /G41 /G42 /G43 /G44 ４．１　 /GC6 /GC7（Ｃ６Ｈ６Ｏ）。４．２　 /GC8 /GC9 /GCA /GCB （ＣＨＣｌ３）。４．３　 /GCC /GCD /GCE［（ＣＨ３）２ＣＨＣＨ２ＣＨ２ＯＨ］。４．４　 /GC6 /GC7 /GC8 /GC9 /GCA /GCB  /GCC /GCD /GCE： /GCF /G45 /GD0 /G28 /GD1 /GD2 /GC7 ∶ /GC8 /GC9 /GCA /GCB ∶ /GCC /GCD /GCE /G24 ２５∶２４∶１ /G28 /GD3 /GD4 /GD5 /G76 。４．５　 /GD6 /GD7 /G77Ｋ /GD8 /GD9 /GDA（１０ｍｇ／ｍＬ）： /GDB１００ｍｇ /GD6 /GD7 /G77Ｋ /GDC /GD9 /G85１０ｍＬ /GDD /GDE /GD2 /GDF /GAB /G40 ， /G68 /GE0 /GE1－２０℃ /GE2 /G84， /GE3 /GE4 /GB4 /GE5 /GE6 /GE7 。４．６　ＳＤＳ /GDC /GDA： /G84９００ｍＬ /GAB /GDC /GD9２００ｇ /GE8 /GE9 /GEAＳＤＳ， /GEB /GEC /GED６８℃ /GEE /GDC， /GEB /GEF /GF0 /G75 /GF1 /GF2 ｐＨ /GB1 /GED７．２， /GEB /GAB /G70 /GF3 /GB9 １０００ｍＬ， /GAA /GF4 /G68 /GE0 。４．７　ＤＮＡ /G3A /GF5 /GF6 /GF7 /GAD /GF8 /GF9 。４．８　 /G7B /G7C /G70 /G7D ＰＣＲ /GAD /GF8 /GF9（ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲＭａｓｔｅｒＭｉｘ）， /GFA /G85 /GAD /GF8 /GFB /GFC /GFD /G9E /GFE /GFF /G21 /GAD /GF8 /GF9。４．９　 /GDD /GDEｄｄＨ２Ｏ。４．１０　 /G9B /G22 /G45 /G23 /G24（ /GEF /G25 /G26 /G27１０μｍｏｌ／Ｌ）。Ｆｌ：５’ ｔｔｃｔｇａａｔｔｔｇｔｇａｔｔｇｇｔｔｔｔａｔ  ３’ Ｒｌ：５’ ｃｃｔｃｃｔｇｃｔｔｃｔａａｃｔｇａａｃｔｃ  ３’ ｐｒｏｂｅ  Ｗ：５’ ＶＩＣ  ｃｔｇｇｃｔｃＣｇａｇｔａａｇｃａ  ＢＨＱ  ３ ’ ｐｒｏｂｅ  Ｍ：５’ ＦＡＭ  ｃｔｇｇｃｔｃＴｇａｇｔａａｇｃａ  ＢＨＱ  ３ ’ １犛犖／犜４８２２—２０１７ rHgCb@g · ykbûR60u5[PO 0SÑU.５　 /G45 /G46 /G42 /G47 /G48 ５．１　 /G7B /G7C /G70 /G7D ＰＣＲ /G28。５．２　 /G29 /G2A /G2