ICS 67.050 C 53 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 0695—2018 代替SN0695—1997 出口植物源食品中嗪氨灵残留量的测定 Determination of triforine residues in foodstuffs origined from plant for export 以正式出版 2018-03-12发布 2018-10-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 以正式出版文本为准 SN/T 0695—2018 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 技术变化如下： 增加了小麦、大豆、玉米、苹果、葡萄、菠菜、番茄、甘蓝、黄瓜、蘑菇、干辣椒检验样品基质； 一增加了液相色谱-质谱/质谱法，降低了方法的测定低限； -删除了抽样部分； 优化了前处理方法。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国河北出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：代汉慧、王敬、刘晗、马育松、艾连峰、窦彩云、李玮、张海超、秦艳。 本标准的历次版本发布情况为： SN 06951997。 S 以正式出版文本为准 SN/T 0695—2018 出口植物源食品中嗪氨灵残留量的测定 1范围 本标准规定了出口植物源食品中嗪氨灵残留量的高效液相色谱-质谱/质谱和气相色谱测定方法。 本标准中液相色谱-质谱/质谱法适用于大米、小麦、大豆、玉米、苹果、葡萄、菠菜、番茄、甘蓝、黄瓜、 蘑菇和干辣椒中嗪氨灵残留量的测定；气相色谱法适用于大米中嗪氨灵残留量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 第一法‧液相色谱-质谱/质谱法 3方法提要 样品中的分析物用乙腈提取，提取液浓缩后经石墨化炭黑/氨基固相萃取柱净化后，用高效液相色 谱-质谱/质谱仪测定，外标法定量。 4试剂和材料 除另有规定外，试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的去离子水。 乙腈，高效液相色谱纯 4.2 甲酸，高效液相色谱纯， 4.3 甲苯。 4.4 氯化钠：140℃烘烤4h，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。 4.5 无水硫酸钠：650℃烘烤4h，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。 4.6 乙腈-甲苯（7十3，V/V）：取70mL乙腈（4.1)和30mL甲苯（4.3），混合均匀。 4.7 0.2%甲酸水溶液：量取2mL甲酸（4.2），用水定容至1000mL。 4.8 标准品：嗪氨灵（triforine，C1oH14Cl.N4O2，CASNo.26644-46-2），纯度大于等于99%。 标准储备液：精确称取适量标准品，用乙（4.1）配制成1.0mg/mL的标准储备液，4℃避光保存。 4.10 标准中间工作液：取上述标准储备液（4.9），用乙定（4.1）配制成2μg/mL的标准中间工作溶 液，4℃下避光保存。 4.12基质标准工作溶液：根据实验需要吸取适量的标准中间工作液（4.10），用基质空白溶液（4.11）稀 释成适当浓度的标准工作溶液，现用现配。 4.13石墨化炭黑柱/氨基固相萃取柱：500mg/500mg，6mL或相当者。 1 SN/T 0695—2018 4.14 微孔滤膜：0.22μm，有机相型。 5仪器和设备 5.1 高效液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 5.2 组织捣碎机。 5.3电子天平：感量分别为0.01g和0.1mg。 5.4离心机：转速不低于5000r/min。 5.5均质器：转速不低于15000r/min。 5.6 5氮吹仪。 5.7旋转蒸发仪。 5.8 固相萃取装置。 5.9 聚丙烯离心管：50mL和15mL，具塞。 5.10鸡心瓶：120mL 6 样品制备和保存 6.1 制样要求 文本为准 6.2试样制备 6.2.1苹果、葡萄、菠菜、番茄、甘蓝、黄瓜、蘑菇和干辣椒 取代表性样品500g，苹果、番茄、黄瓜和干辣椒取全果去柄；葡萄取全果；甘蓝和蘑菇取整颗；菠菜 取整棵去除根部，用组织捣碎机（5.2)将样品加工成浆状。混匀。试样均分为两份，装人洁净的容器内， 密封并标明标记。于一18℃以下冷冻保存 6.2.2大米、玉米、小麦和大豆 取有代表性样品500g，取整粒，用粉碎机粉碎，混匀。试样均分为两份，装人洁净的容器内，密封并 标明标记。常温下保存。 7测定步骤 7.1提取 7.1.1苹果、葡萄、菠菜、番茄、甘蓝、黄瓜和蘑菇 称取试样约4g（精确到0.01g）于50mL离心管中，加人5g氯化钠（4.4），20mL乙腈（4.1）， 15000r/min均质提取2min，4000r/min离心10min，将上清液经装有10g无水硫酸钠（4.5）的漏斗 过滤至120mL鸡心瓶中。再用20mL乙（4.1)重复以上提取过程，合并提取液于同一鸡心瓶中，于 45℃水浴浓缩至近干，待净化 7.1.2大米、玉米、小麦、大豆和干辣椒 称取试样约4g（精确到0.01g）于50mL离心管中，加10mL水润湿样品，混匀2min，静置30min 2 SN/T 0695—2018 后加人5g氯化钠（4.4），20mL乙（4.1），15000r/min均质提取2min，4000r/min离心10min，将 上清液经装有10g无水硫酸钠（4.5）的漏斗过滤至120mL鸡心瓶中。再用20mL乙睛（4.1）重复以上 提取过程，合并提取液于同一鸡心瓶中，于45℃水浴浓缩至近干，待净化。 7.2净化 用2mL乙腈-甲苯（4.6)溶解7.1步骤中所获得的浓缩液。用10mL乙腈-甲苯（4.6）预淋洗石墨化 苯（4.6）溶液分3次洗脱，控制流速在1mL/min～2mL/min，收集全部流出液，于45℃氮气吹干。用 1.0mL乙睛（4.1)溶解，过0.22um有机相微孔滤膜（4.14）后，供液相色谱-质谱/质谱测定。 7.3测定 7.3.1 液相色谱参考条件 液相色谱条件如下： a) 色谱柱：Cis150mm×2.1mm（i.d.），粒度5μm，或相当者； b） 进样量：5μL； c) 流动相组成及梯度洗脱条件见表1。 本为准 表1流动相及梯度洗脱条件 时间/min 0.2%甲酸水溶液/% 乙/% 流速/（mL/min） 0 85 15 0.3 4 85 0.3 7 85 0.3 7.01 15 0.3 10 85 15 0.3 7.3.2 质谱条件 质谱条件如下 a) 离子化模式：电喷雾正离子模式（ESI十）； b) 质谱扫描方式：多反应监测（MRM)； c) 其他参考质谱条件参见附录A表A.1。 7.3.3液相色谱-质谱/质谱测定 7.3.3.1定性测定 选择1个母离子，2个以上子离子，在相同实验条件下，样品中待测物质的保留时间与基质标准工 作溶液的保留时间偏差在土2.5%之内，且样品中组分定性离子的相对丰度与浓度接近的基质标准工作 溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表2规定的范围，则可判定为样品中存在对应 的待测物。在上述仪器条件下，嗪氨灵的参考保留时间为5.78min。 3