以正式出版文本为准中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 0654 —2019 代替 SN/T 3847— 2014、SN/T 2220— 2008 出口水果中克菌丹残留量的测定 气相色谱法和气相色谱-质谱/质谱法 Determination of captan residues in fruits for Export GC and GC-MS/MS method 2019 -12-27 发布 2020 -07-01 实施ICS 67.050 C 53 中华人民共和国海关总署 发 布代替标准 SN 0654— 1997以正式出版文本为准以正式出版文本为准 SN/T 0654—2019I前 言 本标准按照 GB/T 1.1— 2009 给出的规则起草。 本标准代替 SN 0654— 1997《出口水果中克菌丹残留量检验方法》 。本标准与 SN 0654— 1997《出口水果中克菌丹残留量检验方法》相比，主要技术变化如下：——标准名称修改为《出口水果中克菌丹残留量的测定 气相色谱法和气相色谱 - 质谱 / 质谱法》 ；——增加了梨、橘子、橙子、桃、桑葚、葡萄、猕猴桃、草莓、橄榄、荔枝、芒果、香蕉、火龙 果、西瓜、香瓜等基质，删除了抽样环节； ——修改了样品前处理方法，固相萃取法改为基质分散固相萃取法； ——重新修订了方法的定量限：气相色谱法为 0.02 mg/kg，气相色谱 - 质谱 / 质谱联用法为 0.01mg/kg ； ——采用气相色谱法替代了原标准中的高效液相色谱法； ——增加了气相色谱 - 质谱 / 质谱法为确证方法。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国郑州海关。本标准主要起草人：张守杰、刘胜男、乔晴、华向美、孙武勇、祝伟霞、张淑霞、王素方、张 玉娟、庞文月、辛莹。 本标准所替代标准的历次版本发布情况为：—— SN 0654— 1997。以正式出版文本为准以正式出版文本为准1 SN/T 0654—2019出口水果中克菌丹残留量的测定 1 范围 本标准规定了出口水果中克菌丹残留量的气相色谱和气相色谱 - 质谱 / 质谱检测方法。 本标准适用于苹果、梨、橘子、橙子、桃、桑葚、葡萄、猕猴桃、草莓、橄榄、荔枝、芒果、 香蕉、火龙果、西瓜、甜瓜等水果中克菌丹的测定。 2　规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本 文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。 GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3　方法提要 试样中的克菌丹经磷酸溶液浸泡，用乙腈涡旋振荡提取，基质分散固相萃取净化后，注入气相 色谱仪或气相色谱 - 质谱 / 质谱联用仪测定测定，外标法定量。 4　试剂 除另有规定外，所有实验用试剂均为分析纯，实验用水符合 GB/T 6682 中一级水的要求。 4.1　正己烷：色谱纯。 4.2　乙腈：色谱纯。4.3　键合硅固相萃取吸附剂填料伯仲胺 PSA（primary secondary amine） ：粒度 40 μm~70μm。 4.4　键合硅固相萃取吸附剂填料十八烷基硅烷键合硅胶 C18 （ostade-cylsilane） ：粒度 40 μm ~70 μm。 4.5　石墨化碳黑填料 GCB（graphitized carbon black） ：粒度 40 μm ~70 μm。 4.6　氯化钠。4.7　无水硫酸钠：550 ℃马弗炉内烘 4 h，200 ℃时取出置于干燥器内冷却后装瓶备用。 4.8　磷酸。4.9　磷酸溶液（10%） ：量取 10 mL 磷酸（4.8）溶于水中并用水定容至 100 mL。4.10 　克菌丹标准品（Captan，C 9H8Cl3NO2S，CAS NO ：133-06-2） ：纯度≥ 99%。 4.11 　克菌丹标准储备溶液：准确称取适量克菌丹标准品，用正己烷配制成浓度为 0.1 mg/mL 的标 准储备液，棕色瓶中于 0 ℃~4℃冰箱中保存。 4.12 　克菌丹标准工作溶液：吸取适量标准储备溶液（4.11） 用正己烷稀释成合适浓度的标准工作液。 4.13 　有机相滤膜：0.22 μm。 5　主要仪器和设备 5.1　气相色谱仪：带电子捕获检测器。以正式出版文本为准2 SN/T 0654—20195.2　气相色谱 - 质谱 / 质谱仪：配备 EI 源。 5.3　天平：感量为 0.1 mg 和 0.01 g。5.4　氮吹仪。5.5　涡旋混合器。5.6　离心机：转速≥ 5 000 r/min。5.7　超声波发生器。5.8　刻度离心管：15 mL。 6　样品制备与保存 从所取全部样品中取出代表性样品约 500 g 按照 GB 2763 要求处理，用捣碎机全部磨碎混合均 匀，均分成两份，分别装入洁净容器中，密封，并标明标记，于 -18 ℃以下冷冻存放。 在样品制备和保存过程中，应防止样品受到污染或者发生残留物含量的变化。 7　测定步骤 7.1　提取 称取 5.0 g 试样（精确至 0.01 g） ，置于 50 mL 离心管内。加 5 mL 10% 磷酸溶液（4.9）浸泡 5 min，加入 25 mL 乙腈（4.2）和 7 g 氯化钠（4.6）剧烈涡旋振荡混匀提取 10 min，在 5 000 r/min 下离心 5 min，取 10 mL 上清液于 15 mL 具塞试管内待净化。 7.2　净化 在上述装有上清液的具塞试管内加入 100 mg PSA 填料、50 mg C18 填料和 30 mg GCB 填料，充 分涡旋 1 min，5 000 r/min 离心 1 min，准确移取 5 ml 净化液至 15 mL 具塞试管内在 40 ℃下氮吹至 近干，加入 1.0 mL 正己烷（4.1）溶解残渣并超声 15 s 后加入 0.1 g 无水硫酸钠（4.7）除水，涡旋 1 min，过 0.22 μm 滤膜，注入气相色谱仪或气相色谱 - 质谱 / 质谱联用仪分析。 7.3　测定 7.3.1　仪器条件7.3.1.1 气相色谱参考条件如下： a）色谱柱：HP-5，柱长 30 m，内径 0.32 mm，膜厚 0.25 μm 或同等性能的色谱柱； b）柱温度程序：初始温度 50 ℃保持 1 min， 以 8 ℃/min 升温至 180 ℃，保持 1 min，再以 20℃/min 升温至 300 ℃，保持 2 min ； c）进样口温度：240 ℃； d）检测器温度：300 ℃； e）载气：氮气（纯度≥ 99.999%） ，1.0 mL/min ； f）尾吹气：氮气（纯度≥ 99.999%） ，30 mL/min ；g）进样方式：不分流进样；h）进样量：1.0 μL。 7.3.1.2 气相色谱 - 质谱 / 质谱参考条件如下： a）色谱柱：HP-5 MS，柱长 30 m，内径 0.25 mm，膜厚 0.25 μm 或同等性能的色谱柱；以正式出版文本为准3 SN/T 0654—2019b）柱温度程序：初始温度 50 ℃保持 1 min， 以 10 ℃/min 升温至 200 ℃，保持 1.5 min，再以 20℃/min 升温至 300 ℃，保持 2 min ； c）进样口温度：260 ℃； d）色谱 - 质谱接口温度：280 ℃； e）离子源温度：180 ℃； f）载气：氦气（纯度≥ 99.999%） ，1.0 mL/min ； g）离子源：电子轰击源（EI 源） h）进样方式：不分流进样，1.5 min 开阀； i）进样量：1.0 μL； j）溶剂延迟：5 min ；k）扫描方式：多反应离子监测模式（SRM） ；其母离子 m/z 147.97，子离子 m/z 分别为 104.87*、 78.97、69.93。 a 7.3.2　气相色谱法测定 根据样液中待测物含量情况，选定含量相近的标准系列工作溶液。标准工作溶液和样液中待测 农药的相应值均应在仪器的线性范围内。标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条 件下，克菌丹保留时间约为 18.81 min，标准品的色谱图参见附录 A 中图 A.1。 7.3.3　气相色谱 - 质谱 / 质谱法测定及确证 根据样液中被测物的含量情况，选定浓度相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中克菌丹 的响应值均应在仪器检测线性范围内。对标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。如果样液与标 准工作溶液的选择离子色谱图中，在相同保留时间处有色谱峰出现，并且在扣除背景后的样品质量色谱图中，所选离子均出现，所选择离子的丰度比与标准品对应离子的丰度比，其值在允许范围内 （允许范围见表 1） ，则可确定样品中存在对应的被测物。在 7.3.1.2 条件下，克菌丹的保留时间为 18.94 min，其气相色谱 - 质谱 / 质谱 MRM 图见附录 A 中图 A.2。 表 1 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 /% ＞ 50 ＞ 20~50 ＞ 10~20 ≤ 10 允许的相对偏差 /% ±20 ±25 ±30 ±50 7.3.4 空白试验 除不称取试样外，均按上述测定条件和步骤进行。 8　结果计算与表述 用 GC 或 GC-MS/MS 数据处理系统或按式（1）计算试样中克菌丹的残留量： mAVcAX s×××= ……………………………（1） 式中： X—— 试样中克菌丹的含量，单位为