ICS 65.150 B 51 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T 20842018 金乌贼 Golden cuttlefish 2018-05-07 发布 2018-09-01实施 中华人民共和国农业农村部‧发布 SC/T 2084—2018 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任， 本标准由农业农村部渔业渔政管理局提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会海水养殖分技术委员会(SAC/TC156/SC 2)归口。 本标准起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所、中国海洋大学、青岛金沙滩水产开发有限 公司。 本标准主要起草人：陈四清、刘长琳、葛建龙、张秀梅、薛祝家、燕敬平。 I SC/T 2084—2018 金 乌 贼 1范围 本标准规定了金乌贼(Sepiaesculenta Hoyle,1885)的术语和定义、学名与分类、主要形态特性、生 长与繁殖特性、细胞遗传学特性、分子遗传学特性、检测方法及判定规则。 本标准适用于金乌贼的种质鉴定与检测 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的, 仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版不(包括 舌所有修改单)适 GB/T 18654.2养殖鱼类种质检验 部分 方法 GB/T 18654.12 养殖鱼类种质 部分：染色体 3术语和定义 3. 1 背长 doral mantle length 躺部背面中线最前端至 后端的长度，骨 3. 2 U 躺背宽doral mantlelength 嗣部背面的最大 3. 3 触腕长 tentacleI 触腕末端至触腕基 长 3. 4 U 触腕穗长tentacle club length 触腕末端吸盘集中区的最 大长度。 3. 5 内壳长 cuttlebone length 内壳中线最前端至骨针末端的长 3. 6 内壳宽 cuttlebone width 内壳左右的最大宽度。 4学名与分类 4.1学名 金乌贼 Sepia esculenta Hoyle,1885。 4.2分类地位 头足纲（Cephalopoda）、乌贼目（Sepida）、乌贼科（Sepidae)、乌贼属（Sepia）。 1 SC/T 2084—2018 5 主要形态特性 5.1外形 金乌贼背腹略扁平，嗣部呈盾形。体被黄褐色，雄性背部具较粗的白色横纹，间杂有极密的细斑点， 雌性背部的横条纹不明显，或仅偏向两侧,或仅具极密的细斑点。头部较短，略呈圆球形，两侧各有一个 构造发达的眼晴。口腕5对生于头部前方,其中4对无柄腕,左右各4只，每个腕上有4列吸盘；触腕1 对有柄,稍超过嗣长，伸缩性大，触腕穗半月形，吸盘微小，10列～12列，每横行各吸盘大小相近。雄性 左侧第4腕茎化,基部5行吸盘正常，随后的茎化部具5行～6行微小的吸盘。鳍位于部两侧全缘，后 端不愈合,基部各具1白线和6个～7个膜质肉突。石灰质内壳发达，长椭圆形；腹面横纹面单峰型，峰 顶略尖，腹面中央具1纵沟;后端骨针粗壮。金乌贼外部形态见图1。 a）背面观 b）内壳 c）触腕穗 图1 金乌贼外部形态 5.2可数性状 5.2.1口腕 腕4对,触腕1对。 5.2.2吸盘 腕吸盘4列，触腕穗吸盘10列~12列。 5. 3 可量性状 可量性状比值应符合表1的规定。 表 1 可量性状比值 内容 比值 背长/嗣背宽 1.55~2.05 触腕穗长/触腕长 0.11~0.22 内壳长/内壳宽 2.43~3.39 6生长与繁殖 6. 1 躺背长与体重关系 4月～10月龄雌性和雄性的背长与体重关系可分别由式(1)、式(2)描述。 W(早) = 0. 002 9 L2.2842,R² = 0.934 (1) W(含 )= 0. 009 6 L2.0877,R² = 0.925 (2) 式中： W- 体重,单位为克(g)； 2 SC/T 2084—2018 L一一背长,单位为毫米(mm)。 6.2繁殖 6.2.1性成熟年龄 寿命为一年,8个月～10个月可达性成熟。 6. 2. 2 繁殖期 繁殖一次,属多次产卵类型,产卵期 30 d～50 d。 6.2.3 受精卵 受精卵略呈葡萄状,具卵柄,外被三级卵膜,卵膜近奶油色,半透明,初产卵径长轴为 11 mm～24 mm, 短轴为 8 mm~15 mm。 6. 2. 4 怀卵量 怀卵量为1000粒～3000粒。 7 细胞遗传学特性 7. 1 染色体数 体细胞染色体数：2n=92。 7. 2 2核型 核型公式:2n=44m十32sm十10st十6t,染色体总臂数(NF)为168。染色体核型见图2。 m KX XX k x Xx xK XX sm ×义 X XX XX X Xk XK Xx 88 Xx 从 Kx st 人入 MK ！ 图 2 金乌贼染色体核型 8 分子遗传学特性 线粒体COI片段序列： CACATTATAC TTTATTTTTG GTATTTGATC TGGTTTATTA GGGACTTCTT 50 TAAGCCTAAT AATTCGAAGA GAGTTAGGTA AGCCCGGTAC CTTATTAAAT 100 GATGATCAAC TATATAATGT TGTAGTAACC GCTCATGGAT TCATTATAAT 150 TTTTTTTA GTAATACCTA TTATAATTGG GGGATTTGGT AACTGACTAG 200 250 ATAAGATTTT GATTACTTCC CCCTTCATTA ACCTTACTTT TATCTTCTTC 300 CGCCGTGGAA AGGGGAGCAG GAACAGGATG AACTGTCTAC CCTCCTTTAT 350 CAAGTAACCT CTCACACGCA GGACCTTCTG TCGATTTGGC AATTTTTTCA 400 TTACACCTGG CTGGTGTATC ATCAATTCTA GGGGCTATTA ATTTTATTAC 450 AACTATTTTA AATATACGTT GAGAAGGCCT ACAAATAGAG CGATTACCTT 500 TATTTGCTTG ATCTGTTTTT ATTACAGCTA TTTTATTACT TTTATCTCTT 550 CCTGTGTTGG CAGGGGCTAT TACAATACTA TTAACAGATC GAAATTTTAA 600 TACCACATTT TTTGACCCAA GAGGAGGTGG AGACCCTATT CTATACCAAC 650 ACTTATTT 658 3 SC/T 2084—2018 9 检测方法 9. 1# 抽样方法 按GB/T18654.2的规定执行。 9.2性状测定 9.2.1 可数性状 肉眼观测并计数。 9.2.2可量性状 取新鲜样品，自然摆放于托盘中，根据各可量性状（背长、背宽、触腕长、触腕穗长、内壳长、内壳 宽）的定义，用直尺(精度1mm）进行测量，体重用电于 平(精度0.1g)称量。 9.3细胞遗传学特性检测 9.4分子遗传学特性检测 10判定规则 以第5章和第 章为主 结合第8章 距 吉果。经检验， 符合上述质量要求 的样品 合格样品 SC/T 2084—2018 附录A (资料性附录) 线粒体COI片段序列测定方法 A. 1 取肌肉组织剪碎,经 CTAB 裂解液[2% CTAB,1. 4 mol/ L NaCl,100 mmol/ L Tris-HCl(pH 8. 0),20 mmol/L EDTA-Na2,0. 2% β-mercaptoethanol)和蛋白酶 K 消化后,按照标准的酚-氯仿抽提法 进行总DNA的提取。 A.2 引物序列为 COI-F:5'-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3'和 COI-R:5'-TAAACT- TCAGGGTGACCAAAAAATCA-3'。 A.3PCR 反应体系包括 1. 25U 的 Taq DNA 聚合酶;各种反应组分的终浓度为 0. 2 μmol/L 的正反向 引物;200 μmol/L的每种 dNTP,10XPCR 缓冲液[200 mmol/L Tris-HCl,pH 8. 4;200 mmol/L KCl; 100 mmol/ L(NH4)zSO4;15 mmol/L MgCl,J5 μL,模板 DNA 2 μL,加灭菌蒸馏水至 50 μL。 A.4PCR参数包括94℃预变性3min;94℃变性45s,52℃退火45s,72℃延伸1min，循环35次；然后 72℃延伸10min。扩增反应在热循环仪上完成。 A.5PCR产物经纯化后直接送测序公司进行双向测序,经序列比对分析,获得线粒体 COI 片段序列。 5