ICS 65.150 B 51 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T 2077—2017 漠斑牙鲆 Southern flounder 2017-06-12 发布 2017-10-01实施 中华人民共和国农业部 发布 SC/T 2077—2017 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由农业部渔业渔政管理局提出， 本标准由全国水产标准化技术委员会海水养殖分技术委员会(SAC/TC156/SC2)归口。 本标准起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所。 周、徐永江。 SC/T 2077—2017 漠斑牙鲆 1范围 本标准给出了漠斑牙鲆[Paralichthyslethostigma（Jordan&Gilbert，1884)］的学名与分类、主要 形态特征、生长与繁殖、细胞遗传学特征、分子遗传学特征、检测方法及判定规则。 本标准适用于漠斑牙鲆种质鉴定和检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T18654.2养殖鱼类种质检验第2部分：抽样方法 GB/T18654.3养殖鱼类种质检验第3部分：性状测定 GB/T18654.12养殖鱼类种质检验第12部分：染色体组型分析 3学名与分类 3.1学名 漠斑牙鲆 Paralichthys lethostigma(Jordan & Gilbert,1884)。 3.2分类地位 硬骨鱼纲（Osteichthyes），鲽形目（Pleuronectiformes），牙鲆科（Paralichthyidae），牙鲆属（Paralich- thys)。 4主要形态特征 4.1外部形态 漠斑牙鲆体形呈扁平、卵圆形，两眼位于头部左侧。变态前双眼分别位于身体两侧，随着仔稚鱼生 长，右侧的眼晴逐渐移向左侧。变态完成后，开始营底栖生活，无眼侧（体右侧，腹部)贴底，有眼侧（左 侧，背部)朝上。漠斑牙鲆有眼侧呈浅褐色，体表颜色明暗相间，并混合着一些不规则的棕褐色斑点，无 眼侧为乳白色。体腔小，无。漠斑牙鲆外观形态见图1。 图1漠斑牙鲆外形 4.2可数性状 4.2.1背鳍条数为80条～95条，胸鳍条数为11条～13条，臀鳍条数为63条～74条，尾鳍数为17条。 SC/T 2077—2017 4.2.2第一鳃弓上鳃耙数为2个～3个，下鳃耙数为8个～11个。 4.2.3脊椎骨36个～38个。 4.3可量性状 可量性状比值见表1。 表 1 可量性状比值 体长/体高 体长/头长 体长/尾柄长 尾柄长/尾柄高 头长/吻长 2.02~2.42 3.49~3.91 10.56~12.20 0. 61~0. 87 3.09~4.29 5 生长与繁殖 5.1年龄与生长 1龄～2龄个体的体长、 龄的体 体重实测值及标准差 年龄 体长范 平均体长士标准差 体重范围 平均体重土标准差 龄 mm g 1（雌雄混合） 500 2±2 54 40 829±976 S ~624 ±1 0.41 249 2（雌雄混合 1804±1452 2(雌) 624 426 458~ 854±1617 5.2繁殖 性成熟年龄 雄鱼体长约 25 cm, 300 g～400 g;雌鱼体 体重 800 g～ m, 1000g。雌鱼为 分批成 戈熟多次产卵类型，卵巢发育过程中卵母细胞逐渐成熟 多次排放， 较大个体雌 鱼怀卵量可达 ；体外受精，受精卵为浮性卵、透明，中间偏边缘有 大的油球， 卵径为0.85 mm~1.05 mm. 6 细胞遗传学特 C 6. 1 染色体数 自 体细胞染色体数 6.2染色体核型 人 染色体核型公式： NF 48. 漠斑牙鲆染色体核型见图2。 AAA AN 00 AA AA 图 2 漠斑牙鲆染色体核型图 7 分子遗传学特征 对线粒体16SrRNA基因片段进行扩增和测序，获得长度为633bp核苷酸序列,种内个体间遗传 距离小于2%,核苷酸序列如下： 2 SC/T 2077—2017 1 CGCCTGTTTTACCAAAAACATCGCCTCTTGCAAAACATAAGTATAAGAGGTCCCGCCTGC 60 61 CCAGTGACAAGATAGTTTAACGGCCGCGGTATTTTGACCGTGCAAAGGTAGCGTAATCAC 120 121 TTGTCTTTTAAATGAAGACCCGTATGAATGGCATAACGAGGGCTTAACTGTCTCCTTCCC 180 181 CCAGTCAATGAAATTGATCTCCCCGTGCAGAAGCGGGGATAAAATCATAAGACGAGAAGA 240 241 CCCTATGGAGCTTTAGACGCAAAGACAGATCATGTCAAATACACCTAGTTATAGGCCTGA 300 301 ACTAAATGAAACCAGTCTTGATGTCTTCGGTTGGGGCGACCATGGGGAACACAAAACCCC 360 361 CACGTGGAACAGGAGTACACCCCTATCTTTCCCACCTCCTACAAACTAGAGCAACAGCTC 420 421 TAATAAGCAGAAATTCTGACCAAACTGATCCGGCAACGCCGATCAACGAATCAAGTTACC 480 481 CTAGGGATAACAGCGCAATCCCCTTTTAGAGCCCATATCGACAAGGGGGTTTACGACCTC 540 541 GATGTTGGATCAGGACATCCTAATGGTGCAGCCGCTATTAAGGGTTCGTTTGTTCAACGA 600 601 TTAAAGTCCTACGTGATCTGAGTTCAGACCGGA 633 8检测方法 8.1抽样方法 按GB/T18654.2的规定执行。 8. 2形态性状测量 按GB/T18654.3的规定执行。 8.3染色体检测 染色体的制备、计数与核型分析按GB/T18654.12的规定执行。 8.4线粒体16 S rRNA基因片段的扩增 8.4.1DNA提取 每个个体取约100mg肌肉,剪碎组织,加人475μL组织匀浆缓冲液(10mmol/LTris-HCl,pH= 8.0;50mmol/LEDTA,pH=8.0),充分混匀,依次加人终浓度为10%的SDS和20μg/mL的蛋白酶 K,55℃裂解至澄清，用酚、酚：氯仿(1：1)和氯仿各抽提1次。DNA用1%琼脂糖凝胶电泳检测，全自 动凝胶成像系统拍照，一20℃保存备用。 8.4.2 PCR 扩增 CACGT-3'。 PCR反应条件：94℃预变性5min，94℃变性30s,56℃退火30s，72℃延伸1min，30个循环；72℃延 伸 5 min。PCR反应总体积体系为 25 μL,10XPCR buffer 2. 5 μL,dNTPs 0. 2 mmol/L,MgCl² 2 mmol/ L,Taq酶1 U。引物各 0.12 μmol/L,模板 DNA 50 ng～100 ng。 PCR扩增产物经1.0%琼脂糖凝胶检测，电泳缓冲液为1XTBE（pH8.0），电压为4V/cm， Genefinder染色，于凝胶成像系统下观察并拍照记录。 8.4.3DNA序列测定 将PCR产物纯化后双向测序。 9判定规则 检测结果不符合第4章、第6章中任意一条要求的，则判定为不合格项；有不合格项的样品为不合 格样品。 3 中华人民共和国 水产行业标准 漠斑牙鲆 SC/T 2077—2017 * * * 中国农业出版社出版 (北京市朝阳区麦子店街18号楼) （邮政编码：100125 网址：www.ccap.com.cn) 北京印刷一厂印刷 新华书店北京发行所发行各地新华书店经销 * * * 开本880mmX1230mm1/16 印张0.5 字数10千字 2017年9月第1版 2017年9月北京第1次印刷 书号：16109·4222 定价：12.00元 版权专有侵权必究 SC/T 2077-2017 举报电话：（010）65005894 中华人民共和国 水产行业标准 漠斑牙鲆 SC/T 2077—2017 * * * 中国农业出版社出版 (北京市朝阳区麦子店街18号楼) （邮政编码：100125 网址：www.ccap.com.cn) 北京印刷一厂印刷 新华书店北京发行所发行各地新华书店经销 * * * 开本880mmX1230mm1/16 印张0.5 字数10千字 2017年9月第1版 2017年9月北京第1次印刷 书号：16109·4222 定价：12.00元 版权专有侵权必究 SC/T 2077-2017 举报电话：（010）65005894