ICS 65.150 B 51 Sc 中华人民共和国水产行业标准 SC/T 2071—2014 马氏珠母贝 Marten's pearl oyster 2014-03-25发布 2014-06-01实施 中华人民共和国农业部 发布 SC/T 2071—2014 前 言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由农业部渔业局提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会海水养殖分技术委员会（SAC/TC156/SC2)归口。 本标准起草单位：广西壮族自治区水产研究所。 本标准主要起草人：李咏梅、杨春玲、彭敏、彭金霞、蒋伟明、陈秀荔。 SC/T 2071—2014 马氏珠母贝 1范围 本标准给出了马氏珠母贝（PinctadamartensiiDunker，1850）主要形态构造特征、生长与繁殖、细 胞遗传学特征、检测方法和判定规则。 本标准适用于马氏珠母贝的种质检测和鉴定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T18654.12养殖鱼类种质检验第12部分：染色体组型分析 3名称与分类 3.1学名 马氏珠母贝(Pinctadamartensii Dunker,1850)。 3.2分类位置 软体动物门（Mollusca），双壳纲（Bivalvia），翼形亚纲（Pterimorphia），珍珠贝目（Pterioida），珍珠 贝科(Pteridae)，珠母贝属（Pinctada）。 4主要形态构造特征 4.1外部形态特征 4.1.1外形 贝壳斜四方形，壳顶位于前方，后耳大，前耳稍小。背缘平直，腹缘圆。边缘鳞片层紧密，末端稍翘 起。同心生长轮脉极细密，呈片状。两壳不等，左壳稍凸，右壳较平，右壳前耳下方有一明显的足丝凹。 绞合线直，韧带紫褐色。沿绞合线下方有一长形齿片。贝壳内面中部珍珠层厚，光泽强，边缘淡黄色。 闭壳肌痕大，呈半月形，位于贝壳中央稍偏后方。马氏珠母贝的外形见图1。 1cm 图1马氏珠母贝的外部形态图（仿张玺） 1 SC/T 2071—2014 4.1.2可数性状 自壳顶的平滑面至壳缘，有5条～7条暗褐色的放射带。 4.1.3可量性状 对壳长52.14mm~72.90mm、体重23.20g~51.90g的50个个体进行数量性状的测量，数据见 表1。 表 1 马氏珠母贝数量性状统计表 壳长 壳高 壳宽 体重 性状 壳高/壳长 壳宽/壳长 mm mm mm g 平均值 60.76 63.02 22.28 34.29 1. 038 0.368 标准差 ±4.64 ±5.73 ±1.84 ±6. 00 ±0.131 ±0.036 4.2内部构造特征 4.2.1外套膜 分左、右两片，在背面绞合部处愈合，属二孔型。 4.2.2生殖系统 通常为雌雄异体，一般雄性的生殖腺颜色为乳白色或橙红色，雌性的生殖腺为黄色或浅黄色。 5生长与繁殖 5.1生长 5.1.1体重壳长生长关系式 马氏珠母贝在自然条件下壳长(L)与体重(W)关系式见式(1)。 W = 0. 0488 X L1.5937 (1) 式中： W一-马氏珠母贝壳长L时的体重，单位为克（g)； I 马氏珠母贝体重W时的壳长，单位为毫米（mm）。 5.1.2壳长、壳高、壳长及体重测量值 不同年龄组马氏珠母贝个体壳长、壳高测量值见表2。 表2不同年龄组马氏珠母贝个体壳长、壳高测量值 贝龄 壳长 壳高 壳宽 体重 龄 mm mm mm g 1 53.08±5.42 53.92±5.67 20.98±1.61 27.83±6.62 2 54.04±4.77 61.17±4.31 23.60±1.49 42.52±7.55 2. 5 61.02±3.18 71.77±0.66 25.73±1.36 55.83±5.59 3 68.89±2.63 77.78±0.53 28.65±1.24 64.81±5.33 3. 5 75.47±2.65 84.27±1.09 30.48±1.17 71.63±5.31 5.2繁殖 5.2.1性成熟年龄 性成熟年龄为1龄。 5.2.2繁殖期 一年两次，每年5月～6月和9月～10月为繁殖期。 5.2.3怀卵量 壳高60mm～70mm的个体，怀卵量为2×106粒～5×10粒。 5.2.4生殖方式 2 SC/T 2071--2014 卵生型。 6细胞遗传学特征 6.1染色体数 2n=28。 6.2核型 核型公式：2n=14m十6sm十6st十2t。 染色体总臂数：NF=48。 染色体组型见图2。 Xx xxxxxK rx 5μm 图2马氏珠母贝成贝鳃细胞中期染色体组型 7检测方法 7.1主要生物学性状检测 7.1.1抽样方法 随机抽样，形态性状测定的样本量不少于30个；繁殖性能测定样本量不少于10个。 7.1.2性状测定 用游标卡尺测量壳长、壳高、壳宽等数值（具体测量方法如图3），精确到0.1mm。电子天平称量体 重,精确到0.1g。 壳长（Shelllength，SL）：前后缘鳞片基部与绞合线平行的最大距离；壳高（Shellheight，SH）：从壳 +SW：壳宽+ 图3马氏珠母贝贝壳量度示意图 SC/T 2071—2014 顶至腹缘鳞片基部与绞合线垂直的最大距离；壳宽（Shellwidth，SW）：捏紧两边贝壳使壳宽不再变小时 测量其两壳最大距离。 7.1.3年龄鉴定 根据养殖时间测定年龄；或以贝壳表面壳顶为中心呈环行的生长线来判定，在贝壳外表缘有规则的 环状鳞片之间，有明显略大于有规则环状鳞片的生长线即作为年龄的分界线。 7.1.4怀卵量测定 解剖刀划开性腺部分，用过滤海水和解剖刀把覆盖在内脏团上的卵子边刮边冲洗人玻璃烧杯中。 然后，用玻璃棒轻轻打散卵块并搅拌，使卵液混合均匀，定容。用吸管吹匀卵液，在几个不同点等量取卵 液放在小烧杯中，用细胞计数法计算出卵子密度。重复取样3次以上得出卵子密度平均值，总卵量二卵 液总体积×卵子密度平均值。 7.2染色体组型检测 7.2.1染色体标本的制备 a）剪取小块鳃组织，用海水洗净，放人0.4g/L秋水仙素中30min； b） 用体积分数为20%的人工海水低渗处理50min(或者用0.075mol/LKCl低渗处理30min）; 卡诺氏液（V甲醇：V冰醋酸=3：1)固定约60min，中间换液4次； (P 用体积分数为50%的冰醋酸解离制成细胞悬液； e）50℃热滴片； f）空气干燥后，用10%Giemsa染液（pH6.8)染色20min(Giemsa染液配制见附录A)； g） 自来水冲洗，自然干燥后镜检。 7.2.2组型分析 按照GB/T18654.12的规定执行。 8判定规则 被检样品符合第4章中4.1.1、4.1.2以及第6章要求的为合格样品。如果有一项不符合的，可以 复检。复检不合格的判定为不合格，复检合格的判定为合格。 4 SC/T 2071—2014 附录A （规范性附录） Giemsa染色液配制 A.1Giemsa染液母液的配制 称取Giemsa粉0.5g，甘油33mL，甲醇33mL。配制时，先将Giemsa粉置于研钵中，加人少量甘 油，研磨至无颗粒。再加入余下的甘油，拌匀后放入56℃温箱中保温2h。然后，取出加入甲醇，充分拌 匀，滤纸过滤后用棕色瓶密封，避光保存。一般要放置2周后才能使用。 A.2磷酸缓冲液(pH6.8)的配制 该液可先配成甲液和乙液，然后混合使用。 甲液：KHzPO40.907g，蒸馏水溶解，定容至100mL。 乙液：Na2HPO4·2Hz01.18g，蒸馏水溶解，定容至100mL。 使用液（pH6.8）：甲液50.8mL，乙液49.2mL。该使用液不宜久放，一般现配现用。 A.3Giemsa使用液的配制 母液1份，pH6.8磷酸盐缓冲液9份。使用液不宜长期保存，一般现配。 5