ICS 65.150 B 52 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T 1144—2020 克氏原螯虾 Red swamp crayfish 2020-08-26发布 2021-01-01实施 中华人民共和国农业农村部 发布 SC/T 1144—2020 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由农业农村部渔业渔政管理局提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会（SAC/TC156/SC1)归口。 本标准起草单位：浙江省淡水水产研究所、江苏省淡水水产研究所。 本标准主要起草人：顾志敏、刘金殿、李喜莲、唐建清、郭建林、陆冬法、李飞、郝雅宾。 I SC/T1144—2020 克氏原螯虾 范围 本标准给出了克氏原螯虾[Procambarusclarkii（Girard，1852)］的学名与分类、主要形态结构特征、 生长与繁殖特性、遗传学特性、检测方法及判定规则 本标准适用于克氏原螯虾的种质检测和鉴定 2规范性引用文件 件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文 GB/T18654.2 养殖 鱼类种质检 第2部分 抽样方 GB/T18654 养殖色类种质 12部分 GB/T1865 15 养殖鱼 种质检 第 中部分 .RAPI SC/T 1102 类性状测 S 3学名与分类 3.1学名 克氏原鳌虾 [PCa? 3.2分类地位 U 节肢动物门 Arthr 亚 Reptantia）、螯虾科 (Astacidae) 虾属 4 主要形态结 构 4.1外部形态 4.1.1外形 体分头胸部与腹 度略 粗糙颗粒。颈沟很深。 额角呈锐角三角形，表面 中部凹陷两侧隆脊形，末端近锐刺状近未端两侧各 齿形缺刻。第二触角柄 约抵额角末端。腹节侧板末缘略呈圆钝 角形。 尾节长 ，侧缘近中部具缺刻，末缘 中部稍凹。鳌足粗大，长节背腹缘均具颗粒状锐刺，背面及内侧面均具短 锐刺，掌节背缘具刺状突起，内、 外侧具扁平的突起，两指略长于掌部，内缘具不规则齿。 外形见图1~图4。 图1 雄虾背面的外形图 雄虾腹面的外形图 1 SC/T1144—2020 图3雌虾背面的外形图 图4雌虾腹面的外形图 4.1.2雄性交接器 成熟雄虾前两对腹肢演变成钙质管状交接器。第一对腹肢末端内侧呈锐齿状，外侧具一叶状及齿状 突出；第二腹肢内肢粗壮，内侧末端卷叶状，外侧鞭形 雄虾的钙质管状交接器见图5。 图5雄虾交接器 4.1.3雌性纳精囊孔 雌虾第一对腹肢退化，很细；第三对步足基部内侧各有一个小孔，为纳精囊孔。 雌虾的纳精囊孔见图6。 图6雌虾纳精囊孔 4.2体色 体色随月龄与环境的变化而不同。幼虾颜色较浅，为淡褐色、黄褐色、深黄色等；成虾颜色较深，为深 红色。 4.3可数性状 4.3.1体节 虾体分为头胸部和腹部，腹部7节。 2 SC/T 1144—2020 4.3.2 附肢 附肢共有19对：头部5对，胸部8对，腹部6对。 4.4可量性状 主要可量性状比值范围见表1。 表1 克氏原螯虾主要可量性状比值范围 项目 雄性 雌性 体长/额角长 3.49~4.87 3.57~5.33 体长/头胸甲长 1.57~1.96 1.53~2.01 体长/第2步足长 1.62~2.58 1.63~2.98 体长/第5步足基部间距 11.57~22.09 10.74~19.42 额角长/头胸甲长 0.35~0.48 0.33~0.49 5 生长与繁殖特性 5.1 生长 体长与体重实测值见表2，体长与体重关系式参见附录A。 表21 体长与体重实测值 体长，cm 体重，g 组别 范围 平均值土标准差 范围 平均值土标准差 1 4.64~5.00 4.85±0.15 3.77~5.00 4.29±0.46 2 5.01~6.00 5.73±0.24 4.00~12.10 7.81±1.74 3 6.01~7.00 6.59±0.28 7.06~19.85 12.04±2.36 4 7.01~8.00 7.47±0.28 10.45~34.42 17.93±3.49 5 8.01~9.00 8.44±0.29 15.13~49.60 26.78±5.06 6 9.01~10.00 9.49±0.29 21.02~70.80 40.00±8.76 7 10.01~11.00 10.41±0.26 35.51~76.80 53.46±7.92 8 11.01~11.52 11.37±0.16 54.55~73.80 66.88±10.71 5.2繁殖 5.2.1性成熟月龄 9月龄～12月龄达性成熟。性成熟的个体体重一般在30g以上，体长一般在6cm以上。在养殖环 境中，6月龄～7月龄可达性成熟。 5.2.2繁殖期 -次性产卵，存在春、夏季和秋、冬季产卵群体，但以秋、冬季产卵群体为主。 5.2.3抱卵量 个体抱卵量为77粒～1500粒，相对抱卵量为每克体重3.04粒～19.83粒。 6 遗传学特性 6.1 细胞遗传学特性 精母细胞染色体数：2n=188。 精母细胞染色体中期分裂相见图7。 6.2分子遗传学特性 线粒体16SrRNA基因电泳图谱（Marker为DL2000)见图8。 3 SC/T 1144—2020 2 000 bp 1 000 bp 750 bp 500 bp 514bp 250 bp 100 bp 图7精母细胞染色体中期分裂相 图8线粒体16SrRNA基因电泳图谱 线粒体16SrRNA基因标准序列参见附录B。 7检测方法 7.1抽样 按GB/T18654.2的规定执行。 7.2性状测定 按SC/T1102的规定执行。 7.3繁殖力 计数10尾雌虾的抱卵数目。 7.4染色体检测 注射秋水仙素：秋水仙素浓度为4mg/mL，于第2体节腹部进行肌肉注射，处理时间4h～5h。 低渗：剪碎精巢组织，置于浓度为0.075mol/L的KCl溶液，常温放置40min～50min。 固定：取精巢组织，放人研磨器中，加固定液（V甲醇：Vz酸=3：1，现配现用）1mL。研磨后用100目 纱布过滤，吸取精巢细胞悬浮液，加固定液至4mL，固定20min后，1200r/min离心8min~12min，去 固定液，小心细胞沉淀浮起，浮起就停止吸取。再次加固定液，吹打细胞，固定20min后，离心，去固定液。 重复固定2次～3次。 滴片：将最后一次离心的细胞沉淀加入3mL左右的固定液，吹打细胞，吸取细胞悬浮液，滴在预冷的 载玻片上，滴3滴～4滴细胞悬浮液（细胞浓度低时，多滴几滴），在酒精灯上烘烤干燥。 其他步骤按GB/T18654.12的规定执行。 7.5分子遗传学特性 7.5.1样品制备、基因组DNA提取和PCR扩增 线粒体16SrRNA基因引物序列为16SF：CGCCTGTTTATCAAAAACAT；16SR：CCGGTCT GAACTCAGATCACGT。PCR扩增条件为：94℃2min；94℃，30s；52℃，40；72℃，1min，共35个循 环；72℃延伸10min。 其他步骤按GB/T18654.15的规定执行。 7.5.2PCR产物纯化和回收 取5μL扩增产物上样到1.0%的琼脂糖凝胶进行电泳分离，然后割胶，用凝胶抽提试剂盒进行PCR 产物纯化、回收。 7.5.3测序 纯化产物用于测序分析，正反双向测序。 7.5.4线粒体16SrRNA基因序列检测 4 SC/T 1144—2020 样本扩增片段测序后与克氏原螯虾16SrRNA基因标准序列进行同源比对，同源性应不小于98% 8判定规则 检验结果符合第4章、第6章，为合格；否则，为不合格。 线粒体16SrRNA基因扩增片段序列与标准序列的同源性高于98%的，为合格；否则，为不合格。