ICS 65.150 B 52 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T 1137—2019 淡水养殖水质调节用微生物制剂 质量与使用原则 Guideline for the quality and use of probiotics in the regulatiaon of water quality infreshwater aquaculture 2019-08-01发布 2019-11-01实施 中华人民共和国农业农村部 发布 SC/T 1137—2019 品 A 前 言 本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起幕 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由农业农村部渔业渔政管理局提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会（SAC/TC156/SC1)归口。 本标准起草单位：全国水产技术推广总站、山东农业大学、山东宝来利来生物工程股份有限公司。 本标准主要起草人：王玉堂、冯东岳、陈学洲、季相山、王兴华、李光、李建、赵凤梅、邹绍林， I SC/T 1137-2019 淡水养殖水质调节用微生物制剂质量与使用原则 1 范围 本标准规定了淡水养殖水质调节用光合细菌制剂、芽孢杆菌制剂和乳酸菌制剂等3种微生物制剂的 外观辨别、质量判定及使用原则。 本标准适用于淡水养殖水质调节用光合细菌制剂、芽孢杆菌制剂和乳酸菌制剂的质量判定及使用。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB4789.35食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验 GB/T5048防潮包装 GB/T26428饲用微生物制剂中枯草芽孢杆菌的检测 NY527—2002光合细菌制剂 SN/T3542光合细菌制剂中沼泽红假单胞菌计数方法 SN/T4624.1人境环保用微生物菌剂检测方法第1部分：地衣芽孢杆菌 SN/T4624.2人境环保用微生物菌剂检测方法第2部分：短小芽孢杆菌 3包装与标识 3.1包装 应符合GB/T5048的规定。 3.2标识 标识须含有产品名称、商标、标准编号、有效菌名称、有效菌含量、杂菌率、使用范围、功效、使用方法及 使用量、使用注意事项、生产日期、保质期、储存条件、生产单位、生产地址、联系方式等。 外包装（箱、袋、桶）应附有产品合格证。 4产品质量要求 4.1光合细菌制剂 4.1.1菌种种类 沼泽红假单胞菌（Rhodopseudomonaspalustris）、球形红假单胞菌（Rhoclopseudlomonas sphaeroides）等。 4.1.2外观和气味 液体制剂：紫红色、褐红色、暗红色、棕红色、棕黄色等液体，略有沉淀、略具清淡味。 固体制剂：粉末状或颗粒状，略具清淡腥味。 4.1.3pH 液体制剂：6.0~8.5。 4.1.4水分含量 固体制剂：≤20%。 4.1.5活菌数 液体制剂：≥5.0X108CFU/mL。 固体制剂：≥2.0×108CFU/g。 4.1.6杂菌率 1 SC/T 1137—2019 液体制剂：≤10%。 固体制剂：<15%。 4.1.7菌种鉴定 按照NY527、SN/T3542的规定执行。 4.2芽孢杆菌制剂 4.2.1菌种种类 枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌等。 4.2.2外观和气味 液体制剂：淡黄色、红棕色等液体，略有沉淀，具发酵臭味 固体制剂：粉末状或颗粒状，具发酵臭味。 4.2.3 pH 液体制剂：5.0~7.0。 4.2.4活菌数 液体制剂：≥2.0×10 CFU 固体制剂：≥1.0X 4.2.5水分含量 固体制剂：≤10° 4.2.6杂菌率 URAL 液体制剂：≤10% 固体制剂：<15% 4.2.7芽孢率 液体制剂：≥90% 固体制剂：≥95% 4.2.8菌种鉴定 枯草芽孢杆菌！ 地衣芽孢杆菌鉴定 照 /T4624. 1的规定执行 短小芽孢杆菌鉴定按 照SN 46242的 规定执行 4.3乳酸菌制剂 U 4.3.1菌种种类 人 植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、乳酸片球菌酪酸菌等。 4.3.2外观和气味 液体制剂：黄色、褐色等液体，略有沉淀，具发酵酸味。 固体制剂：粉末或颗粒状，具发酵酸味 4.3.3 pH 液体制剂：3.5~5.0。 4.3.4活菌数 液体制剂：≥3.0X10°CFU/mL。 固体制剂：≥1.0X10°CFU/g。 4.3.5水分含量 固体制剂：≤10%。 4.3.6杂菌率 液体制剂：<10%。 固体制剂：≤15%。 2 SC/T 1137—2019 4.3.7菌种鉴定 按照GB4789.35的规定执行。 5检测方法 5.1活菌数 光合细菌检测方法按照NY527的规定执行。 芽孢杆菌检测方法按照GB/T26428的规定执行。 乳酸菌检测方法按照GB4789.35的规定执行。 5.2杂菌率 采用5.1中经过10倍系列稀释的活菌数的样品，选取其中3个连续适宜稀释度进行杂菌率测定。采 用平板测数法测定。 5.3芽孢率 参照附录A的方法检测 5.4送检样品 参照附录B的方法检测 5.5判定规则 RESE 满足下列所有条件 判定力合格 a）菌种种类、活菌数、杂菌率均符合菌种广品质量要求 ）产品外观和气味PH水分含童芽包率等检测项自中有 项指标不符 本标 准时 应重新抽 b) 样，进行复检， 5.5.2 2不合格微生物制剂判定 出现下列任 条 件 手，定为不合格 a) 活菌数不符合本标准要 b) 杂菌率不符 本标准要求照 c) 菌种种类不符 合本标准要求， 芽孢率等检测项自中有工项指标不符合 标准时 外观和气味、pH水分含量 应重新抽样，进 (P 行复检,复检指标仍不符 本标准号 6 使用原则 微生物制剂使用应符合 不与抗生素、消毒剂等杀菌药物混合使用或同期同水体便用。 a) b) 使用含需氧型芽孢杆菌制剂时，采取增氧措施。 c) 宜多菌种配合使用。 (P 使用微生物制剂后，3d～5d内不宜排放养殖水体：如必须排放养殖水体的，应及时适量补充微 生物制剂。 3 SC/T 1137—2019 附录A (资料性附录） 芽孢率的检测 A.1革兰氏染色液 A.1.1结晶紫染色液 A.1.1.1成分 结晶紫 1.0 g 95%乙醇 20 ml. 1%草酸铵水溶液 80 mL. A.1.1.2制法 将结晶紫完全溶解于乙醇中，然后与草酸铵溶液混合。 A.1.2革兰氏碘液 A.1.2.1成分 碘 1. 0 g 碘化钾 2.0 g 蒸馏水 300 mL A.1.2.2制法 将碘与碘化钾先进行混合，加入蒸馏水少许，充分振摇，待完全溶解后，再加蒸馏水至300mL。 A.2革兰氏染色 A.2.1将产品混匀或摇匀，量取5g或5mL加人45mL水中，混匀后依次逐步稀释成10-²、10-3 10-8，吸取合适浓度的稀释液滴1滴在载玻片上，涂匀。 A.2.2将涂片在酒精灯火焰上固定，滴加结晶紫染色液，染1min，水洗。 A.2.3滴加革兰氏碘液，作用1min，水洗。 A.2.4滴加95%乙醇脱色，约15s～30s，直至染色液被洗掉，不要过分脱色，水洗。 A.2.5滴加复染液，复染1min。水洗、待干、镜检。 A.3镜检 在40倍物镜下观察，蓝色杆状的菌体为芽孢杆菌菌体，无色透明的空泡状孢子为芽孢杆菌孢子。计 3个视野下的菌体数和芽孢数。 A.4计算 根据孢子数占总菌数的百分率估算芽孢率，见式（1）。 P=A/(A+B)- (1) 式中： P一芽孢率,单位为百分率(%); 一孢子数，将制备的血球计数板放在光学显微镜下，放大到400倍，计数4个角上的4个大格和 中间1个大格的芽孢数,单位为个(ind); B——菌体数,将制备的血球计数板放在光学显微镜下,放大到400 倍，计数 4个角上的4个大格和 4 SC/T1137—2019 中间1个大格的菌体数，单位为个(ind)。 最终结果取3个视野的平均值。