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ICS 65.150 B 52 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T 1129—2016 乌藍龟 Chinese pond turtle 2016-12-23 发布 2017-04-01 实施 中华人民共和国农业部 发布 SC/T 1129—2016 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 本标准由农业部渔业渔政管理局提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会(SAC/TC156/SC1)归口。 本标准起草单位:中国水产科学研究院长江水产研究所、江西省水产科学研究所、湖北京山乌龟原 种场、江西金龟王实业有限责任公司。 本标准主要起草人:何力、贺刚、喻亚丽、张涛、方春林、周运涛、伍刚、盛长斌、费春平。 SC/T 1129—2016 乌 無龟 1 范围 本标准给出了乌龟(Chinemysreevesii)的主要形态构造特征、生长和繁殖特性、细胞遗传学特性、 生化遗传学特征、检测方法、检验规则与结果判定。 本标准适用于乌龟的种质检测与鉴定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T18654.2养殖鱼类种质检验第2部分:抽样方法 GB/T18654.12养殖鱼类种质检验第12部分:染色体组型分析 SC1093黄喉拟水龟 3 3名称与分类 3.1学名 乌龟(Chinemys reevesi)。 3.2别名 草龟、泥龟、香龟、金龟等。 3.3分类 爬行纲(Reptilia),龟鳖目(Chelonia),曲颈龟亚目(Cryptodira),淡水龟科(Bataguridae),乌龟属 (Chinemys) 。 4主要形态构造特征 4.1外部形态特征 4.1.1外形 乌龟体为长椭圆形,背甲稍隆起,有3条纵棱,脊棱明显。头顶黑橄榄色,前部皮肤光滑,后部具细 鳞,眼后至颈部具有黑色、黄绿色相互镶嵌的纵条纹3条。腹甲平坦,后端具缺刻。颈部、四肢及裸露皮 肤部分为灰黑色或黑橄榄色。趾间有蹼。背甲与腹甲以骨缝相连,无韧带组织;上颌骨齿槽面没有, 槽面中部宽,后面窄,前部不呈齿状,头宽不及背甲宽的1/2,吻部倾斜。雌性龟背甲较短且宽,腹甲平 坦中央无凹陷,尾细且短,尾基部细,泄殖孔距腹甲后缘较近;雄性龟背甲较长且窄,腹甲中央略微向内 陷,尾粗且长,尾基部粗,泄殖孔距腹甲后缘较远。雄性乌龟成熟后全身变成黑色,而雌性乌龟显棕褐色 体色。 乌龟外部形态背面见图1,腹面见图2。 SC/T 1129—2016 a)雌性 b)雄性 图1乌龟背面图 a)雌性 b)雄性 图 2 2乌龟腹面图 4.1.2可数性状 4.1.2.1背甲 颈盾:1枚。 椎盾:5枚。 肋盾:8枚,左右各4枚。 缘盾:22枚,左右各11枚。 臀盾:2枚,左右各1枚。 4.1.2.2腹甲 喉盾:2枚,左右各1枚。 肱盾:2枚,左右各1枚。 胸盾:2枚,左右各1枚。 腹盾:2枚,左右各1枚。 股盾:2枚,左右各1枚。 肛盾:2枚,左右各1枚。 4.1.2.3甲桥 腋盾:2枚,左右各1枚。 膀盾:2枚,左右各1枚。 SC/T 1129—2016 4. 1.3可量性状 样品范围:雌性体重48.7g~1561.7g,背甲长64.5mm~217.9mm;雄性体重96.3g~307.0g, 背甲长85.0mm~129.7mm;年龄0+~4+。各可量性状的比例见表1。 表 1 可量性状比例值 雌龟 雄龟 比例 平均值土标准差 范围 平均值土标准差 范围 背甲宽/背甲长 0.70±0.04 0.61~0.79 0.64±0.01 0.62~0.65 壳高/背甲长 0.44±0.02 0.37~0.55 0.42±0.02 0.39~0.48 腹甲长/背甲长 0.91±0.03 .83~0.98 0.80±0.03 0.77~0.84 腹甲后半部长/背甲长 0.42±0.03 0.33~0.49 0.40±0.02 0.35~0.42 腹甲前半部宽/背甲长 0.46~0.89 0.49±0.02 0.45~0.54 腹甲后半部前宽/背甲长 0.39~0 41±0.02 0.38~0.46 腹甲后半部后宽/背甲长 0.26 0.02 0.23~0.30 甲桥长/背甲长 28.402 30 02 0.27~0.32 喉盾宽/背甲长 20±0. 0.10~0.12 喉盾缝长/背甲长 14±0.02 Q.12 .02 0.10~0.15 肱盾缝长/背甲长 0.08±0.02 0. 01~ 3 0.80 0.04~0.07 胸盾缝长/背甲 0:12NO.24 0.15~0.21 腹盾缝长/背甲 0:21±0. 0.11 0. 15~0. 22 160.01 股盾缝长/背甲长 174 0.15~0.18 肛盾缝长/背甲长 07020.22 0.06~0.11 ARC 肺海绵状, ,分左诺两 叶:紧靠体壁背部,左右支气管分别与左右肺相通 心脏具2 心 房室 泄殖腔两侧向腹腔有突出囊状结构,左右侧各 雌雄异体 维性睾 肾脏前端 雌性卵巢1对,在腹腔后 部,性状不规则, 平时为橙红色 CENTE 5 生长和繁殖特性 5.1生长 实测值变动范围见表2 表2 年龄,龄 4+ 背甲长,mm 3. 1 36 5.37 .89 9.62~10:80 -14.04 16.19~18.15 背甲宽,mm 2.60 47 6.65 ~7.33 04~9.48 10.75~11.97 体重,g 8.48~8.8 31.56~39.24 153.03~205 268.75~449.49 696.93~929.47 5.2繁殖 5.2.1性成熟年龄 自然条件下4+的乌龟性腺成熟。 5.2.2繁殖期 长江流域乌龟的交配时间开始于4月下旬,产卵期是5月~8月,6月~7月为产卵高峰期。 5.2.3产卵类型 雌龟一年多次产卵,一般每年产卵3次~4次。 5.2.4产卵量 每次产卵4枚~9枚。 3 SC/T 1129—2016 6 细胞遗传学特性 体细胞染色体数:2n=52,染色体臂数(NF):70。 核型公式:14m十4sm十24t十10mc。 染色体组型见图3。 美美 nn An 5μm 图 3 乌龟染色体组型图 生化遗传学特征 乌龟肾脏乳酸脱氢酶(LDH)同工酶电泳图见图4。 > LDH1 图 4乌龟肾脏乳酸脱氢酶(LDH)同工酶电泳图 8检测方法 8.1抽样 按GB/T18654.2的规定执行。 8.2性状测定 龟外部形态中的可数性状及可量性状的测定,按SC1093的规定执行。 4 SC/T 1129—2016 8.3年龄鉴定 根据龟背甲上椎盾的同心致密窄圆进行鉴定,每一个同心致密窄圈为1龄。 8.4染色体制备及分析 按SC1093的规定执行 8. 5 肾脏乳酸脱氢酶(LDH)分析 8.5.1样品制备 每个样本取肾脏0.3g,以1:3比例(重量g:体积mL)加人0.3%辅酶I液(β-NAD0.3g溶于 100mL蒸馏水中),冰浴条件下充分匀浆后,在4℃12000r/min离心20min,取上清液。重复2次,置 于一20℃保存以备用。 8.5.2凝胶制备 采用垂直板聚丙烯酰胺(PAGE)凝胶电泳,凝胶由6.5%分离胶和3.0%浓缩胶制成。各种凝胶制 备配方见A.1。 8.5.3点样和电泳 电泳缓冲液为Tris-甘氨酸(TG),pH=8.3,每孔加样20μL,并加少许溴酚蓝做指示剂,置于4℃冰 箱中,稳压220V条件下进行电泳,至溴酚蓝指示剂到下槽玻璃下缘为止。 8.5.4染色、褪色和保存 8.5.4.1染色 将电泳胶放人预先制备好的染色液(见A.4)中,30℃恒温条件下染色30min~50min,直至酶带清 晰为止。 8.5.4.2褪色 在2.5%的冰乙酸中褪色至底板清晰、透明。 8.5.4.3保存 透明后即刻对褪好色的凝胶进行拍照和保存。 9检验规则与结果判定 按GB/T18654.12的规定执行。

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