ICS 65.020 B 16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3345—2019 梨黑星病抗性鉴定技术规程 Technical code of practice for evaluation of pear resistance to scab 2019-01-17发布 2019-09-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T3345—2019 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由农业农村部种植业管理司提出并归口。 本标准起草单位：中国农业科学院果树研究所。 本标准主要起草人：董星光、曹玉芬、周宗山、田路明、张莹、齐丹、霍宏亮、徐家玉。 I NY/T3345—2019 梨黑星病抗性鉴定技术规程 1范围 本标准规定了梨黑星病(VenturianashicolaTanaka etYamamoto)抗性鉴定技术与评价方法。 本标准适用于梨资源黑星病（VenturianashicolaTanakaetYamamoto）抗性的田间和室内鉴定 评价。 2术语和定义 PUBLI 下列术语和定义适用才 丁本文件 2. 1 抗病性 disease resist 植物体所具有的能够减轻或 物致病作用的可遗传性 2. 2 抗病性鉴定 esistanct 通过适宜技术 法鉴定 2. 3 L 抗病性评价 根据采用的技 米标准 2. 4 致病性 ath ogenicit 病原物所！ 的破坏音 2. 5 病情级别 lise aseratingsca 人为定量植物 体或群 2. 6 U 病情指数 通过对植物个体发病程度（病情级别）数值的计算所获 值化描述形式。 2.7 接种体inoculum 用于接种寄主以引起寄主病害的病原物或病原物的一部分 2. 8 人工接种artificialinoculation 在适宜条件下，通过人工控制将接种体置于植物体适当部位并使之发病的过程。 3接种体制备 3.1 病原物采集 采集具有典型梨黑星病病斑的叶片，浸泡水中用干净毛刷将病斑上的分生孢子刷于水中，获得分离 物，并进行梨黑星病菌形态学鉴定（参见附录A）。 3.2接种体保存和繁殖 1 NY/T3345—2019 3.2.1病原物保存 采用低温冷冻保存，将采集的能产生足够分生孢子的病叶自然晾干后，于一20℃冰箱冷冻保存，用 于抗性鉴定或接种体的繁殖。 3.2.2接种体繁殖 当保存的梨黑星病病原物少或致病性弱时，需要提前在温室内种植的感病品种上进行繁殖；将从冷 冻保存叶片获得的孢子悬浮液喷雾接种于感病品种的叶片上，控制温室湿度80%以上，温度20℃～ 25℃范围内，待叶片上布满分生孢子即可用于采集病菌。 3.2.3接种悬浮液配置 接种前，将叶片上长出的新鲜分生孢子用干净毛刷刷到盛有无菌水的烧杯中，双层纱布过滤后，分 生孢子液稀释至5×105个/mL，用于接种。 4抗性鉴定 4.1田间抗性鉴定 4.1.1鉴定圃位置要求 选择梨黑星病自然发病环境适宜地区建立鉴定圃，圃区为平地或缓坡地，土壤肥沃，具备排灌条件， 周边设隔离区，无大型梨树生产园，防止病害传播干扰鉴定结果。 4.1.2鉴定圃田间配置 根据当地自然条件，选择适宜的砧木类型对梨资源进行嫁接；每份待鉴定材料保存3株以上；植株 株行距（2～3）mX（3～4）m，南北行向，树形保证树体通风透光；按标准生产园要求进行管理，鉴定前一 年对植株进行合理的修剪促发新梢，树龄保证基本一致。 4.1.3接种 植株定植后树体生长良好，且具有足够数量鉴定枝条时进行田间抗性鉴定，接种选择田间生长1个 月内没有病叶的新梢。接种采用喷雾接种法，田间接种最好在阴天或傍晚进行，把备好的分生孢子液喷 雾接种在待鉴定枝条叶片上至淋湿程度，宜套硫酸纸袋，每袋放2个湿棉球保湿，48h后撤袋，并标记枝 条，每份材料接20个新梢。接种前一周对鉴定圃进行田间灌溉，接种后至发病前多次进行，如遇持续干 旱需增加灌溉次数，保持土壤较高湿度；鉴定圃在接种前后不能喷施任何杀菌剂。 4.2室内抗性鉴定 4.2.1鉴定室条件要求 人工接种鉴定室应具备人工调节温度、湿度及光照的条件，使人工接种后具备良好的发病环境。根 据当地自然条件，选择适宜的砧木类型对梨资源进行嫁接，每份待鉴定材料保存5株以上；植株株行距 （40～50）cm×（80～100）cm，南北行向；按设施栽培要求进行管理，鉴定前一年对植株进行合理的修剪 促发新梢，树龄保证基本一致。 4.2.2室内接种 植株定植后第二年，具有足够数量鉴定枝条时进行室内抗性鉴定；枝条选择及喷雾接种方法见 4.1.3，无需套袋处理。 4.2.3接种前后鉴定室管理 接种前一周对鉴定室进行灌溉，接种后至发病前多次进行灌溉，并黑暗保湿48h（空气相对湿度为 100%，温度20℃），之后保持鉴定室空气相对湿度80%以上，温度控制在20℃～25℃。 4.3感病对照品种选择 鉴定所用感病对照品种采用鸭梨等高感品种。 5病情调查 5.1调查时间 2 NY/T3345—2019 病情调查于接种后30d～40d病情基本稳定后进行。 5.2调查方法 调查每份材料所有接种叶片发病情况，根据病害症状描述，记载叶片病情级别，计算出病情指数 (DI)。重复3次，计算平均值。 病情指数(DI)按式(1)计算。 Z(s×n) DI: ×100 ...(1) SXN 式中： DI 梨黑星病病情指数； 各病情级别数值与相对应的各病情级别叶数乘积的总和； s 各病情级别数值； n 各病情级别叶数； S 病情级别最高数值； N 调查的总叶数。 5.3病情分级 病情分级及其对应的症状描述见表1。 表1 梨黑星病病情级别划分 病情级别 症状描述 0 无病斑 1 病斑占叶面积的10%以下 3 病斑占叶面积的11%～25% 5 病斑占叶面积的26%～40% 7 病斑占叶面积的41%～65% 9 病斑占叶面积的65%以上 6抗性评价 6.1 鉴定有效性判别 当感病对照品种表现高感时（DI>65.0），该批次鉴定结果视为有效。 6.2 抗病评价标准 根据病情指数确定待鉴定材料对黑星病的抗性，划分标准见表2。 表2梨黑星病抗性划分标准 病情指数(DI) 抗性评价 DI<10.0 高抗(HR) 10.0≤D<25.0 抗病(R) 25.0≤D<40.0 中抗(MR) 40.0≤D<65.0 感病(S) DI≥65.0 高感(HS) 鉴定记载表格 梨黑星病鉴定原始记录及结果记载见附录B。 NY/T3345—2019 附录A （资料性附录） 梨黑星病病原菌及危害症状 A.1学名 梨黑星孢菌（VenturianashicolaTanaka Yamamoto) A.2田间症状 果面产生淡黄褐 喝色圆形小病班 件全适时 病斑王长满黑色 果实病部渐凹陷，木栓 化，坚硬并龟袭 脉和支脉间产生圆形或 不规则形状淡黄色小斑点，界限不明显，之 后形成黑霉 重时整 个叶片布满 色需层。 柄，果梗症状相似， 可致叶 片或 果实早落。 A.3形态描述 S S 有性 态 格孢菌 目（Pleosporales）黑星 菌科(Venturi riaceab黑 ot 无性为梨黑星孢 Fusiclasium pirinum (Lib. ) Fuckel]! yphomycetes丝孢（Moniliales黑星孢属（Fusicl 梨黑 包菌分生孢 子梗单生或丛生，倒棒形，暗褐色，产孢部位合轴式 延伸，顶端着 星 生分生孢子，孢 子脱落后有 月显的孢 程橡形核 、梨形，淡褐色，单胞，两端咯尖 基部平截（12～24） μmX(6~ 囊和子装孢 囊含有8个子囊 孢子。有1 性片 座电心组织瓦解 容纳子 囊的子囊腔，每个 子座形成 子装壳 囊 棍棒形，无色透明， (60~75)μn 形或 I形，（10～15）μm× (3.8~6.3)μm 说明： 假囊壳； 分生孢子座、分生孢子梗及分生孢子。 子囊及子囊孢子； 图A.1梨黑星病菌形态特征图 NY/T3345—2019 附录B （规范性附录） 梨黑星病抗性鉴定结果记载表 梨黑星病抗性鉴定结果记载表见表B.1 表 B. 1 梨黑星病抗性鉴定结果记载表 病情级别 编号 品种名称 来源 病情指数 抗性评价 0级 1级 3级 5级 7级 9级 1.鉴定地点 5.接种病原菌制备时间 2.品种定植日期 6.接种日期 3.病原物采集地 7.调查日期 4.病原菌保存方式 鉴定技术负责人(签字)： 5