ICS 67.080.20 B 31 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3292-2018 蔬菜中甲醛含量的测定 高效液相色谱法 Determination of formaldehyde in vegetables by high performance- Liquid chromatography 2018-07-27 发布 2018-12-01实施 中华人民共和国农业农村部‧发布 NY/T 3292—2018 前 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由农业农村部种植业管理司提出并归口。 本标准起草单位：山东省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所、中国农业科学院农业质量标 准与检测技术研究所。 本标准主要起草人：张树秋、钱永忠、邓立刚、郑床木、谷晓红、赵善仓、李增梅、苑学霞、聂燕、王 玉涛。 NY/T 3292—2018 蔬菜中甲醛含量的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了蔬菜中甲醛含量测定的高效液相色谱法。 本标准适用于蔬菜中甲醛含量的测定。 本方法定量限为2. 0 mg/kg。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 GB/T6682分析实验室月 用水规格和试验方法 3原理 三硝基苯肼反应生 硝基苯腺,用二 氯甲烷萃取、浓缩后 人高效 相色谱仪.355mm波长处测定，外 下标法定量 RAL 4 试剂和材料 方法所 用试剂均为优级纯。 水应符 级水 且使用前煮 除非另有说明， 中 沸30min后盖塞冷去 注：实验所涉及 的玻 璃器血均 享冲洗、 使用 CE 4.1 乙腈(CH;ON) 色谱纯 4.2 二氯甲烷(CH² 4.3邻苯二甲酸氢 2.04 并定容 000mL。 4.42,4-二硝基苯 4.52,4-二硝基苯肼溶液 睛溶解，并定容至 100 mL。 4.6 甲醛标准溶液（100μg/mL)：冷藏避光条件 下保有 4. 7 微孔滤膜：孔径0.22μm,有机 5仪器设备 5.1高效液相色谱仪：配紫外检测器或二极管阵列检测 5. 2 分析天平：感量±0.0001g和±0.01g。 5.3超声波清洗器。 5.4旋转蒸发仪。 5.5涡旋振荡器。 5. 6 聚四氟乙烯离心管：50mL。 5.7 恒温培养箱，（50士2）℃。 5. 8 组织捣碎机。 NY/T 3292—2018 6试样制备 蔬菜样品取可食部分，采用对角线分割法，取对角部分，将其切碎，充分混匀，用四分法取样或直接 放人组织捣碎机捣碎成匀浆。取200g匀浆放入聚乙烯瓶中于一20℃～一16℃条件下保存。称取试样 时，常温试样应搅拌均匀；冷冻试样应先解冻再混匀。 7分析步骤 7.1提取 称取约5g试样，精确至0.01g，置于50mL容量瓶中，加入40mL水，超声提取30min后取出，冷 却，加水至刻度，摇匀,用滤纸过滤,弃去初滤液，取续滤液备用。 7.2衍生 移取5mL滤液（7.1)置于50mL具塞离心管中，依次加人10mL邻苯二甲酸氢钾溶液（4.3）和 5mLDNPH衍生液（4.5），涡旋振荡混匀，50℃士5℃恒温培养箱反应60min，取出冷却至室温。 7.3萃取净化 将衍生反应液（7.2)转移至150mL分液漏斗中，加入20mL二氯甲烷，振荡萃取，静置分层后收集 下层有机相，再加入15mL二氯甲烷，重复提取2次，合并3次有机相于150mL圆底烧瓶中，40℃旋转 蒸发至约2mL，转移至5mL容量瓶中，用少量乙腈洗涤圆底烧瓶，合并到5mL容量瓶中并定容，混匀 后过微孔滤膜(4.7),滤液供HPLC测定。 注：萃取液在旋转蒸发浓缩时,不得全部蒸干。 7.4标准曲线的制备 分别移取 5μL、10 μL、25 μL、50 μL、100 μL 甲醛标准储备液(4. 6)(相当于 0. 5μg、1. 0 μg、2. 5 μg、 5.0μg、10.0μg)各置于50mL具塞离心管中，加人5mL水,其他步骤同7.2～7.3,得到甲醛的浓度分 别为0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L、2.0mg/L系列标准溶液。分别注人高效液相色谱仪 中，以测定相应的峰面积为纵坐标，以标准工作液浓度为横坐标绘制标准曲线。 8 测定 8.1色谱参考条件 a) 色谱柱：Ci8不锈钢柱(250mmX4.6mm，粒径5μm）,或相当者； b) 流动相：乙腈-水（50+50，V/V）； 流速:1.0 mL/min; d) 检测波长：355nm； e) 进样量：10μL; f) 柱温：40℃。 8.2色谱测定方法 将甲醛标准衍生溶液和样品待测液注人高效液相色谱仪中，以保留时间定性，外标峰面积法定量 甲醛衍生物的液相色谱图参见附录A。 8.3空白试验 除不加试料外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。 9结果计算 试样中甲醛的含量以质量分数w计,单位以毫克每千克(mg/kg)表示,按式(1)计算。 m X 1000 2 NY/T 3292—2018 式中： -样品中甲醛含量，单位为毫克每千克(mg/kg)； 根据标准曲线算出的样液中甲醛的含量,单位为微克每毫升(μg/mL)； V——试样加水提取后的定容体积,单位为毫升(mL); 试样的质量,单位为克(g)。 m- 注：计算结果需扣除空白值，测定结果取两次测定的算术平均值，计算结果保留至三位有效数字。 10 精密度 10.1重复性 在重复性条件下,获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于算术平均值的10%。 10. 2 2再现性 在再现性条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的15%。 3 NY/T 3292—2018 附录A (资料性附录) 甲醛衍生物的标准溶液色谱图 甲醛衍生物的标准溶液色谱图见图A.1。 AU 0.040 E U.BLI P 0.035 0.030 0.025 0.0 0.01 10.00 说明： 2 2- 一甲醛行 NY/T 3292-2018 中华人民共和国 农业行业标准 蔬菜中甲醛含量的测定 高效液相色谱法 NY/T 3292—2018 * * * 中国农业出版社出版 (北京市朝阳区麦子店街18号楼) （邮政编码：100125 网址： www.ccap.com. cn) 北京印刷一厂印刷 新华书店北京发行所发行 各地新华书店经销 * * * 开本 880mmX1230mm1/16 印张0.75 字数15千字 2018年11月第1版 2018年11月北京第1次印刷 书号：16109·4590 定价：18.00元 版权专有 侵权必究 NY/T 3292—2018 举报电话：（010）59194261