ICS 65.020 B 16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 2063.3-2014 天敌昆虫室内饲养方法准则 第3部分：丽蚜小蜂室内饲养方法 Guideline for laboratory culture method of nature enemy insects- Part 3 : Laboratory culture method for Encarsia formosa 2014-10-17发布 2015-01-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T 2063.3—2014 前 言 NY/T2063《天敌昆虫室内饲养方法准则》为系列标准： 第1部分：赤眼蜂室内饲养方法； 第2部分：平腹小蜂室内饲养方法； 第3部分：丽蚜小蜂室内饲养方法； 本部分是NY/T2063的第3部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本部分由农业部种植业管理司提出并归口。 本部分起草单位：农业部农药检定所、北京市农林科学院植物保护环境保护研究所。 本部分主要起草人：林荣华、张帆、郭晓军、杨峻、朱春雨、张佳、赵肖静。 NY/T 2063.3—2014 天敌昆虫室内饲养方法准则 第3部分：丽蚜小蜂室内饲养方法 1范围 本部分规定了采用烟粉虱（Bemisiatabaci）若虫和温室粉虱（Trialeurodesvaprorariorum）若虫室 内饲养丽蚜小蜂(Encarsiaformosa）的基本方法和要求。 本部分适用于以番茄植株上烟粉虱若虫和温室粉虱若虫为活体寄主繁殖丽蚜小蜂的室内饲养方 法。其他植物作为寄主植物时可参照执行。 2术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2. 1 种蜂breeder wasp 从自然界采集被丽蚜小蜂寄生的烟粉虱（褐蛹)或温室粉虱若虫（黑蛹），或人工复壮的优质丽蚜小 蜂,并经室内鉴定为所需蜂种。 2. 2 靶标 target 田间番茄、黄瓜等多种蔬菜植物上的烟粉虱或温室粉虱若虫。 2. 3 寄主植物hostplant 能繁殖寄主昆虫(粉虱)的植物。 2. 4 寄主昆虫host insect 能供丽蚜小蜂寄生繁殖的昆虫。 2. 5 黑blackpupa 在寄主昆虫（烟粉虱或温室粉虱)体内发育至蛹期(褐或黑色)的丽蚜小蜂。 2. 6 接蜂比 ratio of wasp to host 雌蜂与寄主若虫的比例。 2. 7 接蜂inoculation 将种蜂引接到寄主若虫上的饲养环节。 2. 8 产卵寄生 parasitization 种蜂引接到寄主若虫上后，雌蜂探测若虫，并用产卵管刺入产卵的环节。 2. 9 发育development 1 NY/T2063.3—2014 丽蚜小蜂在寄主若虫内寄生产卵后，经过幼虫（3个龄期）、蛹、成蜂羽化的发育全过程。 2. 10 卵 egg 乳白色半透明，初产卵为长卵圆形，一端较圆，一端稍尖。 2. 11 1龄幼虫1stinstarlarva 刚孵化出的1龄幼虫体色透明，虫体细长，头部钝圆，不断地扭动身体，非常活跃。身体末端有一条 清晰可见的小尾巴，有时可见蜕下的卵壳附着其上，体节不明显。 2. 12 2龄幼虫 2md instar larva 体节明显，身体共分13节，包括3个胸节和10个腹节。 2. 13 3龄幼虫3rdinstarlarva 身体弯曲，呈“C”型。初期身体透明，随着体内代谢废物的堆积身体先呈淡黄色，然后逐渐变为棕 褐色，并蠕动至寄主前端，在寄主的瓶型孔两侧留下25粒深棕色的粪便。排便是即将进人预蛹期的标 志。 2. 14 预蛹 prepupa 幼虫停止取食后即进人预蛹期。预蛹虫体前端较后端宽，形成了头胸宽而尾尖的蜂蛹体型，且头部 与胸部分界明显。不食不动，通体透明，胎粪已完全排出，堆积在身体两侧及后端。 2. 15 蛹 pupa 色，复眼为淡灰黄色，触角及胸足均黏附于蛹体腹面。头部与胸部的颜色逐渐加深，羽化前一天的蛹已 经具有成虫的全部特征：头部棕色，复眼和三个倒品字形排列的单眼为棕红色，胸部黑色，腹部为黄色 （雄性为棕黑色）。 2. 16 成虫adult 丽蚜小蜂成虫体长约1mm，具雌雄两性，雌成虫头部棕色至黑色，胸部黑色，腹部亮黄色，翅透明， 有金属光泽；雄成虫全身黑色，十分少见。 2. 17 羽化emergence 丽蚜小蜂从寄主若虫体内破壳出蜂的过程。 2. 18 寄生率parasitismrate 被丽蚜小蜂寄生若虫数占接蜂若虫总数的比例。 2. 19 羽化率 emergence rate 指有羽化孔的寄主若虫数占被寄生若虫数的比例。 2. 20 生殖力fecundity 在适宜条件下（一般为25℃、RH为60%～70%），以烟粉虱若虫为寄主时，新羽化雌蜂繁衍后代的 2 NY/T2063.3—2014 能力。 2.21 可育率 fertility rate 具有产卵能力的雌蜂个体数占供测雌蜂数的比例。 2. 22 成蜂寿命adultlongevityofwasp 成蜂从羽化到死亡的时间。 2.23 畸形蜂abnormal wasp 指外部形态发育不正常的成蜂，如无翅或翅不能展开等。 3仪器设备 3.1冷库:温度条件0℃~15℃,湿度条件RH为50%～60%。 3.2繁蜂室：每间面积15m²～20m²,每天光照14 h,室内温度(26士1)℃,RH为70%～80%。 3.3寄主昆虫繁殖室：温度（26±1)℃，RH为60%～~70%。 3.4繁蜂设备：繁蜂架、加湿器、加热器、双目解剖镜、恒温培养箱、紫外灯、温湿度记录仪、计数器、温度 计（水银或酒精）、培养皿、试管、玻璃瓶、制卡纸、黑布、脱脂棉、纱布等。 4试剂与材料 4.1酒精溶液(浓度75%和95%)。 4.2苯扎溴铵溶液（浓度1%）。 4.3次氯酸钠溶液(浓度0.1%)。 4.4敌敌畏。 4.5乳胶。 4.6寄主植物种子。 5繁殖方法 5.1蜂种采集、提纯和优选 5.1.1蜂种采集 蜂种采自寄生于粉虱若虫的丽蚜小蜂，要求在不同寄主植物和不同生态条件下广泛采集。 5.1.2蜂种提纯和优选 将采回的丽蚜小蜂置于温度（26士1)℃、RH为60%～70%的适宜条件下发育，羽化出蜂后，转接到 粉虱若虫体内，然后通过对寄生率、羽化出蜂率、繁殖力、贮存特性和对目标害虫的搜索能力等试验，选 择优势蜂种。 5.1.3蜂种贮存 优势蜂种确定后经过一代繁殖，当发育到预蛹期，置于（10士1)℃、RH为50%～60%的低温条件下 储藏。 5.2寄主若虫的生产 5.2.1寄主植物的栽培 在温室或网室内，按常规栽培方法，播种、移苗和定植番茄。番茄苗后35d（5片真叶期），将其单株 定植于25cm的花盆内。番茄苗后45d(7片～8片真叶期），可用于接种粉虱。 3 NY/T 2063.3—2014 5.2.2粉虱的接种 5.2.2.1粉虱虫源的准备 开始繁蜂前3周，将7片～8片真叶的清洁番茄苗放入温度（26土1）℃，RH为60%～70%的条件 下，每株接种粉虱成虫200头～300头，当子代粉虱成虫大量羽化时备用。 5.2.2.2粉虱的接种产卵 在温度（26士1)℃，RH为60%～70%的条件下，按1：4的比例接种粉虱24h～36h。 5.2.2.3粉虱发育 在温度（26士1)℃，RH为60%～70%的条件下，将接种粉虱后的番茄苗放人密闭容器中，用敌敌畏 若虫发育到2龄～3龄时，用于接种丽蚜小蜂 5.3丽蚜小蜂繁殖 5.3.1接种及产卵、发育 在温度（26士1)℃，RH为60%～70%的条件下，将培育的带有2龄～3龄粉虱若虫的番茄植株接 人丽蚜小蜂黑或成蜂，接蜂量按800头/株1000头/株，以每平方厘米叶片上有一头小蜂成虫为宜， 经10d～12d，当小蜂黑蛹开始出现时，即可移出。同时用敌敌畏熏杀滞留在叶片上的小蜂成虫。 5.3.2丽蚜小蜂和粉虱分离 将带黑蛹的番茄植株移入另外一间繁蜂室，停留2d～3d，使未被寄生的粉虱大量羽化。在分离室 放入3盆清洁苗，诱集粉虱成虫。 5.3.3制卡及包装 采摘黑叶片，并在室内晾置1d～2d，黏制叶片或纸质蜂卡。 5.4商品蜂贮存 5.4.1贮存虫态 蛹期。 5.4.2冷库内环境条件 温度（10土1)℃、RH为50%～60%，保证温、湿度稳定，不与有毒、有害物品混合存放。 5.4.3贮存管理 适时翻动贮存的蜂卡，防止霉变。一般贮存20d以内。 6产品质量检测 6.1寄生率检验 6.1.1样品提取 各批次生产的产品均需抽取样本，即从每批产品中以千分之一比例随机抽取蜂卡，并记录批次、接 蜂日期和抽样日期。采用清洁无毒、无异味、干燥的培养皿、试管、指形管或小型接蜂盒将同一抽样日期 和批次的样品收集在一起，混合均匀后随机选取100头，每20头为一个样品单位 6.1.2样品检测 将所选并标记好的样品，检查区分寄生与未被寄生粉虱，统计黑蛹数量计算寄生率。 6.2羽化出蜂率检测 6.2.1样品提取 各批次生产的产品均需抽取样本，即从每批产品中以千分之一比例随机抽取蜂卡，并记录批次、接 蜂日期和抽样日期。 6.2.2样品检测 4 NY/T 2063.3—2014 将样品放置在（26士1)℃、RH为60%～70%条件下，发育到羽化出蜂。样品羽化结束后2d～3d 逐头检测，检查并记录羽化孔数。计算羽化出蜂率。 6.3可育率和生殖力检测 6.3.1提取样品 各批次生产的产品均需抽取样本，即从每批产品中以千分之一比例随机抽取蜂卡，并记录批次、接 蜂日期和抽样日期。将样品放置在25℃、RH为60%～70%条件下，发育到羽化出蜂。随机抽取200 头蜂。 6.3.2接蜂寄生 单头引人指形管，并放人带有未被寄