中华人民共和国国家环境保护标准 HJ1055—2019 土壤和沉积物 草甘膦的测定 高效液相色谱法 Soil and sediment--Determination of glyphosate -High performance liquid chromatography 2019-10-24发布 2020-04-24实施 生 态 环 境 部 发布 HJ1055—2019 中华人民共和国生态环境部 公 告 口 2019年第43号 为贯彻《中华人民共和国环境保护法》和《中华人民共和国土壤污染防治法》，保护生态环境，保 障人体健康，规范生态环境监测工作，现批准《土壤石油类的测定红外分光光度法》等五项标准为 国家环境保护标准，并予发布。 标准名称、编号如下。 一、《土壤石油类的测定红外分光光度法》（HJ1051一2019）； 二、《土壤和沉积物11种三嗪类农药的测定高效液相色谱法》（HJ1052一2019)； 四、《土壤和沉积物 2019); 五、《土壤和沉积物草甘麟的测定高效液相色谱法》（HJ1055一2019）。 以上标准自2020年4月24日起实施，由中国环境出版集团有限公司出版，标准内容可在生态环境 部网站（http：//www.mee.gov.cn）查询。 特此公告。 生态环境部 2019年10月24日 HJ1055—2019 目 次 言 IV 适用范围 规范性引用文件 方法原理 4 试剂和材料 仪器和设备 6 分析步骤 8 结果计算与表示 9 精密度和准确度. 10质量保证和质量控制 废物处理 附录A（资料性附录） 方法的精密度和准确度. ili HJ1055—2019 前 言 为贯彻《中华人民共和国环境保护法》和《中华人民共和国土壤污染防治法》，保护生态环境，保 障人体健康，规范土壤和沉积物中草甘麟的测定方法，制定本标准。 本标准规定了测定土壤和沉积物中草甘麟的高效液相色谱法。 本标准为首次发布。 本标准由生态环境部生态环境监测司、法规与标准司组织制订。 本标准起草单位：生态环境部南京环境科学研究所。 本标准验证单位：江苏省环境监测中心、江苏省南京环境监测中心、江苏省常州环境监测中心、江 苏省镇江环境监测中心、呼伦贝尔市环境监测中心站、广西壮族自治区南宁生态环境监测中心。 本标准生态环境部2019年10月24日批准。 本标准自2020年4月24日起实施。 本标准由生态环境部解释。 iv HJ1055—2019 土壤和沉积物草甘麟的测定高效液相色谱法 警告：实验中所使用的溶剂及标准溶液均为有毒有害物质，溶液配制和试样的制备应在通风 橱内进行，操作时应按要求佩戴防护器具，避免接触皮肤和衣物。 1适用范围 本标准规定了测定土壤和沉积物中草甘麟的高效液相色谱法。 本标准适用于土壤和沉积物中草甘麟的测定。 当取样量为10g（干重）时，本方法检出限为0.02mg/kg，测定下限为0.08mg/kg。 2规范性引用文件 本标准引用了下列文件或其中的条款。凡是未注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB17378.3海洋监测规范第3部分：样品采集、贮存和运输 GB17378.5 海洋监测规范第5部分：沉积物分析 HJ494水质采样技术指导 HJ495 水质采样方案设计技术规定 HJ613 土壤干物质和水分的测定重量法 HJ/T91 地表水和污水监测技术规范 HJ/T166土壤环境监测技术规范 3方法原理 土壤和沉积物中的草甘麟（Glyphosate）用磷酸钠和柠檬酸钠混合水溶液提取，提取液在弱碱性条 件下经正已烷萃取净化，水相用9-甲基氯甲酸酯（FMOC-C1）衍生化后，用具荧光检测器的高效液 相色谱仪分离检测草甘麟的衍生物（Glyphosate-FMOC)，以保留时间定性，外标法定量。 4试剂和材料 除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为新鲜制备的蒸馏水或不含目 标化合物的纯水。 4.1乙腈（CHsCN)：液相色谱纯。 4.2正已烷（CH14）。 4.3 盐酸（HCI)：p（HCI）=1.19g/ml。 4.4 盐酸溶液：1+1。 盐酸（4.3）和水按1：1的体积比混合。 4.5磷酸（H3PO4)：Φ（H3PO4）=85.0%。 4.6磷酸溶液：Φ（H3PO4）=0.2%。 1 HJ1055—2019 准确量取2.35ml磷酸（4.5）于1L容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，临用现配。 4.7十二水合磷酸钠（NasPO4-12H2O）。 4.8二水合柠檬酸钠（Na3C6HO72H2O）。 4.9磷酸钠和柠檬酸钠混合提取液：c（NasPO4.12H2O）=0.03mol/L，c（NaCeHsO72H2O）=0.01mol/L。 准确称取11.40g（精确到0.01g）十二水合磷酸钠（4.7）和2.94g（精确到0.01g）二水合柠檬酸 三钠（4.8），用水溶解并定容至1L容量瓶中。 4.10十水合四硼酸钠（Na2B4O>10H2O）。 4.11四硼酸钠溶液：c（Na2B4O710H2O）=0.05mol/L。 准确称取1.91g（精确到0.01g）十水合四硼酸钠（4.10），用水溶解并定容至100ml容量瓶中。 4.129-苏甲基氯甲酸酯（CisHnCIO2，FMOC-CI)：纯度不低于99%，4℃以下冷藏、避光保存。 4.139-苏甲基氯甲酸酯溶液：P（CisHiC1O2）=1.0mg/ml。 准确称取50.0mg（精确到0.1mg）9-甲基氯甲酸酯（4.12），用乙腈（4.1）溶解并定容至50ml 容量瓶，摇匀，转移至密实瓶中于4℃以下冷藏、避光保存。 4.14草甘膦标准贮备液：p（C3HgNOsP）=100mg/L。 可直接使用市售有证标准溶液，也可用标准物质配制。准确称取10.0mg（精确到0.1mg）草甘膦 标准物质，用水溶解并定容至100ml容量瓶，摇匀，转移至密实瓶中于4℃以下冷藏保存，保存时间 为2个月。 4.15草甘麟标准使用液：p（C3HgNOsP）=10.0mg/L。 移取1.0ml草甘麟标准贮备液（4.14）于10ml容量瓶中，用水稀释并定容至刻度，摇匀，转移至 密实瓶中于4℃下冷藏保存，保存期为2个月。 4.16石英砂：粒径0.3~0.7mm（50~25目）。 4.17针式过滤器：0.22um，滤膜材质为聚四氟乙烯或其他等效材质。 4.18滤纸：中速滤纸，棉质纤维材质。 5仪器和设备 5.1液相色谱仪：具有梯度洗脱功能，柱温箱温度可控，配备荧光检测器， 5.2色谱柱：填料为十八烷基硅烷键合硅胶，粒径5um，柱长250mm，内径4.6mm的色谱柱或其他 等效色谱柱。 5.3离心管：聚丙烯（PP）材质，50ml。 5.4超声波清洗器：超声功率500～700W。 5.5高速离心机：转速范围8000~12000r/min。 5.6分析天平：感量为0.1mg。 5.7 混匀仪。 5.8 一般实验室常用仪器和设备。 6样品 6.1样品采集和保存 按照HJ/T166的相关要求采集和保存土壤样品，按照GB17378.3、GB17378.5、HJ494、HJ495 及HJ/T91的要求采集和保存沉积物样品。 样品于4℃以下密封、避光、冷藏运输和保存。土壤样品应在7d内完成前处理，沉积物样品应在 2 HJ1055—2019 3d内完成前处理。 6.2样品的制备 土壤样品：称取两份新鲜样品，一份样品用于测定干物质含量，另一份样品（干物质含量应大于 10g）用于目标物草甘膦的测定。 沉积物样品：用高速离心机（5.5）离心10min去除间隙水后，再称取两份新鲜样品，一份样品用 于测定含水率，另一份样品（干物质含量应大于10g）用于目标物草甘麟的测定。 6.3水分的测定 土壤样品干物质含量按照HJ613进行测定，沉积物样品含水率按照GB17378.5进行测定。 6.4试样的制备 6.4.1提取 将样品（6.2）全部转移至50ml离心管中，加入50.0ml磷酸钠和柠檬酸钠混合提取液（4.9），超 声提取30min，用高速离心机（5.5）离心5min，取上清液用滤纸（4.18）过滤，待净化。 6.4.2净化 提取液（6.4.1）先用盐酸溶液（4.4）调节pH至9，静置10min后用滤纸（4.18）过滤，加入50ml 正已烷（4.2），充分振荡后静置，弃去有机相，水相用50ml正已烷（4.2）再萃取一次。 6.4.3衍生化 取1.00ml净化后的水溶液（6.4.2）于1.5ml聚乙烯塑料管中，加入0.12ml四硼酸钠溶液（4.11） 和0.2ml9-苏甲基氯甲酸酯溶液（4.13），在常温下用混匀仪（5.7）衍生4h，用针式过滤器（4.17）过 滤后待测。 6.5空白试样的制备 用石英砂（4.16）代替样品，按照与试样的制备（6.4）相同的步骤进行空白试样的制备。 7分析步骤 7.1测量参考条件 流动相A：乙睛；流动相B：磷酸溶液（4.6），梯度洗脱程序见表1 流速：1.0ml/min。 柱温：35℃。 进样量：20μl。 激发波长：254nm；发射波长：301nm。 表 1 梯度洗脱程序 时间/min 流动相A/% 流动相B/% 0 35 65 10 25 75 15 80 20 20 35 65 3