ICS 13.310 A 92 中 华人民 共和国 公共安 全行业 标准 GA GA/T × × × × －× × × × 法庭科学 生物检材中甲氰菊酯等五种拟 除虫菊酯类农药检验 气相色谱 -质谱法 Forensic sciences —Examination methods for five pyrethroid pesticides including fenpropathrin in biological samples —GC-MS ×××× -×× -××发布 ×××× -×× -××实施 中华人民共和国 公安部 发布 代替 GA/T 103 －1995 GA/T × × × × —× × × × I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1 -2009给出的规则起草。 本标准代替 GA/T 103 -1995《中毒检材中拟除虫菊酯类农药的定性定量分析方法》 ，与GA/T 103-1995相比，除编辑性修改外主要技术变化如下 : —修改了标准名称 （见封面， 1995年版的封面） ； —删除了气相色谱检验法（见 1995年版第一篇 和第二篇 ）； —删除了薄层色谱检验方法（见 1995年版第三篇）； —修改了试剂和材料 有关内容（见 第5章， 1995年版的第 5章）； —修改了仪器和设备有关内容（见第 6章， 1995年版的第 6章）； —增加了凝胶渗透色谱浓缩联用仪方法（见 7.1.2.1.1）； —增加了气相色谱 -质谱检验方法（见 7.1.2.1.2）。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会（ SAC/TC 179/SC 1 ）提出并归口。 本标准起草单位：公安部物证鉴定中心 、山西医科大学。 本标准主要起草人：栾玉静、 魏春明、 王瑞花、 王爱华、 任昕昕、董颖、王芳琳、 董林沛、宋歌、 张蕾萍、贠克明。GA/T × × × × —× × × × 1 法庭科学 生物检材中甲氰菊酯等 五种拟除虫菊酯类 农药检验 气相色谱 -质谱法 1 范围 本标准规定了 法庭科学 生物检材（血、尿、肝、肾、胃及胃内容等） 中甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、 氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯 的气相色谱 -质谱（ GC-MS）的定性定量 检验方法。 本标准适用于 法庭科学 生物检材中甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯 的 定性分析和定量分析。 其他可疑样品中 甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯 的 定性分析和定量分析可参照使用。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅 注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GA/T 122 毒物分析名词术语 3 术语和定义 GA/T 122 界定的术语和定义适用于本文件。 4 原理 以空白样品和添加样品作对照，按平行操作的要求，对生物样品进行提 取、净化及浓缩， 采用气相 色谱 -质谱法进行定性定量 。以保留时间、质谱特征离子碎片峰和相对丰度 比作为定性判断依据； 以峰 面积为依据，用外标法进行定量分析。 5 试剂和材料 5.1 试剂 实验用水应符合 GB/T 6682 中规定的三级水。 除非另有说明，在分析中使用的试剂均为分析纯， 试剂包括： a) 乙酸乙酯（色谱纯） ； b) 环己烷（色谱纯） ； c) 二氯甲烷； d) 甲醇； e) 标准溶液： 1) 1.0mg/mL 标准物质溶液：根据标准物质的纯度，各称取适量，分别用甲醇配制 1.0mg/mL 甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯 标准物质溶液，置于冰箱中 冷藏保存。有效期 6个月。或采用市售标准溶液 ； 2) 0.1mg/mL单一标准工作 溶液：移取 1.0mg/mL 的甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、GA/T × × × × —× × × × 2 氰戊菊酯和溴氰菊酯 标准物质溶液 各1mL，分别用甲醇稀释并定容至 10mL，混匀，配制 成浓度为 0.1mg/mL的单一标准工作 溶液，密封，置 于冰箱中冷 藏保存。有效期 3个月。 实验中所用其 他浓度的单一标准工作溶液均由 0.1mg/mL标准物质 溶液用甲醇稀释得到 ； 3) 0.1mg/mL 混合标准工作溶液：移取 1.0mg/mL 的甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、 氰戊菊酯和溴氰菊酯 标准物质溶液各 1.0mL，用甲醇定容至 10mL，混匀，密封，置于冰 箱中冷藏保存 。有效期 3个月。实验中所用其他浓度的混合标准工作溶液均由 0.1mg/mL 标准物质溶液用甲醇稀释得到 。 注：特殊情况下可使用对照溶液代替标准溶液。 5.2 材料 材料包括： a) 具盖离心管 ； b) 玻璃试管 。 6 仪器和设备 仪器和设备包括： a) 气相色谱 -质谱仪： 配有电子轰击源 （EI）或负化学源 （NCI）； b) 凝胶渗透色谱净化浓缩联用仪； c) 电子天平； d) 离心机； e) 振荡器； f) 移液器； g) 浓缩器； h) 匀浆机。 7 操作方法 7.1 定性分析 7.1.1 样品提取 7.1.1.1 液液萃取 移取血液等液体检材样品 1.0mL～2.0mL， 或称取铰碎（或匀浆） 的肝脏等固体检材样品 1.0g～2.0g 于具盖离心管中 ，加入乙酸乙酯 或二氯甲 烷5.0mL~10.0mL ，振荡 5min，8000r/min 离心 10min，分离 有机相；重复提取一次，合并两次提取的有机相 于玻璃试管中 ，置于浓缩器上 45℃浓缩至干， 残留物 用甲醇 100L溶解，作为检材样品提取液供 仪器分析。如需净化，按 7.1.1.2操作。 7.1.1.2 样品净化 取7.1.1.1中两次提取后 合并的有机相， 用凝胶渗透色谱仪 按7.1.2.1.1 条件净化 ，浓缩至 1mL，再 置于浓缩器上 45℃浓缩至干， 残留物用甲醇 100L溶解，作为检材样品提取液供 仪器分析。 7.1.1.3 质控样品制 备 取等量相似基质的空白样品（若无相似基质空白样品可用血液替代）两份于具盖离心管中，一份作 为空白样品，一份添加 甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯 标准物质，作为添GA/T × × × × —× × × × 3 加样品（添加样品的浓度为 1.0μg/mL（g）），与检材样品平行操作，得到空白样品提取液和添加样品 提取液供仪器分析 。 7.1.2 仪器检测 7.1.2.1 仪器条件 7.1.2.1.1 凝胶色谱净化浓缩联用仪条件 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品 等实际情况进行调整 ： a) 净化柱： 20mm× 300mm ，填料为50.0 g中性多孔的交联苯乙烯二乙烯基苯聚合物 或类似物； b) 流动相：环己烷 /乙酸乙酯 （体积比 1:1 ）混合溶剂 ； c) 流速： 4.7 mL/min ； d) 收集时间： 收集 480s～840s的洗脱液； e) 在线浓缩温度和真空度： 1区： 42℃，30.0 kPa；2 区：51℃，24.0 kPa；3 区：52℃，22.0 kPa。 7.1.2.1.2 气相色谱 -质谱条件 以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整： a) 色谱柱： DB-5MS柱（ 30m× 0.25mm× 0.25µ m ）或等效色谱柱 ； 注： DB-5MS柱是Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产品 的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 b) 色谱柱温程： 80℃保持 2min，以 30℃/min速率升温至 280℃，保持 15min； c) 进样口温度： 280℃； d) 传输线温度： 230℃； e) 载气：氦气； f) 进样方式：分流进样，分流比 10∶1； g) 离子源温度： 200℃； h) 倍增器电压：自动调谐值； i) 柱流量： 1mL/min ； j) 质量扫描范围： 40amu~450amu ； k) 扫描方式：全扫描（ Scan）； l) 目标物质谱特征 离子碎片 峰见表 1。 表1 检测目标物 质谱特征离子碎片峰 名称 质谱特征 离子碎片 峰（ EI源） 质谱特征 离子碎片 峰（ NCI源） 甲氰菊酯 m/z 97 *、m/z 181、m/z 265、m/z 349 m/z 141 * 高效氯氟氰菊酯 m/z 181 *、m/z 197、m/z 208、m/z 449 m/z 205 *、m/z 241 氯氰菊酯 m/z 163 *、m/z 181、m/z 209 m/z 207 *、m/z 171 氰戊菊酯 m/z 125 *、m/z 167、m/z 225、m/z 419 m/z 211* 溴氰菊酯 m/z 253 *、m/z 181、m/z 208 m/z 79 *、m/z137、m/z 297 注：*为定量离