(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111436320.8 (22)申请日 2021.11.29 (71)申请人 同济大学 地址 200092 上海市杨 浦区四平路1239号 (72)发明人 袁伟忠　王春堯　 (74)专利代理 机构 上海科律专利代理事务所 (特殊普通 合伙) 31290 代理人 叶凤 (51)Int.Cl. A61K 41/00(2020.01) A61K 31/704(2006.01) A61K 33/26(2006.01) A61K 33/32(2006.01) A61K 33/30(2006.01) A61K 9/06(2006.01)A61K 9/00(2006.01) A61K 47/36(2006.01) A61K 47/10(2006.01) A61K 47/02(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61K 49/00(2006.01) A61K 49/08(2006.01) A61K 49/18(2006.01) B82Y 5/00(2011.01) B82Y 30/00(2011.01) B82Y 40/00(2011.01) C08G 81/00(2006.01) C01G 49/00(2006.01) (54)发明名称 包载介孔纳米微球的可注射性自愈合水凝 胶及其制备方法及应用 (57)摘要 本发明属于纳米材料， 高分子材料， 复合材 料， 生物医学工程领域。 提出了一种具有荧光显 示的核壳结构的磁性纳米粒子的制备方法， 其特 征在于， 如下所示步骤： 首先， 通过热解法制备了 锰锌铁氧体纳米粒子(Mn0.6Zn0.4Fe2O4,MNP)； 随 后， 正硅酸四乙酯(TEOS)在十 六烷基三甲基溴化 铵(CTAB)表面活性剂模板存在的条件下水解缩 合成介孔二氧化硅， 从而MNP被介孔二氧化硅包 覆形成介孔纳米粒子(MSN)； 最后， 通过荧光染料 RBITC修饰介孔纳米粒子得到荧光核壳结构磁性 纳米粒子(MSN ‑RBITC)。 本发明所述合成方法简 单易行， 原料均可工业化生产， 具有很好的推广 应用价值。 易获取。 权利要求书2页 说明书6页 附图3页 CN 114177286 A 2022.03.15 CN 114177286 A 1.一种具有荧光显示的核壳结构的磁性纳米粒子的制备方法， 其特征在于， 如下所示 步骤： 首先， 通过热解法制备了锰锌铁氧体纳米粒子(Mn0.6Zn0.4Fe2O4,MNP)； 随后， 正硅酸四乙酯(TEOS)在十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)表面活性剂模板存在的条 件下水解缩合成介孔 二氧化硅， 从而MNP被介孔 二氧化硅包覆形成介孔纳米粒子(MSN)； 最后， 通过荧光染料RBITC修饰介孔纳米粒子得到荧光核壳结构磁性纳米粒子(MSN ‑ RBITC)。 2.如权利要求1所述的一种具有荧光显示的核壳结构的磁性纳米粒子的制备方法， 其 特征在于， 具体步骤如下： (1)将乙酰丙酮铁、 乙酰丙酮锰、 乙酰丙酮锌、 1,2 ‑十六烷二醇、 油酸和油胺按照摩尔比 为10:3:2:50:30:30溶于溶剂A中， 体系冷冻 ‑抽真空‑充氩气‑冷冻三个回合后， 沙浴加热并 冷凝回流； 停止反应将产物溶解在溶剂B中， 用无水乙醇沉淀离心三次， 最终得到深棕色的 锰锌铁氧体 磁性纳米粒子 MNP， 将产物保存于4℃的无 水环境中； (2)将(1)中所得产物分散于氯仿中， 加入十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)水溶液后超声 10min， 得到MNP ‑CTAB溶液； 将CTAB溶解在 去离子水中， 并加以氢氧化钠溶液调节pH值至12； 整个体系加热至70℃后， 在强力搅拌下逐滴滴加MNP ‑CTAB溶液； 将正硅酸乙酯(TEOS)溶解 于乙酸乙酯后加入上述溶液中， 反应2h； 反应结束后， 将3 ‑氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)加 入上述溶液中再反应2h； 将反应产 物重新分散于丙酮中， 在60℃下回流冷凝3h， 最 终提纯得 到产物MSN； (3)将异硫氰酸酯罗丹明(RBITC)和APTES溶解于乙醇中在无光环境下反应24h制 得母 液； 按照步骤(2)进行反应， 与正硅酸乙酯(TEOS)反应2h后， 在反应体系中加入母液继续反 应2h； 将产物分散 于丙酮中后在6 0℃下回流冷凝 3h， 得到提纯最终产物MSN ‑RBITC。 3.根据权利要求2中所述的合成具有荧光显示的核壳结构的磁性纳米粒子的制备方 法， 其特征是溶剂A是二 苄醚。 4.根据权利要求2中所述的合成具有荧光显示的核壳结构的磁性纳米粒子的制备方 法， 其特征是溶剂B是环己烷或正已烷中的一种或两种。 5.一种用于合成包载药物与权利要求1制备的纳米粒子的自愈合水凝胶的改性天然高 分子， 其特 征在于， 合成步骤如下 所示： 6.如权利要求5所述的用于合成包载药物与纳米粒子的自愈合水凝胶的改性天然高分 子， 其特征在于具体步骤如下： (1)将普鲁兰多糖溶解在N,N ‑二甲基甲酰胺中， 将对醛基苯甲酸、 甲基纤维素中的羟权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114177286 A 2基、 二环己基碳二亚胺(DCC)和4 ‑二甲氨基吡啶(DMAP)按照摩尔比为1: 10:1.2～1.5:0.05 ～0.1溶于N,N ‑二甲基甲酰胺 中； 体系冷冻 ‑抽真空‑充氩气‑冷冻三个回合后， 常温下磁力 搅拌下反应12～24h； 在 冰冻的正己烷中沉淀后， 重新溶解于N,N ‑二甲基甲酰胺中， 透析2～ 5d并冷冻干燥至恒重， 得到白色固体PUL L‑CHO； (2)将甲基聚乙二醇(mPEG)、 琥珀酸酐、 三乙胺、 DMAP以摩尔比为1:1.5～2： 1:1溶解在 1,4‑二氧六环中， 常温下剧烈搅拌反应12～36h； 反应结束后将溶剂正已烷旋转蒸干， 将残 余物在二氯甲烷中溶解， 在正已烷中沉淀， 过 滤得到白色固体粉末mPEG ‑COOH； (3)将壳聚糖(CT)溶解在1.0w/v％的醋酸中， 将(2)中产物加入至溶液中， 将EDC和NHS 溶解于去离子水中， 逐滴滴入； 室温反应4～8h； 反应结束后用0.5mol/L的NaOH溶液将pH调 整为7， 透析并冻干得到白色固体mPEG ‑g‑chitosan。 7.一种包载药物与权利要求1制备纳米粒子的复合水凝胶体系， 其特征在于， 具体步骤 如下： 将PULL ‑CHO配成8wt％的PBS溶液， 将mPEG ‑g‑chitosan配成3wt％的PBS溶液， 并在其 中一种溶液中混入适量的阿霉素(DOX)与磁性纳米粒子(MSN ‑RBITC)， 将 两种溶液按照体积 比为1:1混合， 5mi n内实现溶 液至凝胶的转变， 得到复合水凝胶体系。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114177286 A 3