(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111528361.X (22)申请日 2021.12.14 (71)申请人 上海交通大 学 地址 200240 上海市闵行区东川路80 0号 (72)发明人 沈琦　马思语　杨捷　 (74)专利代理 机构 上海科盛知识产权代理有限 公司 312 25 代理人 蒋亮珠 (51)Int.Cl. A61K 9/51(2006.01) A61K 31/505(2006.01) A61K 33/34(2006.01) A61K 47/64(2017.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 具有抗肿瘤效果的负载他汀类药物的丝素 蛋白纳米粒及其制备和应用 (57)摘要 本发明涉及一种具有抗肿瘤效果的负载他 汀类药物的丝素蛋白纳米粒及其制备和应用， 将 硫酸铜溶液和丝素蛋白溶液混合， 以制备铜 ‑丝 素蛋白纳米粒； 将铜 ‑丝素蛋白纳米粒和他汀类 药物溶液混合将反应产物离心， 分离得到沉淀产 物； 所述铜 ‑丝素蛋白纳米粒和药物的质量比为 10～30:1； 所述药物为瑞舒伐他汀； 所述反应产 物离心的温度为4～10℃； 反应产物离心的时间 为5～20min； 反应产物离心的转速为10000～ 12000rpm； 将所述沉淀产物重分散， 多次离心洗 涤分离后再加水超声重分散， 得到载药丝素蛋白 纳米粒。 与现有 技术相比， 本发明Cu ‑SF(RSV)NPs 可以促进有效的铁死亡， 有效地阻碍了TNBC的转 移。 权利要求书1页 说明书8页 附图3页 CN 114224867 A 2022.03.25 CN 114224867 A 1.一种具有抗肿瘤效果的负载他汀类药物的丝素蛋白纳米粒， 其特征在于， 包括质量 比为5:1～5的铜 ‑丝素蛋白纳米粒和他汀类药物。 2.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤效果的负载他汀类药物的丝素蛋白纳米粒， 其特征在于， 所述的他汀类药物为瑞舒伐他汀。 3.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤效果的负载他汀类药物的丝素蛋白纳米粒， 其特征在于， 所述的负载他汀类药物的丝素蛋白纳米粒平均粒径＜20 0nm， 且粒径均一。 4.一种如权利要求1 ‑3中任一所述的具有抗肿瘤效果的负载他汀类药物的丝素蛋白纳 米粒的制备 方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： S01、 将硫酸铜溶 液和丝素蛋白溶 液混合， 制备铜 ‑丝素蛋白纳米粒 溶液； S02、 将铜 ‑丝素蛋白纳米粒溶液缓慢滴入他汀类药物溶液， 于10～30℃， 混合搅拌10～ 30分钟， 涡旋后超声处理， 并在通风设备中进一步搅拌2小时， 将反应产 物离心， 分离得到沉 淀产物； S03、 将所述沉淀产物重分散， 多次离心洗涤分离后再加水超声重分散， 得到载药丝素 蛋白纳米粒。 5.根据权利要求4所述的具有抗肿瘤效果的负载他汀类药物的丝素蛋白纳米粒的制备 方法， 其特征在于， 步骤S01中所述的硫酸铜溶液为将五水合硫酸铜 溶解在超纯水中， 在20 ～25℃下静置4～6 h， 得到质量浓度为0.01～0.1g/ml的硫酸铜溶 液。 6.根据权利要求4所述的具有抗肿瘤效果的负载他汀类药物的丝素蛋白纳米粒的制备 方法， 其特征在于， 所述的丝素蛋白溶液为将 丝素蛋白溶解在 超纯水中， 在4～10℃下静置4 ～6h， 得到质量浓度为0.01～0.1g/ml的丝素蛋白溶 液。 7.根据权利要求4所述的具有抗肿瘤效果的负载他汀类药物的丝素蛋白纳米粒的制备 方法， 其特 征在于， 所述的铜 ‑丝素蛋白纳米粒中铜与丝素蛋白的质量比为5:1～5 。 8.根据权利要求4所述的具有抗肿瘤效果的负载他汀类药物的丝素蛋白纳米粒的制备 方法， 其特征在于， 步骤S02中所述的他汀类药物溶液是将瑞舒伐他汀溶解在有机溶剂中， 在20～25℃下静置4～6 h， 得到质量浓度为0.1～1mg/ml的瑞舒伐他汀有机溶 液； 所述有机溶剂为丙酮。 9.根据权利要求4所述的具有抗肿瘤效果的负载他汀类药物的丝素蛋白纳米粒的制备 方法， 其特征在于， 步骤S02和步骤S03中离心速度为10000～13000g， 离心时间为15～30分 钟， 超声处 理功率为50～200W。 10.一种如权利要求1 ‑3中任一所述的具有抗肿瘤效果的负载他汀类药物的丝素蛋白 纳米粒的应用， 其特 征在于， 将所述负载他汀类药物的丝素蛋白纳米粒作为 抗肿瘤药物。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114224867 A 2具有抗肿瘤效果 的负载他汀类药物的丝素蛋白纳米粒 及其制 备和应用 技术领域 [0001]本发明属于纳 米药物技术领域， 涉及一种具有抗肿瘤效果的负 载他汀类药物的蛋 白纳米粒及其制备。 背景技术 [0002]乳腺癌是一种普遍的恶性肿瘤， 其中三阴性乳腺癌(TNBC)约占乳腺癌的四分之 一。 大多数报道的TNBC抗肿瘤药物的作用原理是诱导细胞凋亡进行抗癌治疗。 但由于侵袭 性TNBC具有表型多样性、 化疗耐药性和早期转移的特点， 常用化疗药物的效果有限。 铁死亡 是一种独特的非细胞凋亡类型， 已经有多项研究证明铁死亡可以不通过细胞凋亡的途径抑 制乳腺癌。 近年来， 发现了CoQ/FSP1轴， 它 与经典的GSH/GPX4通路平行起作用调控铁死亡的 进城。 铁死亡抑制蛋1(FSP1)是一种氧化还原酶， 它的主要底物泛醌(CoQ)是通过甲羟戊酸 途径产生的， FSP1可以在质膜上将CoQ还原为泛醇(CoQH2)。 CoQH2可以充当抗氧化剂的角色 以阻止铁死亡的发生。 [0003]他汀类药物是临床上广泛用于血脂异常和心血管疾病的药物， 可以干扰代谢并阻 断限速酶羟甲基戊二酰辅酶A(HMG ‑CoA)还原酶， 降低甲羟戊酸途径CoQ水平。 阿托伐他汀是 他汀类药物的一种， 主要用于治疗高胆固醇血症和冠心病， 反应机理是通过竞争性抑制 HMG‑CoA还原酶， 降低低密度脂蛋白(LD L)和甘油三酯的水平。 FSP1表达和CoQH2水平一起降 低， 导致对铁死亡抵抗效果的逆转。 除了抗铁死亡外， 高度恶性和转移潜力限制了TNBC治疗 的疗效。 据报道有超过90％的TNBC患者死于由癌细胞从原发肿瘤扩散到远处器官形成的肿 瘤转移。 他汀类药物 通过下调一种促进转移的基质金属蛋白酶9(MMP9)来抑制肿瘤转移。 因 此， 他汀类药物作为FDA批准的药物可能是TNBC的潜在治疗方法， 因为它能够降低FSP1 ‑介 导的铁死 亡抵抗和M MP9介导的肿瘤转移。 [0004]与亲脂性他汀类药物相比， 亲水性他汀类药物(例如瑞舒伐他汀类药物)的膜渗透 性较弱， 体内清除速度快， 影响了该类药物作为 抗肿瘤药物的应用。 发明内容 [0005]本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种能够协同促进 癌细胞铁死 亡、 具有抗肿瘤效果的负载他汀类药物的丝素蛋白纳米粒及其制备。 [0006]本发明的目的可以通过以下技术方案来实现： 一种具有抗肿瘤效果的负 载他汀类 药物的丝素蛋白纳米粒， 包括质量比为5:1～5的铜 ‑丝素蛋白纳米粒和他汀类药物。 [0007]进一步地， 所述的他汀类药物为瑞舒伐他汀。 [0008]瑞舒伐他汀的化学 结构式如下 所示：说　明　书 1/8 页 3 CN 114224867 A 3