(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202110919075.X (22)申请日 2021.08.1 1 (71)申请人 卡瑞济 （北京） 生命科技有限公司 地址 100085 北京市海淀区上地信息路26 号01层01 12-141 (72)发明人 钟晓松　安志静　白玥　胡毅　 (74)专利代理 机构 北京市中咨律师事务所 11247 代理人 黄革生 (51)Int.Cl. C07K 19/00(2006.01) C12N 15/62(2006.01) C12N 15/867(2006.01) C12N 5/10(2006.01) A61K 39/00(2006.01)A61K 45/06(2006.01) A61P 35/00(2006.01) G01N 33/68(2006.01) (54)发明名称 EphA2嵌合抗原受体以及其用途 (57)摘要 本发明涉及特异性结合EPHA2的新型嵌合抗 原受体以及其用途。 权利要求书2页 说明书28页 附图15页 CN 113980138 A 2022.01.28 CN 113980138 A 1.分离的嵌合抗原 受体， 所述的嵌合抗原受体包含顺序连接的： 胞外结合 区， 跨膜区和 包含共刺激结构域的胞内信号区， 其中所述胞外结合区特异性结合EPHA2， 且包含HCDR1、 HCDR2、 HCDR3、 LCDR1、 LCDR2和LCDR3； 并且所述HCDR1、 HCDR2、 HCDR3、 LCDR1、 LCDR2和LCDR3分 别具有SEQ  ID NO:1、 2、 3、 9、 10和11所示的序列， 或分别具有SEQ  ID NO:4、 5、 6、 12、 13和14 所述的序列。 2.权利要求1的嵌合 抗原受体， 其中所述胞外结合区： a)包含如以下所示的VH和VL， 所述VH和VL分别包含以下氨基酸序列或由以下氨基酸序 列组成： SEQ ID NO:7和15； 或 SEQ ID NO:8和16； 或者 b)包含选自SEQ  ID NO:17‑20任一项所示的氨基酸序列或与所述序列具有至少90％、 91％、 92％、 93％、 94％、 95％、 96％、 97％、 98％或99％同一性的氨基酸序列或由所述氨基酸 序列组成。 3.如权利要求1或2所述的嵌合抗原受体， 其中所述的跨膜区是包含CD28的跨膜区， 以 及任选的所述跨膜区经由铰链连接至胞外结合区， 优选的， 铰链区包含SEQ  ID NO:21的氨 基酸序列或由其组成； 所述的胞内信号区包含CD3ζ的信号传导结构域(例如包含SEQ  ID  NO:26所示的序列或与之具有至少90％、 91％、 92％、 93％、 94％、 95％、 96％、 97％、 98％或 99％的同一性的氨基酸序列或由其组成)和共刺激结构域， 优选地， 所述共刺激结构域是从 4‑1BB(CD137)蛋白得到的功能性信号传导结构域， 其中所述共刺激传导结构域在CD3ζ 的信 号传导结构域之前。 4.编码权利要求1 ‑3任一所述的嵌合 抗原受体的核酸。 5.一种表达载体， 其包 含权利要求 4所述的核酸。 6.如权利要求5所述的表达载体， 其中， 所述的表达载体来源于逆转录病毒质粒； 优选 地， 所述逆转录病毒质粒 是SFG。 7.一种病毒， 其中所述的病毒包 含权利要求5或6所述载体。 8.一种T细胞， 其转导有权利要求4所述的核酸， 或权利要求5或6所述的表达载体或权 利要求7所述的病毒， 或其表面表达权利要求1 ‑3任一所述的嵌合抗原受体， 优选地， 所述T 细胞是T淋巴细胞。 9.在受试者中预防或治疗肿瘤(例如癌症)或提供抗肿瘤免疫的方法， 其包括给所述的 受试者施用有效量的表达权利要求1 ‑3任一所述的嵌合抗原受体的细胞,或权利要求8的T 细胞， 优选地， 其中所述肿瘤(例如癌症)患者中具有(例如升高水平的， 例如核酸或蛋白质 水平的)EPHA 2， 优选地， 所述肿瘤为胶质瘤， 更优选地， 所述肿瘤为胶质母细胞瘤。 10.检测样本中IFN ‑γ存在水平的试剂在制备试剂盒中的用途， 其中， 所述试剂盒用 于： i)预测CAR ‑T细胞治疗肿瘤的疗效； 或 ii)预测肿瘤的治疗或预防方法的效果， 其中所述方法涉及将CAR ‑T施用于受试者， 优选地， 其中所述CAR ‑T细胞是权利要求8的细胞， 任选地， 其中所述肿瘤的治疗或预防方法是权利要求9所述的方法， 优选地， 其 中所述样本是CA R‑T细胞体外培养上清， 或CAR ‑T细胞治疗后受试者的血清；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 113980138 A 2优选地， 所述试剂是特异 性针对IFN ‑γ的抗体； 更优选地， 检测样 本中IFN‑γ存在水平是通 过ELISA方法。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 113980138 A 3