(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211061771.2 (22)申请日 2022.08.31 (71)申请人 中国科学院宁波材 料技术与工程研 究所 地址 315200 浙江省宁波市镇海区中官西 路1219号 申请人 宁波大学医学院附属医院 　 宁波慈溪生物医学工程研究所 (72)发明人 任文智　汪建华　徐榴　吴爱国　 徐开蔚　洪露　金陆飞　周伟健　 (74)专利代理 机构 宁波甬致专利代理有限公司 33228 专利代理师 胡天人 (51)Int.Cl. A61K 47/69(2017.01)A61K 47/52(2017.01) A61K 41/00(2020.01) A61K 31/4745(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 1/18(2006.01) A61K 49/08(2006.01) A61K 49/10(2006.01) A61K 49/18(2006.01) (54)发明名称 黑氧化钛基光热免疫纳米探针的制备方法 及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种黑氧化钛基光热免疫纳 米探针的制备方法及其应用， 该纳米探针以黑二 氧化钛纳米粒子为载体， 所述载体表 面包裹介孔 二氧化硅并偶联磁共振成像对比剂， 所述介孔二 氧化硅上负载免疫激动剂。 本发 明的纳米探针将 光热试剂与免疫激动剂联合， 同时连接具有MRI 成像功能的磁共振成像对比剂， 在MRI成像引导 下观察纳米粒子的分布情况， 利用光热作用松解 胰腺癌基质， 促进免疫激动剂 的肿瘤渗透， 改善 胰腺癌免疫抑制微环境， 促进树突状细胞的成 熟， 进一步将光热治疗释放的肿瘤相关抗原递呈 给效应T细胞， 提高免疫应答水平， 由此能够提高 胰腺癌的治 疗效果。 权利要求书1页 说明书5页 附图3页 CN 115531556 A 2022.12.30 CN 115531556 A 1.一种黑氧化钛基光热免疫纳米探针， 其特征在于， 所述纳米探针以黑二氧化钛纳米 粒子为载体， 所述载体表面包裹介孔二氧化硅并偶联磁共振成像对比剂， 所述介孔二氧化 硅上负载免疫激动剂。 2.根据权利要求1所述的黑氧化钛基光热免疫纳米探针， 其特征在于， 所述磁共振成像 对比剂选自以下任意一种： 钆塞酸二钠、 钆喷酸葡胺、 钆双胺和卡地胺钠、 钆特酸葡胺、 钆特 醇。 3.根据权利要求1所述的黑氧化钛基光热免疫纳米探针， 其特征在于， 所述免疫激动剂 为Toll样受体7/8激动剂R848。 4.一种如权利要求1 ‑3任一所述的黑氧化钛基光热免疫纳米探针的制备方法， 其特征 在于， 包括以下步骤： S1、 将白色二氧化 钛纳米粒子还原为 黑色二氧化 钛纳米粒子bTiO2； S2、 在bTiO2表面包裹介孔 二氧化硅， 构建bTiO2@mSiO2纳米粒子； S3、 对bTiO2@mSiO2表面进行氨基化 修饰， 得到bTiO2@mSiO2‑NH2； S4、 磁共振成像对比剂与bTiO2@mSiO2‑NH2发生缩合反应， 得到磁共振成像对比剂修饰 的纳米粒子bTiO2@mSiO2@Gd； S5、 通过物理吸附负载免疫激动剂， 得到黑氧化 钛基光热免疫纳米探针。 5.根据权利要求4所述的黑氧化钛基光热免疫纳米探针的制备方法， 其特征在于， 所述 步骤S1中以NaBH4为还原剂， 还原剂与白色二氧化 钛纳米粒子的质量比为1:2 ～1:4。 6.根据权利要求4所述的黑氧化钛基光热免疫纳米探针的制备方法， 其特征在于， 所述 步骤S2中采用TEOS在碱性条件下 水解作为硅源， CTAB作为模板剂。 7.根据权利要求4所述的黑氧化钛基光热免疫纳米探针的制备方法， 其特征在于， 所述 步骤S3中用APTES对bTiO2@mSiO2表面进行氨基化 修饰。 8.根据权利要求4所述的黑氧化钛基光热免疫纳米探针的制备方法， 其特征在于， 所述 步骤S4中用六 水合醋酸钆与DOTA ‑NHS‑Ester螯合形成磁共 振成像对比剂Gd ‑DOTA。 9.根据权利要求4所述的黑氧化钛基光热免疫纳米探针的制备方法， 其特征在于， 所述 步骤S4中将bTiO2@mSiO2@Gd与免疫激动剂以质量比为5:1～10:1+混合在无菌水中， 搅拌、 离 心后得到纳米探针。 10.一种黑氧化钛基光热免疫纳米探针的应用， 其特征在于， 将如权利要求1 ‑3任一所 述的黑氧化 钛基光热免疫纳米探针 应用于光热 ‑免疫治疗及MRI成像一体化试剂盒。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115531556 A 2黑氧化钛基光热免疫纳米探针的制备方 法及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及纳 米材料与生物传感器技术领域， 尤其涉及 一种黑氧化钛基光热免疫 纳米探针的制备 方法及其应用。 背景技术 [0002]胰腺导管腺癌(简称胰腺癌)是一种高度恶性的消化系统肿瘤， 早期诊断难， 确诊 时往往处于中晚期， 易 发生转移， 手术效果差。 由于瘤内乏血供、 免疫抑制等特殊微环境， 胰 腺癌对放、 化疗敏感性低且易产生 耐药性， 致使其治疗难度大与预后极差， 五年生存率不 足 10％。 因此， 迫切需要开发胰腺癌的高效治疗新方法。 [0003]与传统胰腺癌治疗方法相比， 基于纳米探针的光热治疗在胰腺癌治疗中可高效消 融肿瘤组织， 显著抑制原发肿瘤的生长， 然而由于胰腺癌肿瘤微环境处于免疫抑制状态， 单 一光热治疗释放的肿瘤相关抗原难以引起高效的免疫应答， 对抑制肿瘤的转移及复发效果 不佳。 发明内容 [0004]针对现有技 术的不足， 本发明所要解决的技 术问题是如何提高胰腺癌治疗效果。 [0005]为解决上述技术问题， 本发明第一方面提供一种黑氧化钛基光热免疫纳米探针， 该纳米探针以黑二氧化钛纳米粒子为载体， 所述载体表面包裹介孔二氧化硅并偶联磁共振 成像对比剂， 所述介孔 二氧化硅上负载免疫激动剂。 [0006]进一步地， 所述磁共振成像对比剂选自以下任意一种： 钆塞酸二钠、 钆喷酸葡胺、 钆双胺和卡 地胺钠、 钆特酸葡 胺、 钆特醇。 优选为DOTA ‑Gd。 [0007]进一步地， 所述免疫激动剂为To ll样受体7/8激动剂R848。 [0008]本发明第一方面提供上述黑氧化钛基光热免疫纳 米探针的制备方法， 包括以下步 骤： [0009]S1、 将白色二氧化 钛纳米粒子还原为 黑色二氧化 钛纳米粒子bTiO2； [0010]S2、 在bTiO2表面包裹介孔 二氧化硅， 构建bTiO2@mSiO2纳米粒子； [0011]S3、 对bTiO2@mSiO2表面进行氨基化 修饰， 得到bTiO2@mSiO2‑NH2； [0012]S4、 磁共振成像对比剂与bTiO2@mSiO2‑NH2发生缩合反应， 得到磁共振成像对比剂 修饰的纳米粒子bTiO2@mSiO2@Gd； [0013]S5、 通过物理吸附负载免疫激动剂， 得到黑氧化 钛基光热免疫纳米探针。 [0014]进一步地， 所述步骤S1中以NaBH4为还原剂， 还原剂与白色二氧化钛纳米粒子的质 量比为1:2 ～1:4， 典型质量比为1:2、 1:3、 1:4 等。 [0015]进一步地， 所述步骤S2中采用TEOS在碱性条件下 水解作为硅源， CTAB作为模板剂。 [0016]进一步地， 所述步骤S3中用APTES对bTiO2@mSiO2表面进行氨基化 修饰。 [0017]进一步地， 所述步骤S4中用六 水合醋酸钆与DOTA ‑NHS‑Ester螯合形成Gd ‑DOTA。 [0018]进一步地， 所述步骤S4中将bTiO2@mSiO2@Gd与免疫激动剂以质量比为5:1～10:1混说　明　书 1/5 页 3 CN 115531556 A 3