(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210907393.9 (22)申请日 2022.07.29 (71)申请人 中南大学 地址 410000 湖南省长 沙市岳麓区麓山 南 路932号 (72)发明人 潘静　黄菊芳　于海洋　 (74)专利代理 机构 长沙轩荣专利代理有限公司 43235 专利代理师 汪金连 (51)Int.Cl. A61K 45/00(2006.01) A61K 31/7088(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/04(2006.01) (54)发明名称 高表达热休克蛋白的巨噬细胞作为靶点在 制备肝细胞癌药物中的应用 (57)摘要 本发明属于分子生物学及医药领域， 具体涉 及高表达热休克蛋白的巨噬细胞作为靶点在制 备肝细胞癌药物中的应用。 本发 明通过大量的实 验和分析获得了表达HSPs的巨噬细胞对肝细胞 癌发生、 发展的影响以及相关作用机制， 首次提 出了以HSPs+巨噬细胞为靶点用于肝细胞癌的治 疗， 提供了采用p38αsiRNA阻断HSPs+巨噬细胞 MAPK信号途径， 从而减弱HCC细胞增殖和迁移的 能力， 达到治疗肝细胞癌的效果。 权利要求书1页 说明书6页 附图9页 CN 115317612 A 2022.11.11 CN 115317612 A 1.高表达热休克蛋白的巨噬细胞作为靶点在制备肝细胞癌药物中的应用。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述高表达热休克蛋白的巨噬细胞通过炎 症刺激活化p38α 介导的MAPK信号 通路诱导获得。 3.一种抗 肝细胞癌药物组合物， 其特 征在于， 所述药物组合物包括p38α 表达抑制剂。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115317612 A 2高表达热休克蛋白的巨噬细胞作 为靶点在制备肝细胞癌药物 中的应用 技术领域 [0001]本发明属于分子生物学及医药领域， 具体涉及高表达热休克蛋白的巨噬细胞作为 靶点在制备肝细胞癌(H CC)药物中的应用。 背景技术 [0002]巨噬细胞被认为是人体的免疫屏障， 是先天性免疫和获得性免疫的重要组成部 分。 巨噬细胞具有异质性和可塑性， 在肿瘤组织中受微环境影响巨噬细胞的表型和功能发 生改变。 [0003]目前， 肿瘤相关巨噬细胞的靶向策略主要有通过调控CSF1 ‑CSF1R轴耗竭或灭活单 核‑巨噬细胞、 调控CCL2 ‑CCR2轴抑制单核 ‑巨噬细胞向肿瘤部位募集、 使用抗CD47抗体、 Toll样受体激动 剂、 CD40激动剂和PI3Kγ抑制剂等诱导巨噬细胞重编程。 然而， 巨噬细胞耗 竭或灭活的主要缺点是系统性地、 非特异性地靶向巨噬细胞会使正常免疫反应受到损害， 使人体在防御外部病原体攻击时处于不利地位， 因此使用抗体或小分子进 行抗CSF1治疗会 导致不良反应。 在疗效方面， 临床前模型中的肿瘤相关巨噬细胞耗竭导致肿瘤内中性粒细 胞被高度抑制， 减弱了巨噬细胞耗竭方法的治疗效果。 此外， 尽管抗CCL2单克隆抗体在 治疗 期间能够显著减少肿瘤相关巨噬细胞的数量， 但 抗体撤销后单核细胞募集的快速反弹反而 加速了几种乳腺癌小鼠模型的肺转移。 巨噬细胞重编程是将肿瘤相关巨噬细胞的表型从促 肿瘤状态变为抗肿瘤状态， 具有抗肿瘤表型的巨噬细胞可以通过分泌抗肿瘤因子、 吞噬、 增 加免疫浸润、 增加T细胞和其他免疫细胞的细胞毒作用来影响肿瘤的生长。 但仅靶向一种细 胞不足以改变整个肿瘤微环境， 进而根除肿瘤。 肿瘤相关巨噬细胞在不同个体和不同肿瘤 中具有明显的异质性， 为了改进治疗方式， 需要对不同肿瘤类型 的不同肿瘤 免疫微环境和 新的巨噬细胞靶点有更加透彻的了解。 [0004]肿瘤相关巨噬细胞在HCC中的作用主要有免疫抑制、 促进肿瘤侵袭和转移、 促进血 管生成和上皮间充质转化等。 在对临床样本的研究中发现在HCC组织中有大量肿瘤相关巨 噬细胞的组织浸润， 数量越多、 密度越高、 患者预后越差。 因此， 深入了解HCC与肿瘤相关巨 噬细胞之间的联系对于开发有效的HCC治疗方法至关重要， 靶向肿瘤相关巨噬细胞可能为 HCC患者提供新的早期诊断和治疗方法， 改善 HCC的预后。 发明内容 [0005]为解决上述技术问题， 本 发明采用免疫荧光共染色对高表达热休克蛋白(HSPs)的 巨噬细胞在肝细胞癌患者的肿瘤组织中进行定位； 检测炎性条件(LPS/IFN ‑γ)下巨噬细胞 HSPs的转录水平变化， 分别通过CCK ‑8实验和划痕实验检测HSPs+巨噬细胞条件培养基对肿 瘤细胞增殖能力和迁移能力的影响； 通过生信分析预测调控巨噬细胞HSPs水平可能的信号 通路， 用qPCR和westernblot对相关信号通路进行验证； 通过siRNA干扰下调HSPs+巨噬细胞 p38α 水平， 分别用CCK ‑8和划痕实验检测实验组和对照组巨噬细胞条件培养基对HCC细胞增说　明　书 1/6 页 3 CN 115317612 A 3