(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210958915.8 (22)申请日 2022.08.10 (71)申请人 河南工业大 学 地址 450001 河南省郑州市高新 技术开发 区莲花街100号 (72)发明人 孙冰华　王晓曦　钱晓洁　谷玉娟　 马森　刘翀　李力　郑学玲　 (74)专利代理 机构 成都天汇致远知识产权代理 事务所(普通 合伙) 51264 专利代理师 韩晓银 (51)Int.Cl. G01N 21/33(2006.01) G01N 1/28(2006.01) (54)发明名称 一种燕麦粉糊化度的测定方法 (57)摘要 本发明公开了一种燕麦粉糊化度的测定方 法， 包括以下步骤： 先利用低浓度的氯化钾/ 氢氧 化钾混合溶液作为助溶剂使得燕麦粉中的糊化 淀粉完全溶解得到待测样品， 同时利用高浓度的 氯化钾/氢氧化钾混合溶液使燕 麦粉完全糊化得 到全糊化样品； 再利用酶将待测样品和全糊化样 品中的糊化淀粉水解为还原 糖， 之后利用3,5 ‑二 硝基水杨酸试剂与还原糖反应生成棕红色的氨 基化合物， 氨 基化合物在540  nm附近有最大吸光 度， 利用紫外分光光度计测定待测样品和全糊化 样品的吸光度， 并根据公式计算出燕麦粉糊化 度。 本发明可以减少糊化淀粉的测量值与实际值 的偏差。 权利要求书2页 说明书8页 附图1页 CN 115356277 A 2022.11.18 CN 115356277 A 1.一种燕麦粉糊化度的测定方法， 其特征在于， 包括以下步骤： 先利用低浓度的氯化 钾/氢氧化钾混合溶液作为助溶剂使得燕麦粉中的糊化淀粉完全溶解得到待测样品， 同时 利用高浓度的氯化钾/氢氧化钾混合溶液使燕麦粉完全糊化得到全糊化样品； 再利用酶将 待测样品和全糊化样品中的糊化淀粉水解为还原糖， 之后利用3,5 ‑二硝基水杨 酸试剂与还 原糖反应生成棕红色的氨基化合物， 氨基化合物在540nm附近有最大吸光度， 利用紫外 分光 光度计测定待测样品和全糊化样品的吸光度， 并根据公式计算出燕麦粉糊化度。 2.根据权利要求1所述的测定方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： 步骤1、 称取两等份燕麦粉， 一份燕麦粉中加入低浓度的氯化钾/氢氧化钾混合溶液进 行增溶处理得到待测样品， 另一份燕麦粉中加入高浓度的氯化钾/氢氧化钾混合溶液进行 糊化处理得到全糊化样品， 磁力搅拌； 步骤2、 分别向所述待测样品和全糊化样品中加入醋酸钠缓冲液， 涡旋混合均匀， 制备 得到待测样品悬浮液和全糊化样品悬浮液； 步骤3、 取等量的待测样品悬浮液和全糊化样品悬浮液， 分别加入β ‑淀粉酶溶液， 另取 等量的待测样品悬浮液加入蒸馏水， 作为空白样品， 水浴孵育， 之后离心处理， 弃沉淀， 得到 待测样品上清液、 全糊化样品上清液和空白样品上清液； 步骤4、 分别移取等量待测样品上清液、 全糊化样品上清液和空白样品上清液于具塞刻 度试管中， 再加入3,5 ‑二硝基水杨 酸试剂， 混合均匀， 沸水浴5min， 立即冷却， 加蒸馏水稀释 至刻度， 盖上盖 子摇匀， 用紫外分光 光度计进行比色测定并计算得到燕麦粉糊化度。 3.根据权利要求2所述的测定方法， 其特征在于， 所述步骤1中燕麦粉的粒径小于等于 300 μm， 所述低浓度的氯化钾/氢氧化钾混合溶液中氯化钾和氢氧化钾的体积摩尔浓度分别 为50～80mM和20～40mM， 所述燕麦粉与低浓度的氯化钾/氢氧化钾混合溶液的配比为20mg： 5mL～30mg： 5mL， 所述高浓度的氯化钾/氢氧化钾混合溶液中氯化钾和氢氧化钾的体积摩尔 浓度分别 为100～120mM和350～380mM， 所述燕麦粉与高浓度的氯化钾/氢氧化钾混合溶液 的配比为20mg： 5mL～3 0mg： 5mL。 4.根据权利要求2所述的测定方法， 其特征在于， 所述步骤1中增溶处理和糊化处理的 条件为： 磁力搅拌时间为3 0～40min， 磁力搅拌速率 为120～16 0rpm。 5.根据权利要求2所述的测定方法， 其特征在于， 所述步骤2中醋酸钠缓冲液的体积摩 尔浓度为100～120mM， 醋酸钠缓冲液与待测样品和全糊化样品的体积比均为30mL： 5mL； 醋 酸钠缓冲液的pH为 4.75。 6.根据权利要求2所述的测定方法， 其特征在于， 所述步骤3中水浴孵育条件是在50℃ 水浴中孵 育45min， 每15mi n旋转5s； 所述离心处 理条件是于10 000rpm/min离心5mi n。 7.根据权利要求2所述的测定方法， 其特征在于， 所述步骤3 中待测样品悬浮液、 全糊化 样品悬浮液与β ‑淀粉酶酶液的体积比均为2mL： 10μL， 待测样品悬浮液与蒸馏水体积比为 2mL： 10 μL。 8.根据权利要求2所述的测定方法， 其特征在于， 所述步骤4中的3,5 ‑二硝基水杨酸试 剂的制备方法为： 称取9.165g的3,5 ‑二硝基水杨酸溶于少量热蒸馏水中， 溶解后加入10％ 氢氧化钾溶液426mL， 再加入20mL丙三醇， 摇匀， 冷却 后定容至1000mL， 即制成3,5 ‑二硝基水 杨酸试剂， 贮于棕色试剂瓶中放置一周后备用。 9.根据权利要求2所述的测定方法， 其特征在于， 所述步骤4中的待测样品上清液、 全糊权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115356277 A 2化样品上清液和空白样品上清液与3,5 ‑二硝基水杨酸试剂体积比均为0.3mL： 3mL～0.5mL： 3mL。 10.根据权利要求2所述的测定方法， 其特征在于， 所述步骤4中的利用紫外可见分光光 度计进行比色测定， 检测波长为540nm。 所述的燕 麦粉糊化度的计算公 式为X＝(A1–A0)/(A2– A0)×100； 其中， X为燕麦粉糊化度， A0为空白样品的吸光度， A1为待测定样品的吸光度， A2为全糊 化样品的吸光度。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115356277 A 3