(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210966694.9 (22)申请日 2022.08.12 (71)申请人 重庆三峡农业科 学院 （重庆市万州 区甘宁蚕种场） 地址 404155 重庆市万州区厦门路6 00号 (72)发明人 邱诗春　周静　徐燕　 (74)专利代理 机构 北京汇捷知识产权代理事务 所(普通合伙) 11531 专利代理师 王文娇 (51)Int.Cl. G01N 21/78(2006.01) G01N 1/28(2006.01) G01N 1/44(2006.01) (54)发明名称 一种测定植株中硼含量的方法 (57)摘要 本发明公开了一种测定植株中硼含量的方 法， 包括甲基红指示剂、 缓冲液、 0.025M  EDTA溶 液、 甲亚胺溶液， 本发明采取湿灰化法进行处理： 在试样中加入HNO3： HClO4=15ml： 3ml， 插上小漏 斗， 调节可控温电炉保持溶液微沸并摇动三角瓶 防止溶液溢出， 消煮2小时左右， 至 溶液澄清， 约2 ~5ml为止， 若提前一天将HNO3、 HClO4加入试样浸 泡一晚， 可缩短消煮时间半小时左右， 植物试样 经湿灰化法处理后， 在弱酸性条件下， 试样溶液 中硼与甲亚胺 ‑H酸生成黄色复合物， 用分光光度 计在波长430nm处测定吸光度， 吸光度与硼含量 成正比， 与标准系列比较能定量出试样中硼含 量。 权利要求书1页 说明书4页 附图1页 CN 115389491 A 2022.11.25 CN 115389491 A 1.一种测定植株中硼含量的方法， 其特征在于： 包括甲基红指示剂、 缓冲液、 0.025M   EDTA溶液、 甲亚胺溶 液； 所述甲基红指示剂： 称取0.1g甲基红,用乙醇溶解稀释到100ml,可得1g/L的所述甲基 红指示剂； 所述缓冲液： 称取250g醋酸铵于500ml去离子水中， 慢慢加入冰醋酸 （约100ml） ， 不断搅 拌， 使溶液的pH值调节至 5.5； 所述0.025M  EDTA溶液： 称取9.3gEDTA二钠盐溶于去离子水中， 并用 去离子水定容至 1000ml； 所述甲亚胺溶液： 称取0.5g甲亚胺 ‑H和1.0g抗坏血酸于10ml去离子水中， 在30℃水浴 上加热， 使其溶解， 冷却后用去离 子水稀释至10 0ml。 2.根据权利要求1所述的一种测定植株中硼含量的方法， 其特征在于： 称取烘干磨碎的 植株样品1.0~1.5g于150ml三角瓶中， 加入HNO3： HClO4=15ml： 3ml， 插上小漏斗， 调节可控温 电炉保持溶液微沸并摇动三角瓶防止溶液溢出， 消煮至溶液澄清 （若消煮液不够可继续添 加以上比例HNO3、 HClO4） ， 约2~5ml为止。 3.根据权利要求1所述的一种测定植株中硼含量的方法， 其特征在于： 将消 煮液转移至 100ml容量瓶并定容， 吸10ml于25ml容量瓶中， 加 入两滴甲基红指示剂， 用氨水调节溶液至 浅橙色 （pH为7左右） ， 定容， 同时做空白试验。 4.根据权利要求1所述的一种测定植株中硼含量的方法， 其特征在于： 吸取5ml溶液于 试管中， 依次加入2ml缓冲液， 2mlEDTA溶液和2ml甲亚胺溶液， 注意每加一种试剂后要充分 摇匀， 此混合溶 液静置1h后， 于43 0nm波长处测定吸光度。 5.根据权利要求1所述的一种测定植株中硼含量的方法， 其特征在于： 称取 H3BO30.5715g于1000ml容量瓶 中， 加蒸馏水溶解后， 稀释至刻度， 摇匀， 转入塑料瓶 中保存， 此为100ug/ml标准母液。 6.根据权利要求1所述的一种测定植株中硼含量的方法， 其特征在于： 分别吸取此标准 母液0ml、 0.2ml、 0.4 ml、 0.6ml、 0.8ml、 1.0ml于 试管中， 用蒸馏水补至5ml （此标准系列B含 量 为0ug、 20ug、 40ug、 60ug、 80ug、 100ug） ， 依次加入2ml缓冲液， 2mlEDTA溶液和2ml 甲亚胺溶 液。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115389491 A 2一种测定植株中硼含量的方 法 技术领域 [0001]本发明涉及测定植株中硼含量的技术领域， 特别的， 是一种测定植株中硼含量的 方法。 背景技术 [0002]硼是植物必需的微量元素之一， 测定植株中硼的方法有甲亚胺比色法、 姜黄素比 色法、 等离子发射光谱法、 原子吸收分光光度法。 由于硼的原子化温度较高， 原子吸收分光 光度法测硼已很少用。 姜黄素比色法由于硼与姜黄素 的显色是在脱水过程中完成， 脱水速 度的快慢对显色极其重要， 为保证脱水速度不对显色产生影响， 样品与标准系列的脱水条 件必须保证严格一致， 显 色条件要求严格， 不易操作。 目前应用最广泛的是甲亚胺比色法和 等离子发射光谱法， 等离子发射光谱法对试验仪器有所要求， 其使用的电感耦合等离子光 谱仪， 该仪器价格昂贵， 且 该方法前 处理为干灰化法， 过程繁琐， 需要用马弗炉高温灰化。 现 有的甲亚胺比色法前处理与等离子发射光谱法前处理类似， 需要马 弗炉高温灰化2小时左 右， 弱掌握不 好灰化时间与温度， 易造成硼提取不完全或损失， 现有技 术的缺陷和不足： 现有的甲亚胺比色法前处理过程繁琐， 试样需在马弗炉中高温灰化2小时左右， 且 弱掌握不 好灰化时间与温度， 易造成硼提取不完全或损失。 发明内容 [0003]针对上述问题， 本发明提供一种测定植株中硼含量的方法。 [0004]为了实现上述目的， 本发明是通过如下的技术方案来实现： 一种测定植株中硼含 量的方法， 包括甲基红指示剂、 缓冲液、 0.025 M EDTA溶液、 甲亚胺溶 液； 所述甲基红指示剂： 称取0.1g甲基红,用乙醇溶解稀释到100ml,可得1g/L的所述 甲基红指示剂； 所述缓冲液： 称取250g醋酸铵于500ml去离子水中， 慢慢加入冰 醋酸 （约100ml） ， 不 断搅拌， 使溶 液的pH值调节至 5.5； 所述0.025M  EDTA溶液： 称取9.3gEDTA二钠盐溶于去离子水中， 并用去离子水定容 至1000ml； 所述甲亚胺溶液： 称取0.5g甲亚胺 ‑H和1.0g抗坏血酸于10ml去离子水中， 在30℃ 水浴上加热， 使其溶解， 冷却后用去离 子水稀释至10 0ml。 [0005]作为本发明的进一步改进， 称取烘干磨碎的植株样品1.0~1.5g于150ml三角瓶中， 加入HNO3： HClO4=15ml： 3ml， 插上小漏斗， 调 节可控温电炉保持溶液微沸并摇动三角瓶防止 溶液溢出， 消煮至溶 液澄清 （若消煮液不够可继续添加以上比例HNO3、 HClO4） ， 约2~5ml为止。 [0006]作为本发明的进一步改进， 将消煮 液转移至100ml容量瓶并定容， 吸10ml于25ml容 量瓶中， 加入两滴甲基红指示剂， 用氨水调节溶液至浅橙色 （pH为7左右） ， 定容， 同时做空白 试验。 [0007]作为本发明的进一步改进， 吸取5ml溶液于试管中， 依 次加入2ml缓冲液， 2mlEDTA说　明　书 1/4 页 3 CN 115389491 A 3