(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211087831.8 (22)申请日 2022.09.07 (71)申请人 贺州学院 地址 542899 广西壮 族自治区贺州市西环 路18号 (72)发明人 黎小椿　罗杨合　李官丽　吴梅　 (74)专利代理 机构 北京智行 阳光知识产权代理 事务所(普通 合伙) 11738 专利代理师 范斌 (51)Int.Cl. G01N 21/65(2006.01) G01N 1/28(2006.01) G01N 1/38(2006.01) (54)发明名称 一种检测茶叶中毒死蜱的方法 (57)摘要 本发明公开了一种检测茶叶中毒死蜱的方 法， 以富勒烯为前驱物， 采用微波法快制备掺金 碳点(CDAu)， 以维多利亚蓝B(VBB)为探针分子， 利用表面增强拉曼散射(SERS)结合适配体调控 掺金碳点催化反应构建一种简单、 灵敏、 快速、 无 需复杂预处理SERS快速检测茶叶中毒死蜱的方 法。 权利要求书2页 说明书8页 附图10页 CN 115436338 A 2022.12.06 CN 115436338 A 1.一种检测茶叶中毒死蜱的方法， 包括如下步骤： 包括富勒烯(C60)配置、 掺金碳点 (CDAu)的制备和SERS法测定毒死蜱， 具体步骤如下： (1)取一定质量的富勒烯(C60)溶解于适量体积的甲苯中， 加入一定体积的超纯水， 放置 于超声波清洗仪中超声 至甲苯全 部挥发， 得到溶液呈深黄色悬浮 液， 得到富勒 烯(C60)溶液， 此时溶液呈亮紫色溶 液； (2)取适量上述富勒烯(C60)溶液， 然后加入HAuCl4溶液， 放置在超声波清洗仪中超声溶 解于去离 子水中， 得到 透明溶液； (3)将上述透明溶液转入消解罐中， 密封后置于微波消解仪中， 微波消解加热运行时间 为15min， 等待反应结束后， 取 出冷却至室温， 得到 淡红色澄清溶 液， 记为CDAu； (4)在100mL锥形瓶中加入0～0.30mmol/L浓度的毒死蜱适配体溶液和0～34 μg/mL浓度 的CDAu溶液混匀静置反应； (5)等步骤(4)溶 液反应完成后加入适 量的毒死蜱 混合静置9mi n； (6)然后加入0～60mmol/L的葡萄糖作为还原剂和0～1.18mmol/L的HCl、 0～0.90g/L的 HAuCl4溶液混匀定容； (7)将上述混合溶液水浴加热50～100℃反应0～24min， 用冰水终止反应， 将温度快速 降下来， 防止后续出现缓慢反应； (8)取适量步骤(7)终止反应后溶液加入0～0.17 μmol/L的维多利亚蓝B(VBB)进行SERS 检测， 加入维多利亚蓝B(VB B)作为体系的探针分子； (9)检测在1616cm‑1拉曼位移处的表面增强拉曼散射峰强度I1616cm‑1， 另外不加不加毒死 蜱溶液做空白， 测定其空白值I0， 计算ΔI1616cm‑1＝I1616cm‑1‑I0值。 数据采集时， 拉曼光谱仪的 参数设置为： 激光波长 633nm， 激光功率 为3.0mW， 采集时间为10s。 (10)以已知含量毒死蜱绘制标准曲线， 采用工作曲线法测定茶叶样品上清液毒死蜱含 量， 所述茶叶样品上清液的制备工艺包括如下步骤： S1： 称取5g茶叶样品， 研磨成粉末； S2： 放入50mL离心管中， 加入25mL丙酮， 漩涡1mi n， 超声提取2mi n； S3： 然后放入离心机以420 0r/min离心5mi n， 取悬浮液1mL定容至20mL作为试样液； S4： 量取6mL试样液于10mL离心管中， 称取0.28g四氧化三铁、 0.13g石墨化碳、 600mg无水 硫酸镁加入到6mL试样液中， 混合震荡1min， 以4500r/min转速离心5min， 去除基质中叶绿 素、 矿物质、 茶多酚、 碳水化 合物等物质对检测的干扰， 制备 得到茶叶上清液。 2.根据权利要求1所述的一种检测茶叶中毒死蜱的方法， 其特征在于： 所述步骤(1)中， 富勒烯质量： 甲苯体积： 超纯 水体积＝0.02g:20ml:10 0mL， 所制备的富勒烯溶 液为0.2g/L。 3.根据权利要求1所述的一种检测茶叶中毒死蜱的方法， 其特征在于： 所述步骤(2)中， 所述富勒烯(C60)溶液取1.5ml， 所述的HAuCl4质量溶度为0.01g/mL， 使用量为70 μL， 所使用 的去离子水为20mL。 4.根据权利要求1所述的一种检测茶叶中毒死蜱的方法， 其特征在于： 所述步骤(3)中， 微波消解过程温度为180℃， 压强为1.0 MPa。 5.根据权利要求1所述的一种检测茶叶中毒死蜱的方法， 其特征在于： 所述步骤(4)中， 毒死蜱适配体溶液为0.14mmoL/L， CDAu为18 μg/L溶液混匀静置反应为5min， 使适配体更完 全、 更好地吸附到碳 点的表面。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115436338 A 26.根据权利要求1所述的一种检测茶叶中毒死蜱的方法， 其特征在于： 所述步骤(6)中， 葡萄糖浓度为45mmoL/L， HCl浓度为0.59mmoL/L， HAuCl4浓度为0.65g/L， 溶液混匀定容为 10mL。 7.根据权利要求1所述的一种检测茶叶中毒死蜱的方法， 其特征在于： 所述步骤(7)中， 水浴加热温度为70℃， 反应时间为18mi n。 8.根据权利要求1 ‑7任一所述的一种检测茶叶中毒死蜱的方法， 其特征在于： 所述步骤 (8)中， 取步骤(7)终止反应后溶 液2mL， 维多利亚蓝B(VB B)溶液的溶度为0.125 μmo l/L。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115436338 A 3