(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211050945.5 (22)申请日 2022.08.30 (71)申请人 中国计量大 学 地址 310000 浙江省杭州市下沙高教园区 学源街258号 (72)发明人 蔡冲　张雷蕾　张慧洁　崔旭红　 (74)专利代理 机构 北京慕达星云知识产权代理 事务所 (特殊普通合伙) 11465 专利代理师 齐宝玲 (51)Int.Cl. G01N 21/65(2006.01) G01N 1/28(2006.01) (54)发明名称 一种桑椹汁中胭脂红的定量检测方法 (57)摘要 本发明公开了一种桑椹汁中胭脂红的定量 检测方法， 属于成分检测与分析领域。 本发明基 于表面增强拉曼光谱(SERS)， 建立了 桑椹汁中胭 脂红的快速检测方法。 通过采用经 典方法制备了 金溶胶增强基底， 并通过优化促凝剂、 选择促凝 剂及金溶胶的用量、 考查结合时间确定最佳SERS 增强条件； 且根据SERS光谱与胭脂红浓度关系建 立PLSR定量模型， 预测集决定系数为0.818， 均方 根误差为8.524mg/L， 以实现桑椹汁中胭脂红的 定量检测。 权利要求书2页 说明书6页 附图3页 CN 115266680 A 2022.11.01 CN 115266680 A 1.一种桑椹汁中胭脂红的定量检测方法， 其特 征在于， 具体包括如下步骤： S1采用拉曼光谱结合金 溶胶增强基底 取氯金酸溶液油浴加热搅拌至沸腾后， 迅速加入1％柠檬酸三钠 混合反应， 并冷却至室 温， 即获得酒红色金纳米溶胶， 于棕色瓶中保存； 以自制桑椹汁溶 液为基质， 向其添加胭脂红， 以配制一系列胭脂红浓度的桑椹汁溶 液； S2根据SERS光谱与胭脂红浓度关系建立PLSR定量模型 采用拉曼光谱仪采集胭脂红标准品的拉曼光谱， 确定胭脂红标准品的拉曼 特征峰； 采集含促凝剂的胭脂红标准溶液SERS光谱， 分析并确定最佳促凝剂； 其中， 胭脂红SERS 光谱采集时溶液中胭脂红溶液、 金溶胶与促凝剂三者的添加体积比为 1:1:1， 并在加入 无机 盐等待1mi n后进行采集； 将胭脂红标准溶液与金溶胶、 最佳促凝剂 混合1min后， 分别采集SERS光谱， 分析确定采 集胭脂红SERS光谱的最佳混合体积比； 将胭脂红标准溶液、 金溶胶与最佳促凝剂按最佳混合体积比进行混合， 设置结合时间 并采集SERS光谱， 分析确定采集胭脂红SERS光谱的最佳 结合时间； 采集添加了胭脂红的桑椹汁溶液的SERS光谱， 与胭脂红标准品的拉曼谱图进行比对， 确定桑椹汁中胭脂红的拉曼 特征峰； 采集添加了不同浓度胭脂红的桑椹汁溶液的SERS光谱图， 并进行预处理得到样品预处 理谱图， 结合特征光谱变量与参考值采用支持向量机(SVM)或偏最小二乘回归(PLSR)或长 短期记忆神经网络(LSTM)的方法建立定量预测模型， 以实现桑椹汁中胭脂红的定量检测。 2.根据权利要求1所述的一种桑椹汁中胭脂红 的定量检测方法， 其特征在于， 所述拉曼 光谱仪的激光功率为320mW、 平均次数为2次、 积分时间为3000ms， 采样距离为3～5mm， 检测 范围为20 0～2870cm‑1。 3.根据权利要求1所述的一种桑椹汁中胭脂红 的定量检测方法， 其特征在于， 所述促凝 剂选用NaCl溶液、 KCl溶液、 Na2CO3溶液或MgSO4溶液， 所述促凝剂的浓度为0.1mol/L， 所述胭 脂红标准溶 液的浓度为5 0mg/L。 4.根据权利要求1所述的一种桑椹汁中胭脂红 的定量检测方法， 其特征在于， 所述胭脂 红标准品的拉曼特征峰为697cm‑1、 1242cm‑1、 1302cm‑1、 1366cm‑1、 1444cm‑1、 1461cm‑1、 1518cm‑1和1577cm‑1。 5.根据权利要求1所述的一种桑椹汁中胭脂红 的定量检测方法， 其特征在于， 所述胭脂 红标准溶液与金溶胶、 最佳促凝剂的混合体积比为1:1:1、 1:1:2、 1:2:1、 2:1:1， 结合时间选 用1min、 5min、 10min或20min。 6.根据权利要求1所述的一种桑椹汁中胭脂红 的定量检测方法， 其特征在于， 所述桑椹 汁溶液的SERS光谱预处理方法至少为平滑(SG)、 多元散射校正(MSC)、 基线校正(airPLS)、 归一化(Normalized)中的一种。 7.根据权利要求1～6任一所述的一种桑椹汁中胭脂红的定量检测方法， 其特征在于， 确定最佳SERS增强条件为： 最佳促凝剂为MgSO4溶液， 胭脂红与金溶胶、 MgSO4的最佳混合体 积比为1:2:1， 最佳 结合时间为10mi n。 8.根据权利要求1～6任一所述的一种桑椹汁中胭脂红的定量检测方法， 其特征在于， 确定桑椹汁中胭脂 红的拉曼特征峰为1365cm‑1、 1441cm‑1、 1561cm‑1， 其中1365cm‑1和1441cm权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115266680 A 2‑1处是苯环的面内伸缩， 1561cm‑1处是N＝N面内摇摆、 C＝O伸缩振动和苯环的面内伸缩， 由 此根据上述3个谱峰定量分析 桑椹汁中的胭脂红合成色素。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115266680 A 3