ICS 65.020 B 04 团 体 标 准 T/JAASS 2-2020 蔬菜中丙环唑的快速检测方法 胶体金法 Rapid d etermination of propiconazole in vegetables — colloidal gold immunoassay 2020－05－22发布 2020－ 05－22实施 江苏省农学会 发 布 全国团体标准信息平台 T/JAASS 2- 2020 目 次 前言 ...................................................................................................................................................................... II 1 范围 .................................................................................................................................................................1 2 规范性引用文件 .............................................................................................................................................1 3 原理 .................................................................................................................................................................1 4 试剂与设备 .....................................................................................................................................................1 5 分析步骤 .........................................................................................................................................................2 6 结果判定 .........................................................................................................................................................2 I 全国团体标准信息平台 T/JAASS 2- 2020 前 言 本标准按照 GB/T 1.1 -2009给出的的规则编写。 本标准由江苏省农业科学院 提出。 本标准由江苏省农学会 归口。 本标准起草单位：江苏省农业科学院、南京农业大学、浙江大学、华南农业大学、 广东达元绿洲食 品安全科技股份有限公司 。 本标准主要起草人：刘凤权、王利民、 华修德、 张存政、王鸣华、郭逸蓉、徐振林、刘毅华、孙远 明、石松。 II 全国团体标准信息平台 T/JAASS 2- 2020 蔬菜中丙环唑的快速检测方法 胶体金法 1 范围 本标准规定了丙环唑农药残留的胶体金检测方法的原理、试剂与设备、分析步骤、结果判定。 本标准适用于菜心、小白菜、芥蓝等蔬菜中丙环唑农药的快速检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和实验方法 GB/T 8855 新鲜水果和蔬菜取样方法 3 原理 利用免疫测定中竞争法原理，在检测区包被一定量的包被抗原，对照区包被羊抗鼠抗体，通过胶体 金标记的特异性抗体与试样中丙环唑以及检测区被固定的丙环唑完全抗原之间的竞争反应， 观测在试纸 条的检测区和对照区呈现的反应结果（试纸条出现色带），然后根据色带有无和颜色深浅，判定检测结 果。 4 试剂与设备 4.1 丙环唑胶体金快速检测试剂盒， 试剂盒中包括试纸条、 阳性参考品 （达到检测限浓度的农药标品） 、 阴性参考品（含 0.5%吐温的 0.15 M磷酸盐缓冲液）、甲醇、样品处理液（含 10%甲醇和 0.5%吐温的 0.15 M磷酸盐缓冲液）和检测液。试 纸条用铝箔袋密封包装。 4.2 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，所有实验用水为 GB/T 6682 中规定的二级水。 4.3 天平 百分之一电子天平。 4.4 滤纸 双圈定性滤纸。 4.5 微量移液器 10 μL -200 μL，100 μL -1000 μL。 4.6 一次性PE手套 1 全国团体标准信息平台 T/JAASS 2- 2020 4.7 普通不锈钢刀片 4.8 离心管 10 mL 离心管。 4.9 容量瓶 10 mL容量瓶。 5 分析步骤 5.1 试样制备 按 GB/T 8855 方法称取 1.0 g ± 0.1 g蔬菜样品，切碎后混匀后放入 10 mL 离心管（4.8 ）中， 加入 1 mL 甲醇（ 4.1），震荡后静置 15 min。再加入 5 mL 样品处理液（4.1），充分振摇混匀后，利 用滤纸（4.4 ）进行固液分离。滤液转移至 10 mL 容量瓶（4.9 ）并定容至 10 mL（样品处理液冲洗滤 纸中的样品）作为待检液。 5.2 试样测定 5.2.1 撕开包装袋，取出试纸条； 5.2.2 将 100 μL 待检液（5.1 ）滴入试纸条取样端，待检液在层析作用下向试纸条的尾端侧向流动； 5.2.3 反应 8 min 后，观察检测区和对照区的色带条数和颜色深浅； 5.2.4 用试剂盒内的阳性参考品（4.1）、阴性参考品（ 4.1）和检测液（ 4.1）进行同样操作，以协助结 果判定。 6 结果判定 6.1 读数仪测定法 按读数仪说明书要求操作直接读取并按照图 1和以下原则进行结果判定： 6.1.1 试纸条对照区未有读数，判定为无效 6.1.2 试样检测区读数  阴性参考品检测区读数 ×2，判定为阳性 6.1.3 试样检测区读数 阴性参考品检测区读数 ×2，判定为阴性 6.2 目视法 对照阳性参考品和阴性参考品的测定结果，根据试纸条检测区（检测线）和对照区（控制线）色带 有无和颜色深浅，按照图 1和如下原则进行结果判定 6.2.1 在试纸条的质控区未出现色带，判定为无效； 6.2.2 仅在试纸条质控区出现一条红线，判定为阳性； 6.2.3 在试纸条检测区及质控区各出现一条红线，判定为阴性； 2 全国团体标准信息平台 T/JAASS 2- 2020 6.2.4 在试纸条质控区出现一条红线，检测区现一条糊的阴影线，判定为临界值。出现临界值时，需重 复检测两次以上。 图1 检测试纸条结构及结果 6.3质控参数 检测试纸条需满足：菜心中丙环唑残留的检测限达到 0.5 mg/kg ；阳性样品的符合率 ≥90%，阴性 参考品的符合率≥90% ，假阴性率≤5% ，假阳性率 ≤5%；10分钟内完成单次检测；在 室温条件 下避光保 存6个月以上。 对照区 检测区吸水区 胶体金结合区 样品区 试纸条结构 无效 阳性 阴性 临界值对照区 检测区吸水区 胶体金结合区 样品区 试纸条结构 无效 阳性 阴性 临界值 3 全国团体标准信息平台 T/JAASS 2-2020 江苏省农学会团体标准 蔬菜中丙环唑的快速检测方法 胶体金法 版权专有 不得翻印 全国团体标准信息平台