ICS 65.020 B 15 团 体 标 准 T/JAASS 3-2020 大米中甲基毒死蜱残留快速测定 胶体金法 Rapid d etermination of chlorpyrifos-methyl in rice — colloidal gold immunoassay 2020－05－22发布 2020－ 05－22实施 江苏省农学会 发 布 全国团体标准信息平台 T/JAASS 3- 2020 目 次 前言 ...................................................................................................................................................................... II 1 范围 ................................................................................................................................................................ 1 2 规范性引用文件 ............................................................................................................................................ 1 3 原理 ................................................................................................................................................................ 1 4 试剂与材料 .................................................................................................................................................... 1 5 试样制备 ........................................................................................................................................................ 2 6 测定 ................................................................................................................................................................ 2 7 结果判定与表述 ............................................................................................................................................ 2 8 检测限和特异性 ............................................................................................................................................ 3 I 全国团体标准信息平台 T/JAASS 3- 2020 前 言 本标准按 照GB/T 1.1 -2009的规则编写。 本标准由江苏省农业科学院提出 。 本标准由江苏省农学会归口。 本标准起草单位：江苏省农业科学院、南京农业大学、浙江大学、华南农业大学、 广东达元绿洲食 品安全科技股份有限公司 。 本标准主要 起草人：刘凤权、王利民、华修德、王鸣华、郭逸蓉、徐振林、张存政、刘毅华、孙远 明、石松。 II 全国团体标准信息平台 T/JAASS 3- 2020 大米中甲基毒死蜱残留快速测定 胶体金法 1 范围 本标准规定了大米中甲基毒死蜱农药残留量的 胶体金检测方法的原理、试剂与材料、试样制备、测 定、结果判定与表述和检测限与特异性。 本标准适用于大米中甲基毒死蜱农药残留的快速检 测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和实验方法 GB 2763- 2019 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量 3 原理 利用免疫测定中竞争法检测原理，通过在检测区包被一定量的包被抗原，质控区包被羊抗鼠多克隆 抗体，利用胶体金标记的抗体与样品及检测区的物质之间的竞争反应，观测在试纸条的检测区和质控区 呈现的反应结果（试纸条出现色带），然后根据色带颜色的有无或深浅，判断农药检出或超标。 4 试剂与材料 4.1 胶体金快速检测 试剂 甲基毒死蜱胶体金快速检测试剂盒，试剂盒包括阳性参考品（达到检测限浓度的农药标品）、阴性 参考品（含0.5% 吐温的 0.15 M磷酸盐缓冲液）、甲醇、样品处理液（含 10%甲醇和 0.5%吐温的 0.15 M磷 酸盐缓冲液）、检测液和试纸条，试纸条使用铝箔袋密封包装。 4.2 天平 百分之一电子天平。 4.3 滤纸 双圈定性滤纸。 4.4 试剂 除另有规定外，所有试剂均为分析纯和 GB/T 6682 中规定的二级水。 1 全国团体标准信息平台 T/JAASS 3- 2020 5 试样制备 取大米样品，粉碎后，称取 1.0 g± 0.1 g大米样品，加入1.0 mL 甲醇（ 4.1），静置 15分钟。加入 5.0 mL 样品处理液（4.1 ），充分混匀后，用滤纸（ 4.3）过滤，用样品处理液（ 4.1）冲洗滤纸中的样品，滤液 和冲洗液全部转移至 10 mL容量瓶，用样品处理液定容制成提取液，最后用检测液（4.1 ）将提取液稀释 8倍成待测液。 6 测定 6.1 取出检测试纸条； 6.2 将试纸条浸入待测液中，待测液在层析作用下向检测试纸条的尾端侧向流动； 6.3 6 min ～ 8 min观察检测区和质控区的色带条数和颜色深浅; 6.4 对试剂盒内的阳性参考品、阴性参考品和检测液（4.1 ）进行同样操作，以协助结果判断。 7 结果判定与表述 对照阳性参考品、阴性参考品和检测液（空白）的检测结果，根据竞争免疫法的原理及试纸条检测 区和质控区的色带，按照图1和以下原则进行结果判定。 7.1 在试纸条的质控区未出现色带，判定为无效； 7.2 仅在试纸条质控区出现一条红线，判定为阳性； 7.3 在试纸条检测区及质控区各出现一条红线，判定为阴性； 7.4 在试纸条质控区出现一条红线，检测区现一条糊的阴影线，判定为临界值。出现临界值时，需重 复检测两次以上。 吸水区 对照区 检测区 胶体金结合区 样品区 试纸条结构 无效 阳性 阴性 临界值 图1 试纸条结构及检测结果判定 2 全国团体标准信息平台 T/JAASS 3- 2020 8 检测限和特异性 8.1 检测限 大米中甲基毒死蜱的检测限为5 mg/kg （GB 2763- 2019 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限 量）。 8.2 特异性 试纸条对杀螟硫磷、甲基对硫磷、倍硫磷、甲基立枯磷等农药的交叉反应均小于3% 。 3 全国团体标准信息平台 T/JAASS 3-2020 江苏省农学会团体标准 大米中甲基毒死蜱残留快速测定 胶体金法 版权专有 不得翻印 全国团体标准信息平台