ICS11.020 CCSC05 团体标准 T/CRHA006—2022 健康献血者的单个核细胞资源储存规范 第3部分：供者血液样本检测 Specificationformononuclearcellresourcestorageinhealthyblooddonors Part3：Detectionofdonorbloodsamples 2022-06-15发布 2022-07-01实施 中国研究型医院学会  发布 全国团体标准信息平台 T/CRHA006-2022 I目次 前 言............................................................................II 引 言...........................................................................III 1范围.................................................................................1 2规范性引用文件.......................................................................1 3术语和定义...........................................................................1 4基本原则.............................................................................1 5检测项目及检测方法...................................................................2 参考文献.........................................................................4 全国团体标准信息平台 T/CRHA006-2022 II前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件是《健康献血者的单个核细胞资源储存规范》的第3部分。 考虑到本文件中的某些条款可能涉及专利，中国研究型医院学会不负责对任何该类专利的鉴别。 本文件由中国研究型医院学会临床数据与样本资源库专业委员会提出。 本文件由中国研究型医院学会归口。 本文件起草单位：唐颐控股（深圳）有限公司、国家卫生健康委科学技术研究所国家人类遗传资源 中心、解放军总医院临床生物样本中心、中国医学科学院血液病医院（中国医学科学院血液学研究所）、 解放军总医院医学创新研究部创伤修复与组织再生研究中心、天津经济技术开发区唐颐细胞智造与神经 创伤修复研究院、北京唐颐惠康生物医学技术有限公司、广州金域医学检验集团股份有限公司、新乡医 学院干细胞与生物治疗中心、深圳华大基因细胞科技有限责任公司、唐颐惠康（深圳）生物医学技术有 限公司、北京艾颐生物科技有限公司。 本文件主要起草人：曹毓琳、赵秀梅、马士卉、徐绍坤、田亚平、贺媛、程世翔、李国喜、林俊堂、 周红梅、杨爽、赵鹏、孙晓艳、梁文涛、江婧婧、马然、潘音奇。 全国团体标准信息平台 T/CRHA006-2022 III引言 近年来，随着细胞学、免疫学、分子生物学等技术的快速发展，免疫细胞疗法已作为一种安全有效 的治疗手段应用于临床，在肿瘤综合治疗中的作用尤为突出，成为继手术、化疗和放疗之后的第四大治 疗肿瘤较为有效的方法。当前，用于治疗的免疫细胞主要来自患者自体外周血分离的单个核细胞经过体 外的诱导扩增或工程化改造回输人体，这使得免疫细胞疗法在质量、数量和成本上成为制约其产业化应 用的瓶颈。健康人外周血中的单个核细胞资源具有极高的再利用价值。以往的采供血处理，将其作为医 疗废弃物进行处理，近些年，随着细胞生物技术发展和临床研究结果显示，人的机体免疫力随着年龄而 逐步衰减，尤其是外周血中的免疫细胞的成分和功能随着年龄的增长而变化。在青年阶段的健康人员的 外周血中的免疫细胞活性最强，借鉴于输血医学的理论基础，如何将该类细胞进行纯化并保存，为未来 诸多免疫疗法提供丰富的细胞资源，成为国内外研究的热点。 《健康献血者的单个核细胞资源储存规范》旨在规范健康献血者的单个核细胞资源储存活动，拟由 八个部分构成： ——第1部分：知情同意与供者筛查。 ——第2部分：采集与运输。 ——第3部分：供者血液样本检测。 ——第4部分：单个核细胞的分离、处理与储存。 ——第5部分：单个核细胞产品质量评价与放行。 ——第6部分：细胞资源储存设施的设计与建设。 ——第7部分：细胞资源储存设施设备的运行维护。 ——第8部分：数据电子信息化的管理。 通过对健康献血者的单个核细胞资源储存过程中的知情同意与供者筛查、采集、运输、样本检测、 分离、处理、储存、产品质量评价与放行、储存设施的设计与建设、储存设施设备的运行维护以及数据 电子信息化管理等进行规范，为从事单个核细胞资源储存业务的单位提供完整的参考。 全国团体标准信息平台 T/CRHA006-2022 1健康献血者的单个核细胞资源储存规范第3部分：供者血液样本检 测 1范围 本文件规定了基于健康献血供者提供的外周血单个核细胞资源储存中供者血液样本检测的基本原 则、检测项目及检测方法。 本文件适用于公共库健康供者单个核细胞资源储存的供者血液样本检测。 本文件不适用于临床诊断用途的血液样本的检测。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 T/CMBA011—2020人外周血单个核细胞的采集、分离和保存 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 单个核细胞peripheralbloodmononuclearcell,PBMC 外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞、单核细胞、树突状细胞和其他少量细胞（造血干细胞 等）。 [来源：T/CMBA011—2020，3.1] 实验室间比对interlaboratorycomparisons 按照预先规定的条件，由两个或多个实验室对相同或类似的物品进行测量或检测的组织、实施和评 价。 [来源：ISO/IEC17043:2010,3.4] 4基本原则 开展供者血液传染性疾病检测的机构应具有主管部门颁发的执业许可。 检测机构所用的试剂和耗材应来源于资质完善、合格的厂商，其中血源筛查体外诊断试剂必须选 择经国家药品监督管理部门批准或备案的试剂。 检测机构开展检测前应确认血液样本标识清晰完整，标本质量符合检测项目技术要求。 血液样本因运输或检测频次等原因不能在72h内完成检测时，应放置在2℃～8℃冷藏保存，超 过一周以上的标本需要进行冷冻保存，冷冻保存的样品管应经过性能验证。 检测机构应当选择参加国家卫生健康管理部门指定的参比实验室组织的实验室间比对计划或中国 合格评定国家认可委员会（CNAS）组织的能力验证或测量审核，频率每年不少于2次。如无对应的实验 全国团体标准信息平台 T/CRHA006-2022 2室间比对计划，机构应参加至少3个同类型实验室间组织的相同或类似的项目的测量评价活动，频次每 年不少于2次。 核酸检测实验室分区及功能要求，原则上可设置3个独立的工作区域：试剂耗材储存与准备区、 标本处理和制备区、扩增检测区，各区域空间完全相互独立，不能直接相通。 核酸检测实验室实施空气流向控制，扩增前和扩增后区域应具有独立通风系统，扩增后区域保持 负压状态，其他区域保持正压或常压状态。 核酸检测实验室应制定规程并定期开展清洁、消毒及环境监控。 核酸检测实验室的生物安全柜、核酸提取仪、PCR仪、移液器等，血清学检测实验室的酶标仪、 免疫分析仪等，血细胞检测实验室的血细胞分析仪、流式细胞仪等应根据计量校准规范要求定期进行校 准。 5检测项目及检测方法 传染病检测项目 5.1.1人类免疫缺陷病毒（HIV）感染标志物，包括： a)人类免疫缺陷病毒核酸（HIVRNA）； b)人类免疫缺陷病毒I型抗体（抗HIV-I）和人类免疫缺陷病毒Ⅱ型抗体（抗HIV-Ⅱ），或者 抗HIV-I、抗HIV-I和p24抗原（HIVAg/Ab）。 5.1.2乙型肝炎病毒（HBV）感染标志物，包括： a)乙型肝炎病毒核酸（HBVDNA）； b)乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）。 5.1.3丙型肝炎病毒（HCV）感染标志物，包括： a)丙型肝炎病毒核酸（HCVRNA）； b)丙型肝炎病毒抗体（抗HCV），或者HCV抗原和抗体（HCVAg/Ab）。 5.1.4梅毒螺旋体感染标志物：梅毒螺旋体特异性抗体（抗TP）。 5.1.5丙氨酸氨基转移酶（ALT）。 5.1.6巨细胞病毒。 5.1.7EB病毒（Epstein-Barrvirus）。 5.1.8人类嗜T细胞病毒（HTLV）。 5.1.9国家和省级卫生行政部门规定的地方性、时限性输血或细胞治疗供体相关传染病标志物。 其他非传染病性检测项目 5.2.1血型检测：ABO和RhD血型 5.2.2HLA分型 5.2.3淋巴细胞亚群 检测方法 5.3.1核酸扩增检测技术，包括转录介导的核酸扩增检测技术（TMA）、实时荧光聚合酶链反应（PCR）。 5.3.2血清学检测技术，包括酶联免疫吸附试验（ELI