ICS07.100.99 CCSB41T/ZNZ 浙江省农产品质量安全学会团体标准 T/ZNZ123—2022 兽药、饲料中风险物质的筛查与确证规程 Codeofpracticeforscreeningandconfirmationofrisksubstancesin veterinarydrugsandfeeds 2022-07-29发布 2022-08-29实施 浙江省农产品质量安全学会发布 全国团体标准信息平台 T/ZNZ123—2022 I前  言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由浙江省农产品质量安全学会提出并归口。 本文件起草单位：浙江省动物疫病预防控制中心（浙江省兽药饲料监察所）、浙江省农业科学院。 本文件主要起草人：周炜、侯轩、张航俊、周芷锦、罗成江、黄娟、陈洁、陈勇、赵灵燕、杨华、 唐标、林仙军、沈红霞、孙思琪、杨磊、陈凯、吉小凤。 全国团体标准信息平台 T/ZNZ123—2022 1兽药、饲料中风险物质的筛查与确证规程 1范围 本文件规定了兽药、饲料中风险物质的筛查与确证程序，规定了高效液相色谱仪、高效液相色谱串 联质谱仪、高效液相色谱三重四极杆线性离子阱质谱仪、高效液相色谱四极杆-飞行时间质谱仪和高效 液相色谱四极杆-静电场轨道阱质谱仪筛查与确证程序及方法。 本文件适用于兽药原料药及兽用制剂（含片剂、胶囊剂、粉剂、预混剂、颗粒剂、可溶性粉剂、注 射剂、内服溶液剂/混悬剂/乳剂）、兽药制剂（含散剂、胶剂、片剂、丸剂、颗粒剂、浸膏剂、胶囊剂、 注射剂、内服溶液剂/混悬剂/乳剂）和饲料（含饲料原料）中风险物质的筛查与确证。 本文件不适用于微量元素、微生物及生物毒素。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅注日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T14699.1饲料采样 GB/T20195动物饲料试样的制备 NY/T1896兽药残留实验室质量控制规范 中华人民共和国农业部令第6号（2001年）兽药质量监督抽样规定 农业农村部公告第289号兽药中非特定非法添加物质检查方法 农业农村部公告第312号饲料中风险物质的筛查与确认导则液相色谱-高分辨质谱法（LC-HRMS） 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 风险物质risksubstances 在兽药或饲料标准以外添加的成分或刻意隐瞒的成分，这些潜在的成分可能影响到畜禽产品及水产 品质量安全，可能对其使用者造成经济和/或声誉损失。 注：分为非兽用化合物（未获得我国兽医行政主管部门许可的化合物）和兽用化合物（兽医处方或产品标签外违规 增加的化合物）。 全国团体标准信息平台 T/ZNZ123—2022 23.2 筛查qualitativescreening 根据化合物的化学、物理特征等，检测某一化合物或某类化合物是否存在。应具有高通量性。 3.3 确证qualitativeconfirming 在筛查的基础上，通过不同色谱条件、特征光谱、特征质谱解离规律和同等条件下与对照物质/标 准物质的比较，并对各特异性限度进行评判，以确定该目标化合物是否存在。 4原理 试样经适当的前处理、仪器检测后进行谱库匹配分析，对可能存在的风险物质进行筛查。发现可疑 风险物质后，在同等条件下与相应对照物质/标准物质进行比较，以确证风险物质的存在。 5流程 试样制备完成后，按照图1所示流程开展筛查与确证。各环节的质量控制参照NY/T1896。 图1兽药和饲料中风险物质筛查确证流程图 全国团体标准信息平台 T/ZNZ123—2022 36样品 6.1样品的采集与保存 饲料样品的采集参照GB/T14699.1执行，兽药样品的采集参照《兽药质量监督抽样规定》执行，并 按产品标签存贮条件保存，应有相应的防交叉污染、防混淆、防损措施。 6.2试料的制备 固态样品：参照GB/T20195制备试样，粉碎后过0.45mm孔径的分析筛，混匀，装入磨口瓶中，按 产品标签存贮条件保存，备用。 液态样品：用适宜方法使试料充分混匀，取适量装入密闭容器中，按产品标签存贮条件保存，备用。 7前处理 一般包含提取、净化、富集/稀释等操作，宜涵盖、兼顾多种化合物。前处理方法可参考附录A。 8筛查 8.1谱库准备 8.1.1高效液相色谱仪（配二极管阵列检测器） 二级管阵列筛查谱库应至少包括：化合物名称、保留时间、特征吸收光谱。 8.1.2高效液相色谱-串联质谱仪 高效液相色谱-三重四极杆质谱筛查谱库应至少包括：化合物名称、保留时间、母离子质荷比、2 个及以上主要特征碎片离子质荷比及相对离子丰度比。 8.1.3高效液相色谱-三重四极杆线性离子阱质谱仪 高效液相色谱-三重四极杆线性离子阱质谱筛查谱库应至少包括：化合物名称、保留时间、母离子 质荷比、主要特征碎片离子质荷比及相对离子丰度、固定能量下的增强碎片离子全扫描谱图。 8.1.4高效液相色谱四极杆-飞行时间质谱仪和高效液相色谱四极杆-静电场轨道阱质谱仪 高效液相色谱四极杆-飞行时间质谱仪和高效液相色谱四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱仪包括一 级谱库和二级谱库，可单独使用，也可联合使用。 一级谱库应至少包括：化合物名称、保留时间、母离子精确质荷比、同位素离子簇分布。 二级谱库应至少包括：化合物名称、保留时间、母离子精确质荷比、主要特征碎片离子精确质荷比 及相对离子丰度、同位素离子簇分布。 8.2检测 在确认仪器处于正常工作状态后，根据目标化合物特性选择适宜的检测条件，供仪器检测。仪器条 件可参考附录B。 8.3谱库检索 8.3.1高效液相色谱仪（配二极管阵列检测器） 全国团体标准信息平台 T/ZNZ123—2022 4读取可疑峰的光谱数据，进行谱库检索，查找保留时间和光谱数据均匹配的化合物。参照农业农村 部公告第289号，全部满足表1中条件时，认为筛查到可疑化合物/疑似阳性样品，开展目标物确证；否 则视情况进入非目标物筛查分析或直接判为筛查结果阴性。 表1高效液相色谱仪-二极管阵列检测器筛查的符合性判定条件 类别 判定条件 色谱1、保留时间大于系统死体积时间 2、目标物色谱峰采集点数≥5个 3、与谱库中对照品的保留时间差异≤±20% 光谱 （二级管阵列扫描谱图）在一定波长范围内，与库谱中对照品光谱图无明显差异 8.3.2高效液相色谱串联质谱仪 读取检测数据，进行谱库检索，查找保留时间、母离子和主要特征碎片离子质荷比均匹配的化合物。 参见附录C。全部满足表2中条件时，认为筛查到可疑化合物/疑似阳性样品，开展目标物确证；否则视 情况进入非目标物筛查分析或直接判为筛查结果阴性。 表2高效液相色谱串联质谱仪筛查的符合性判定条件 类别 判定条件 色谱1、保留时间大于系统死体积时间 2、目标物色谱峰采集点数≥5个 3、与谱库中对照品的保留时间差异≤±10% 质谱 （多反应离子监测谱图）母离子和主要特征碎片离子均有检出，质荷比误差≤1.0Da 8.3.3高效液相色谱-三重四极杆线性离子阱质谱仪 读取多反应离子监测数据，进行谱库检索，查找保留时间、母离子质荷比、主要特征碎片离子质荷 比均匹配的化合物。参见附录C。全部满足表3中条件时，认为筛查到可疑化合物/疑似阳性样品，开展 目标物确证；否则视情况进入非目标物筛查分析或直接判为筛查结果阴性。 表3高效液相色谱-三重四极杆线性离子阱质谱仪筛查的符合性判定条件 类别 判定条件 色谱1、保留时间大于系统死体积时间 2、目标物色谱峰采集点数≥5个 3、与谱库中对照品的保留时间差异≤±10% 质谱 （多反应离子监测谱图）母离子和主要特征碎片离子均有检出，质荷比误差≤1.0Da 8.3.4高效液相色谱四极杆-飞行时间质谱和四极杆-静电场轨道阱质谱仪 8.3.4.1一级谱库 全国团体标准信息平台 T/ZNZ123—2022 5读取总离子流扫描数据，提取目标质荷比±10ppm窗口的离子流图，进行谱库检索，查找保留时间 和母离子质荷比均匹配的化合物（参见附录C）。参照农业农村部公告第312号，全部满足表4中条件时， 认为筛查到可疑化合物/疑似阳性样品，开展目标物确证；否则视情况进入非目标物筛查分析或直接判 为筛查结果阴性。 表4高分辨质谱仪一级谱库筛查的符合性判定条件 类别 判定条件 色谱1、保留时间大于系统死体积时间 2、目标物色谱峰采集点数≥5个 3、与谱库中对照品的保留时间差异≤±5% 质谱 （母离子谱图）母离子质量数提取窗口：±10ppm 1、当目标母离子精确质荷比≥200时，其相对偏差应≤10ppm； 2、当目标母离子精确质荷比<200时，其相对偏差应≤1mDa； 8.3.4.2二级谱库 读取二级谱库数据，提取目标质荷比±20ppm窗口的离子流图，进行谱库检索，查找保留时间、母 离子精确质荷比、主要特征碎片离子精确质荷比及相对离子丰度均匹配的化合物（参见附录C）。参照 农业农村部公告第312号，全部满足表5中条件时，认为筛查到可疑化合物/疑似阳性样品，开展目标物 确证；否则视情况进入非目标物筛查分析或直接判为筛查结果阴性。 表5高分辨质谱仪二级谱库筛查的符合性判定条件 类别 判定条件 色谱1、保留时间大于系统死体积时间 2、目标物色谱峰采集点数≥5个 3、与谱库中对照品的保留时间差异≤±5% 质谱 （母离子、碎片离子谱图）1、母离子质量数提取窗口：±10ppm 母离子检出，且：当目标母离