T/GZCX018-2022 ICS67.080.10 X04 T/GZCX 团 体 标 准 T/GZCX018-2022 刺梨及其制品中总黄酮含量的测定 2022-11-22发布 2022-12-01实施 贵州省刺梨行业协会发布 全国团体标准信息平台 T/GZCX018-2022 第1页共7页前言 本标准按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分： 标准化文件的结构和起草规则》给出的规则起草。 本标准由国药集团贵州大健康产业发展有限公司提出。 本标准由贵州省刺梨行业协会归口。 本标准起草单位：国药集团贵州大健康产业发展有限公 司、国药集团同济堂（贵州）制药有限公司、贵州初好农业 科技开发有限公司、贵州金维宝生物技术有限公司、贵州天 赐贵宝食品有限公司、贵州明安实业有限公司、中志浩刺梨 产业开发(贵州)有限公司。 本标准主要起草人：漆正方、孙宜春、钱品、陈杉、闫 福泉、朱荣金、蔡志林、王鹏娇、王智旺。 本标准为首次发布。 全国团体标准信息平台 T/GZCX018-2022 第2页共7页刺梨及其制品中总黄酮含量的测定 1范围 本标准规定了刺梨及其制品中总黄酮含量（以芦丁计）测定的 紫外分光光度法。 本标准适用于刺梨鲜果、刺梨干果、刺梨果脯、刺梨冻干粉、 刺梨喷干粉、刺梨原汁、刺梨浓缩汁等刺梨及其制品中总黄酮含量 的测定。 本标准总黄酮的检出限：0.63mg/100g；定量限：7.0mg/100g。 2规范性引用文件 本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注 日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的 引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。 GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1刺梨鲜果 新鲜、未经过加工的刺梨成熟果实。 3.2刺梨干果 以刺梨果实为原料，经脱水，未经糖渍，添加或不添加食品添 全国团体标准信息平台 T/GZCX018-2022 第3页共7页加剂制成的刺梨制品。 3.3刺梨果脯 以刺梨果实、白砂糖或其他甜味剂为主要原料，添加或不添加 食品添加剂，经预处理、糖渍、干燥或不干燥等工艺制成的刺梨制 品。 3.4刺梨冻干粉 通过真空冷冻干燥方法制成的刺梨粉末制品。 3.5刺梨喷干粉 以刺梨果实、刺梨原汁或刺梨浓缩汁，经喷雾干燥制成的刺梨 粉末制品。 3.6刺梨原汁 以刺梨果实为原料，经清洗、物理破碎、机械压榨、过滤或不 过滤、灭菌后取得的清汁或浊汁制品。 3.7刺梨浓缩汁 以刺梨果实为原料，经清洗、物理破碎、机械压榨等工艺后， 再经浓缩工艺除去一定水分后制得的制品。 4方法原理 黄酮类化合物是具有苯并吡喃环结构的一类天然化合物的总称。 溶于乙醇的黄酮类化合物在弱碱性条件下，与铝盐络合反应后生成 有色物质，可在420nm波长附近产生最大吸收。在一定浓度范围内， 其吸光度与黄酮类化合物的含量成正比。与芦丁标准品比较，可定 量测定黄酮类化合物的含量。 全国团体标准信息平台 T/GZCX018-2022 第4页共7页5试剂和材料 5.1试剂 除另有规定外，仅使用分析纯试剂和GB/T6682规定的一级水。 5.1.1芦丁（C27H30O16，CAS号：153-18-4）标准品，纯度≥98.0%。 5.1.2无水乙醇（C2H6O）。 5.1.3硝酸铝[Al.(NO3)3·9H2O]。 5.1.4醋酸钾（C2H3KO2）。 5.2试剂配制 5.2.1芦丁对照品溶液（1mg/mL）：精密称取50mg（精确至0.1 mg）芦丁标准品，加少量无水乙醇溶解，转移至50mL容量瓶中， 加无水乙醇定容至刻度，摇匀。 5.2.2硝酸铝溶液（100g/L）：称取Al(NO3)3·9(H2O)17.60g （精确至0.01g），加少量水溶解，转移至100mL容量瓶中，加 水定容至刻度，摇匀。 5.2.3醋酸钾溶液（98g/L）：称取C2H3KO29.80g（精确至0.01 g），加少量水溶解，转移至100mL容量瓶中，加水定容至刻度， 摇匀。 6仪器和设备 6.1紫外分光光度计。 6.2高速破壁机。 6.3分析天平，感量为0.0001g。 全国团体标准信息平台 T/GZCX018-2022 第5页共7页6.4超声波提取器。 6.5离心机，4000r/min。 6.6组织捣碎机。 7分析步骤 7.1试样制备 将刺梨鲜果（3.1）刺梨鲜果去皮、去籽，组织捣碎机打浆，混 合均匀，备用；去除刺梨果干（3.2）和刺梨果脯（3.3）中可见杂 质，用高速破壁机粉碎，将其制成粉状，备用；刺梨冻干粉（3.4） 和刺梨喷干粉（3.5）研磨均匀备用。 7.2试样提取 7.2.1固态试样： 取7.1样品0.5~2g，精密称定（精确到0.0001g），置烘 干恒重具塞锥形瓶中，加无水乙醇50mL，称定重量，置于超声波 提取器中超声处理1小时（每20分钟摇匀溶液一次），放冷，再称 定重量，用无水乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，续滤液离心10 分钟，取上清液，即得。 7.2.2液态试样： 刺梨原汁（3.6）、刺梨浓缩汁（3.7）等液体样品，精密量取 样品1~10mL，置烘干恒重具塞锥形瓶中，加无水乙醇50mL，称定 重量，置于超声波提取器中超声处理1小时（每20分钟摇匀溶液一 次），放冷，再称定重量，用无水乙醇补足减失的重量，摇匀，滤 过，续滤液离心10分钟，取上清，即得。 全国团体标准信息平台 T/GZCX018-2022 第6页共7页7.3标准工作曲线 准确量取芦丁对照品溶液（5.2.1）0.0mL、1.0mL、2.0mL、 3.0mL、4.0mL、5.0mL分别置于50mL容量瓶中，依次加入硝酸 铝溶液（5.2.2）1mL，醋酸钾溶液（5.2.3）1mL，摇匀后加水至 刻度。静置1小时后，在420nm处测定吸光度。以50mL溶液中芦 丁质量（mg）为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。 7.4空白试验 与试样的测定平行进行，取相同量的所有试剂，采用相同的分 析步骤，但不添加试样。 7.5试样的测定 准确量取提取液（7.2）1.0mL置于50mL容量瓶中，依次加 入硝酸铝溶液（5.2.2）1mL，醋酸钾溶液（5.2.3）1mL，摇匀后 加水至刻度。静置1小时后，在420nm处测定吸光度。 若样品总黄酮含量较高（吸光度不在0.1~0.8之间），可适当 稀释后再进行分析测定。 8分析结果的表述 8.1刺梨鲜果、刺梨干果等固态试样 试样中总黄酮含量（以芦丁计）以百分含量（%）表示，按公式 （1）进行计算。 x=m×d M×1000×100%……………………（1） 式中: x───试样中总黄酮含量（以芦丁计）； 全国团体标准信息平台 T/GZCX018-2022 第7页共7页m───由标准曲线查出的样品中芦丁质量，单位为毫克（mg）； M───试样质量，单位为克（g）； d───样品稀释倍数； 计算结果保留小数点后两位。 8.2刺梨原汁、刺梨浓缩汁等液态试样 样品中总黄酮含量（以芦丁计）以百分含量（%）表示，按式（2） 计算： x=m×d v×1000×100%……………………（2） 式中: x───试样中总黄酮含量（以芦丁计）； m───由标准曲线查出的样品中芦丁质量，单位为毫克（mg）； v───试样体积，单位为毫升（mL）； d───样品稀释倍数； 计算结果保留小数点后两位。 9精密度 在重复条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算 术平均值的10%。 _______________________________ 全国团体标准信息平台