T/GZCX019-2022 ICS67.080.10 X04 T/GZCX 团 体 标 准 T/GZCX019-2022 刺梨及其制品中多糖含量的测定 2022-11-22发布 2022-12-01实施 贵州省刺梨行业协会发布 全国团体标准信息平台 T/GZCX019-2022 第1页共8页前言 本标准按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分： 标准化文件的结构和起草规则》给出的规则起草。 本标准由国药集团贵州大健康产业发展有限公司提出。 本标准由贵州省刺梨行业协会归口。 本标准起草单位：国药集团贵州大健康产业发展有限公 司、国药集团同济堂（贵州）制药有限公司、贵州初好农业 科技开发有限公司、贵州金维宝生物技术有限公司、贵州天 赐贵宝食品有限公司、贵州明安实业有限公司、中志浩刺梨 产业开发(贵州)有限公司。 本标准主要起草人：漆正方、孙宜春、钱品、陈杉、闫 福泉、朱荣金、蔡志林、王鹏娇、刘正芬。 本标准为首次发布。 全国团体标准信息平台 T/GZCX019-2022 第2页共8页刺梨及其制品中多糖含量的测定 A 1范围 本标准规定了刺梨及其制品中多糖含量测定的紫外分光光度法。 本标准适用于刺梨鲜果、刺梨干果、刺梨果脯、刺梨冻干粉、 刺梨喷干粉、刺梨原汁、刺梨浓缩汁等刺梨及其制品中多糖含量的 测定。 本标准方法的检出限：5.0mg/100g；定量限：8.9mg/100g。 2规范性引用文件 本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注 日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的 引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。 GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1刺梨鲜果 新鲜、未经过加工的刺梨成熟果实。 3.2刺梨干果 以刺梨果实为原料，经脱水，未经糖渍，添加或不添加食品添 加剂制成的刺梨制品。 3.3刺梨果脯 全国团体标准信息平台 T/GZCX019-2022 第3页共8页以刺梨果实、白砂糖或其他甜味剂为主要原料，添加或不添加 食品添加剂，经预处理、糖渍、干燥或不干燥等工艺制成的刺梨制 品。 3.4刺梨冻干粉 通过真空冷冻干燥方法制成的刺梨粉末制品。 3.5刺梨喷干粉 以刺梨果实、刺梨原汁或刺梨浓缩汁，经喷雾干燥制成的刺梨 粉末制品。 3.6刺梨原汁 以刺梨果实为原料，经清洗、物理破碎、机械压榨、过滤或不 过滤、灭菌后取得的清汁或浊汁制品。 3.7刺梨浓缩汁 以刺梨果实为原料，经清洗、物理破碎、机械压榨等工艺后， 再经浓缩工艺除去一定水分后制得的制品。 4方法原理 多糖在浓硫酸的作用下，水解成单糖并迅速脱水生成糖醛衍生 物，糖醛酸衍生物与苯酚反应生成橙黄色溶液，在490nm处有特征 吸收。 5试剂和材料 5.1试剂 除另有规定外，仅使用分析纯试剂和GB/T6682规定的一级水。 全国团体标准信息平台 T/GZCX019-2022 第4页共8页5.1.1葡萄糖（C6H12O6，CAS号：50-99-7）标准品，纯度≥98.0%。 使用前应于105℃恒温干燥至恒重。 5.1.2硫酸（H2O4S），ρ=1.84g/mL。 5.1.3无水乙醇（C2H6O）。 5.1.4苯酚（C6H6O），重蒸馏。 5.2试剂配制 5.2.1葡萄糖对照品溶液（100mg/L）：称取0.1g（精确至0.001 g）葡萄糖标准品，置100mL烧杯中，加少量水溶解，转至1000mL 棕色容量瓶中，加上定容至刻度，摇匀，置4℃冰箱中避光保存。 5.2.280%乙醇溶液：量取无水乙醇80mL，置100mL容量瓶中， 加水定容至刻度。 5.2.380%苯酚溶液：称取苯酚80g（精确至0.01g），置100mL 烧杯中，加水少量溶解，转移至100mL棕色容量瓶中，加水定容至 刻度，摇匀，置4℃冰箱中避光保存。 5.2.45%苯酚溶液：量取5mL80%苯酚溶液（5.2.3），溶于75mL 水中，混匀，现配现用。 6仪器和设备 6.1紫外分光光度计。 6.2高速破壁机。 6.3分析天平，感量为0.0001g。 全国团体标准信息平台 T/GZCX019-2022 第5页共8页6.4超声波提取器。 6.5涡旋振荡器。 6.6离心机，4000r/min。 6.7组织捣碎机。 7分析步骤 7.1试样制备 将刺梨鲜果（3.1）刺梨鲜果去皮、去籽，组织捣碎机打浆，混 合均匀，备用；去除刺梨果干（3.2）和刺梨果脯（3.3）中可见杂 质，用高速破壁机粉碎，将其制成粉状，备用；刺梨冻干粉（3.4） 和刺梨喷干粉（3.5）研磨均匀备用。 7.2试样提取 7.2.1固态试样： 取7.1样品0.2~2g，精密称定（精确到0.0001g），置50 mL具塞离心管内，用5mL水浸润样品，缓慢加入无水乙醇20mL， 同时用涡旋振荡器振摇，使混合均匀，置超声波提取器中超声提取 30分钟。提取结束后，离心10分钟，弃去上清液。沉淀用80%乙醇 溶液10mL洗涤后离心5分钟，弃去洗涤液，用水将上述沉淀物转 移入圆底烧瓶。加水50mL，置超声波提取器中超声处理30分钟， 滤过，收集滤液；沉淀物再加水超声、滤过，重复2次。残渣洗涤 2～3次，洗涤液合并滤液转至200mL容量瓶中，加水定容至刻度。 此溶液为样品测定液（如颜色过深，可通过C18SPE小柱等进行脱 色处理）。 全国团体标准信息平台 T/GZCX019-2022 第6页共8页如样品多糖含量较高，可适当稀释后再进行分析测定。 7.2.2液态试样： 刺梨原汁（3.6）、刺梨浓缩汁（3.7）等液体样品，精密量取 样品5~10mL，置50mL具塞离心管内，其余操作同7.2.1。 7.3标准工作曲线 准确量取葡萄糖对照品溶液（5.2.1）0.0mL、0.2mL、0.4mL、 0.6mL、0.8mL、1.0mL分别置于20mL具塞试管中，用水补至1.0 mL。加入5%苯酚溶液1.0mL（5.2.4），然后快速加入硫酸5.0mL （5.1.2）（与液面垂直加入，勿接触试管壁，以便与反应液充分混 合，静置10分钟。使用旋涡振荡器使反应液充分混合，将试管放置 于30℃水浴中反应20分钟，在490nm处测定吸光度。以葡萄糖 质量浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。 7.4空白试验 与试样的测定平行进行，取相同量的所有试剂，采用相同的分 析步骤，但不添加试样。 7.5试样的测定 准确量取试样提取液（7.2)适量，置于20mL具塞试管中，加 入5%苯酚溶液1.0mL（5.2.4），然后快速加入硫酸5.0mL（5.1.2） （与液面垂直加入，勿接触试管壁，以便与反应液充分混合，静置 10分钟。使用旋涡振荡器使反应液充分混合，将试管放置于30℃ 水浴中反应20分钟，在490nm处测定吸光度。 若样品多糖含量较高（吸光度不在0.1~0.8之间），可适当稀 全国团体标准信息平台 T/GZCX019-2022 第7页共8页释后再进行分析测定。 8分析结果的表述 8.1刺梨鲜果、刺梨干果等固态试样 样品中多糖含量以质量分数x计，单位以克每百克（g/100g） 表示，按式（1）计算： x=m1×V1 m2×V2×0.9 10-4……………………（1） 式中： m1——从标准曲线上查得样品测定液中含糖量，单位为微克（μ g）； V1——样品定容体积，单位为毫升（mL）； V2——比色测定时所移取样品测定液的体积，单位为毫升（mL）； m2——样品质量，单位为克（g）； 0.9——葡萄糖换算成葡聚糖的校正系数。 计算结果保留至小数点后两位。 8.2刺梨原汁、刺梨浓缩汁等液态试样 样品中多糖含量以质量分数x计，单位以克每百毫升（g/100mL） 表示，按式（2）计算： x=m1×V1 V×V2×0.9 10-4……………………（2） 式中： m1——从标准曲线上查得样品测定液中含糖量，单位为微克（μ g）； 全国团体标准信息平台 T/GZCX019-2022 第8页共8页V1——样品定容体积，单位为毫升（mL）； V2——比色测定时所移取样品测定液的体积，单位为毫升（mL）； V——样品体积，单位为毫升（mL）； 0.9——葡萄糖换算成葡聚糖的校正系数。 计算结果保留至小数点后两位。 9精密度 在重复条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算 术平均值的10%。 _______________________________ 全国团体标准信息平台